性激素通过影响血脂、细胞免疫功能及氧化／抗氧化系统影响衰老

目的　通过全国流行病学调查 ,探讨血清性激素水平变化与衰老的关系。方法　以健康自愿者 2 2 5 3例为研究对象 ,应用放射免疫法测定性激素 ;全自动生化仪测定血脂谱、血糖 (GLU)及载脂蛋白 (apo) ;用流式细胞仪测定T细胞亚群 ;采用硫代巴比妥酸法和Oyanagui的亚硝酸盐形成法分别测定血清丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)。结果　老年男性随增龄促卵泡激素 (FSH)、黄体生成素 (LH )血清浓度均显著增加 ;睾酮 (T)、游离睾酮 (FT)随增龄明显下降 ,17β 雌二醇 (17β E2 )则相反 ,E2 /T比值随增龄明显升高。垂体泌乳素 (PRL)随增龄有所升高、孕酮 (P)变化不明显。血清胆固醇 (TC)随增龄升高 ,甘油三酯 (TG)无明显变化 ;与年轻组比 ,老年组高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、HDL C/TC显著降低 ,同时低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)显著升高 ,HDL C/LDL C随增龄有所降低 ;apoA1和apoB均随增龄显著升高 ,apoA1/apoB比值则降低 ;GLU各年龄段无明显变化。与年轻组相比老年组CD3+ ,CD4 + 各组均明显下降 ;而CD8+ 随增龄明显升高 ,CD4 + /CD8+ 比值随增龄显著降低。与年轻组相比 ,老年组MDA明显升高 ,SOD却显著降低。通过偏相关分析 (双侧检验 ,控制BMI、FSH、LH、PRL)显示男性TC、LDL C、apoA1、apoB、CD8+ 、MDA均与E2     

肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶作用机制系列研究

针对肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物的作用和调节机制进行了较深入的系列研究。在包括肺癌、前列腺癌和黑色素瘤的几组具有不同转移潜能的人肿瘤细胞系中，癌细胞产生MMP-2和MMP-9的能力与其侵袭转移能力密切相关。进一步通过反义基因转染技术证实，抑制MMP-9基因表达可以明显降低高转移癌细胞的体外侵袭及裸鼠体内自发转移能力。将金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1，TIMP-2和TIMP-3基因分别导入高转移癌细胞，可以观察到转染细胞的侵袭转移能力受到明显抑制。说明通过选择性抑制MMPs基因表达或增强TIMPs基因表达均可在一定程度上达到抑制肿瘤侵袭转移的目的。与此同时，我们应用定时控制表达技术分别将正义或反义MMP-9基因导入MMP-9不表达或高表达的黑色素瘤细胞，通过四环素控制的分子开关成功实现了MMP-9基因的定时控制表达，为提高临床基因治疗的效果提供了初步实验依据。     

睾酮对兔主动脉内皮细胞NO／EDRF产生的调控

为进一步明确雄性激素对老年男性冠心病的有益作用与一氧化氮（ＮＯ）／内皮衍生的松驰因子（ＥＤＲＦ）的产生有关，我们观察了睾酮对兔主动脉及培养的兔主动脉内皮细胞ＮＯ／ＥＤＲＦ产生的调控作用。采用对兔胚胎肺－６（ＲＦＬ－６）成纤维细胞ｃＧＭＰ形成的刺激作用检测ＮＯ／ＥＤＲＦ的产生。结果表明，雄性激素能刺激兔主动脉及兔主动脉内皮细胞产生ＮＯ／ＥＤＲＦ。提示对雄性激素依赖的ＥＤＲＦ产生引起的血管扩张可能是雄性激素缓解老年男性冠心病患者心绞痛症状及改善心肌缺血的机理之一。     

雌激素抑制雌兔球囊损伤后动脉内膜增生

PTCA术后再狭窄是目前心血管领域有待解决的主要问题之一。越来越多的流行病学资料表明绝经期妇女雌激素替代治疗可预防冠心病的发生。本课题旨在研究雌激素对雌兔动脉球囊损伤后动脉内膜增生的抑制作用。实验方法:21只雌兔随机分成3组,每组7只,一组和二组进行腹主动脉球囊扩张损伤。一组未给予雌激素;二组从球囊损伤前一天开始到损伤后二周给予肌注17—β-雌二醇(100/μg/day);三组作为正常对照组。采用形态学检查观察血管内膜增厚的程度。另14只雌兔(分为二组,实验组和对照组)于球囊损伤后3天观察17—β-雌二醇对分离的兔主动脉片段[~3H]—TDR掺入量的影响。结果表明,雌二醇显著抑制雌兔动脉球囊损伤后动脉内膜的增厚,并显著抑制雌兔主动脉片段[~3H]—TDR掺入量(P<0.01)。上述结果提示雌二醇对雌兔动脉球囊损伤后内膜增厚的抑制作用是通过抑制血管平滑肌细胞增殖,并可能是预防再狭窄率的一条新的途径。     

TIMP－1基因转染对人肺巨细胞癌细胞系生物学行为的影响

利用基因重组技术构建了一个含有全长人ＴＩＭＰ－１ｃＤＮＡ的真核表达重组体。重组质粒通过脂质体法导入高转移入肺巨细胞癌细胞系（ＰＧ细胞）。随机挑选５个Ｇ４１８抗性克隆，并对其中的两个克隆ＰＧ－Ｔ２和ＰＧＴ４进行了深入的研究。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹表明，这两个克隆具有较高的ＴＩＭＰ－１ＲＮＡ表达，其表达水平明显高于ＰＧ细胞和空载体转染对照细胞ＰＧ－ＭＶ。ＰＧ－Ｔ２和ＰＧ－Ｔ４克隆细胞显示出很高的ＴＩＭＰ－１蛋白活性，相同条件下ＰＧ和ＰＧ－ＭＶ未能显示出具有ＴＩＭＰ－１蛋白活性。此外，与其母系ＰＧ细胞及空载体转染对照细胞ＰＧ－ＭＶ相比，ＴＩＭＰ－１转染细胞的增殖速度和侵袭能力明显下降，其在软琼脂上形成克隆和在裸鼠体内成瘤的能力丧失。提示ＰＧ细胞中ＴＩＭＰ－１基因的特异性上调不仅能抑制其侵袭能力，而且对其增殖和成瘤产生抑制作用。     

TIMP—1基因转染对人肺巨细胞癌细胞系生物学行为的影响

利用基因重组技术构建了一个含有全长人ＴＩＭＰ－１ｃＤＮＡ的真核表达重组体。重组质粒通过脂质体法导入高转移人肺巨细胞癌细胞系（ＰＧ细胞）。随机挑选Ｇ４１８抗性克隆，并对其中的两个克隆ＰＧ－Ｔ２和ＰＧ－Ｔ４进行了深入的研究。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹表明，，这两个克隆具有较高的ＴＩＭＰ－１ＲＮＡ表达，其表达水平明显高于ＰＧ细胞和空载体转染对照细胞ＰＧ－ＭＶ，ＰＧ－Ｔ２和ＰＧ－Ｔ４克隆细胞显示出很高的ＴＩＭＰ     

新型一氧化氮合酶抑制剂对败血性休克大鼠升压作用的研究

观察一种新型一氧化氮合酶抑制剂对败血性休克大鼠血压的影响。结果表明该化合物有明显增加败血休克大鼠血压的作用,且优越必硝基精氨酸,可能开发出新的ＮＯＳ抑制剂。     

雄激素对老龄大鼠血管平滑肌组织雄激素受体及血小板源性生长因子受体基因表达的影响

2001年10月至2003年2月，我们通过本试验探讨不同剂量的庚酸睾酮(TE)对衰老雄性大鼠血管平滑肌组织中雄激素受体(AR)及血小板源性生长因子受体β(PDGFR-β)基因表达的影响。     

应用超声心动图预测心包腔内压(心包积液定量诊断的动物实验研究Ⅲ)

目的：利用超声心动图及有创压力监测仪与开胸的犬所制作实验性心包积液动物模型相结合，探讨超声心动图与心包积液量及心包腔内压之间的关系，分析急性心包填塞的成因，指导临床诊断及治疗。方法：选用狗(15条)作为研究对象，构建心包积液动物模型，记录心包腔内所注入液体量，测定舒张末期UCG(R)、(L)、(A)心包积液液性暗区宽度(mm)，计算(R L A)／3的值，记录心包腔内压，依据线性相关及线性回归分析，得出它们之间的回归方程，预测心包腔内压。结果：心包腔内压(IPCP)与超声心动图(R L A)／3呈良好的线性对称正相关关系，线性方程为：IPCP＝1／9(R L A)-41．22。结论：急性心包积液并急性心包填塞时，(R L A)／3及心包腔内压均随着心包积液量的增加呈现线性增高。因此，可以通过超声心动图来计算心包积液量并预测心包腔内压，指导临床进行急性心包填塞患者的治疗及抢救。