鲍曼不动杆菌耐药性快速检测方法的建立与评估

目的评估对实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测鲍曼不动杆菌耐药性方法的效果。方法设计鲍曼不动杆菌(ATCC 19606)外膜蛋白A特异性探针,采用实时荧光定量PCR准确测定63株鲍曼不动杆菌经一定浓度庆大霉素、米诺环素、美罗培南、左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴坦孵育后的生长情况,比较抗菌药物孵育0和6h后鲍曼不动杆菌基因组DNA量,判断鲍曼不动杆菌耐药性,并与微量肉汤稀释法结果进行对比。结果建立的实时荧光定量PCR检测鲍曼不动杆菌耐药性方法与微量肉汤稀释法一致性高,Kappa值为0.879,P0.05。以微量肉汤稀释法为参考方法,实时荧光定量PCR的符合率达93.97%,灵敏度为92.53%,特异性为95.74%,阳性预测值为96.41%,阴性预测值为91.22%,Youden指数为0.88。结论实时荧光定量PCR与微量肉汤稀释法结果有高度一致性,且前者灵敏度高、特异性强、检测速度快,可用于快速检测鲍曼不动杆菌的耐药性。     

肠道微生物对大脑和行为的影响

正人体肠道为微生物提供了良好的生存环境,成人肠道微生物的数量多达1012~1014个,不仅远远超过人体表皮微生物的数量,而且10倍于人体自身细胞数目,肠道微生物组中包含的基因数目大概是人体自身基因数目的100倍,因此许多研究者将人体肠道微生物群落看作是人体的一个"器官"或是人体的第二基因组。肠道微生物具有与宿主进行信息交流,消耗、贮藏和重新     

质粒介导的喹诺酮类耐药基因qepA的流行现状及耐药机制研究

肠杆菌科细菌对喹诺酮类药物的耐药机制多集中在染色体介导的靶位耐药和膜耐药,而质粒介导的喹诺酮类耐药报道较罕见.目前,已报道的有3种,分别由qnr基因、氨基糖苷乙酰基转移酶基因aac(6′)-Ib-cr和qepA基因介导.对于qnr基因介导的喹诺酮类耐药机制我们已做了相关的前期研究工作[1].质粒介导的qepA基因已被认为是新的影响喹诺酮类耐药的分子机制[2],可通过外排泵机制介导细菌对亲水性喹诺酮类药物的耐药.为了解武汉大学人民医院耐喹诺酮类病原菌中质粒介导的耐药基因qepA流行现状及耐药特征,有效开展qepA基因介导的喹诺酮耐药水平监测,加强消毒隔离措施和耐药菌株的检测,以减少该类菌株的出现和流行,我们对质粒介导的喹诺酮类耐药基因qepA的流行现状及耐药机制进行了研究.     

CRE耐药性分析及eCIM联合mCIM的临床应用

目的了解武汉大学人民医院碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的临床感染特点和耐药性,探讨乙二胺四乙酸-碳青霉烯类失活法(eCIM)联合改良碳青霉烯类失活法(mCIM)的临床应用,为有效防控院内感染和合理使用抗菌药物提供依据。方法分析分离自不同类型临床样本的非重复CRE的药物敏感性试验数据。另随机选取80株亚胺培南和/或美罗培南敏感性降低[最小抑菌浓度(MIC)≥2μg/mL]的CRE,联合mCIM和eCIM判断其产金属β-内酰胺酶和丝氨酸碳青霉烯酶的情况。结果共检出329株CRE,以肺炎克雷伯菌为主(59.0%),分布科室广泛,其中重症医学科和神经外科分别占16.4%和16.1%,感染部位多见于呼吸道(39.2%)。CRE总体对米诺环素和替加环素耐药率较低,分别为25.1%和2.9%,对其他常用抗菌药物的耐药率均高于50.0%。随机选取的80株CRE中有57株产碳青霉烯酶,其中产金属β-内酰胺酶的CRE 28株。结论武汉大学人民医院CRE耐药形势严峻,应随时监测,并根据药物敏感性试验结果合理用药。eCIM联合mCIM检测成本低、操作简单,是一种经济、高效的表型筛选方法。     

老年产ESBLs肺炎克雷伯菌感染耐药现状及基因型分析

目的了解产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌在老年患者中的感染情况及耐药基因型特点。方法对2002年1月～2003年12月651份老年患者的各类标本中的肺炎克雷伯菌进行分离鉴定,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并分别使用对TEM型、SHV型和CTXM型基因特异的引物,聚合酶链反应(PCR)扩增产酶菌的ESBLs基因。结果共分离出123株肺炎克雷伯菌,其中产ESBLs的占25.2%。ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌。31株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,TEM型基因占48.4%,CTXM型基因占35.5%,SHV型基因占29%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌在老年患者中的感染率较高,耐药性较强,其基因型分布呈多样性,合理使用抗生素,加强对特定基因的监控,是控制其医院感染流行的重要措施。     

老年患者铜绿假单胞菌感染及耐药监测

目的　分析铜绿假单胞菌引起老年患者感染的特点及对 2 2种抗菌药物的耐药谱 ,为临床治疗用药提供合理方案。方法　用VITEK32型全自动细菌分析系统对我院老年住院患者临床分离细菌进行鉴定 ,共分离出 1 70株铜绿假单胞菌 ,并采用Kirby Bauer法选用 2 2种抗菌药物进行体外药物敏感试验。结果　 1 70株铜绿假单胞菌主要来源于痰标本 ,占 76 .5 % ;其在临床病区分布中居前 2位者依次为呼吸内科、老年病科。 1 70株铜绿假单胞菌对阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星、哌拉西林 /他唑巴坦、亚胺培南和妥布霉素的耐药率较低 ,均小于 40 % ;其对氯霉素、复方新诺明、氨苄西林、头孢噻吩、萘啶酸、阿莫西林 /克拉维酸和头孢西丁则表现出高度耐药。结论　铜绿假单胞菌是引起医院感染的最常见病原菌之一 ,尤易侵袭老年患者 ,对抗菌药物呈多重耐药 ,临床治疗应结合老年患者的特点合理选用抗菌药物 ,以减少耐药株的出现与扩散     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎临床危险因素分析

目的探讨产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎的临床危险因素。方法选取2001-07~2004-12武汉大学人民医院收治的肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎101例,38例产ESBLs肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎作为病例组,63例非产ESBLs肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎作为对照组。对产ES-BLs肺炎克雷伯菌肺炎的危险因素进行病例对照研究。结果ESBLs阳性组对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性组。单因素分析发现住院时间大于20d、入住重症监护病房(ICU)、气管插管或切开、留置导管、机械通气、头孢噻肟的使用是产ESBLs肺炎克雷伯菌引起医院获得性肺炎的主要危险因素。多因素非条件lo-gistic回归分析表明,头孢噻肟的使用是产ESBLs肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎的独立危险因素。结论长程住院、入住ICU等是ESBLs肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎发生的危险因素,尤以头孢噻肟的使用是主要危险因素。     

慢性乙型肝炎患者PLT、PAIg、HBVDNA载量的检测及关系探讨

目的：探讨慢性乙型肝炎患者PLT与HBVDNA载量及血小板相关抗体（PAIgG、PAIgA、PAIgM）的相关性并将两者进行比较,为慢性乙型肝炎伴血小板减少患者的诊治提供科学依据。方法：选取60例慢性乙型肝炎无脾亢住院患者作为研究对象,按照2000年全国病毒性肝炎防治方案制定的诊断标准,分为慢性肝炎轻度组、中度组和重度组,观察抗病毒药物干预前后各指标的变化,选取30例健康人作为正常对照组,采用实时荧光定量PCR方法检测HBVDNA载量,用ELISA方法检测PAIg,用全血细胞仪检测PLT。对所得的结果采用SPSS10.0进行比较分析。结果：慢性乙型肝炎患者用药前各组循环血液中PLT含量明显低于正常对照组（P〈0.05）,且随病情的加重而减少,慢性肝炎轻、中、重患者血中检测到HBVDNA,且随病情的加重而增高（P〈0.05）。而对照组未检测到HBVDNA,各组明显高于正常对照组（P〈0.05）,随病情的加重而增高。用药后慢性肝炎轻、中、重患者各组中PLT值均回升,与用药前相比差别有统计学意义（P〈0.05）,HBVDNA载量明显下降,其中慢性肝炎轻度患者HBVDNA消失。3组间PAIg值用药前后与正常对照组比较,均差异无统计学意义（均P〉0.05）。观察组用药前后PLT与HBVDNA呈负相关（r为-0.817和-0.902,P〈0.01）,而与PAIg各值明显相关。结论：慢性乙型肝炎无脾亢患者PLT与PAIg无关,与HBVDNA载量呈负相关。建议临床上可按不同阶段针对不同因素治疗血小板下降,未出现脾亢时以保肝、护肝、抗病毒为主,出现脾亢的患者血小板下降时主要针对脾亢进行治疗。     

肺炎克雷伯菌下呼吸道感染的耐药性及基因分型研究

目的 了解肺炎克雷伯菌下呼吸道感染株的耐药现状，监测耐药株的流行趋势。方法 采用微量稀释法对86株引起下呼吸道感染的肺炎克雷伯菌进行抗生素药敏试验和超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)检测，并对产ESBLs菌株以随机扩增多态性DNA（RAPD）法进行基因分型。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌占20．9％，其中83．3％来源于呼吸科重症监护病房（RICU）。ESBLs阳性菌对10种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌，并同时高耐氨基糖苷类、喹诺酮类抗生素。18株产ESBLs肺炎克雷伯菌分为12型。其中3株属于A型，5株属于B型，其它为不同类型。结论 RICU病房有产ESBLs肺炎克雷伯菌分为12型。其中3株属于A型，5株属于B型，其它为不同类型。结论 RICU病房有产ESBLs肺炎克雷伯菌同一克隆株集中分布，提示流行可能。