抗表皮生长因子受体单链抗体联合放化疗治疗裸鼠移植胰腺癌的研究

目的 针对表皮生长因子受体(EGFR)的腺相关病毒(AAV)介导的靶向治疗作为一种新的治疗方式具有广阔的前景.实验通过对胰腺癌细胞株Aspc-1进行抗EGFR抗体的重组腺相关病毒(rAAV-anti EGFR)治疗及联合放疗、吉西他滨(简称化疗)等综合治疗手段,探索rAAV介导抗EGFR单链抗体对胰腺癌治疗的效果.方法 分别通过单纯化疗、单纯放疗、rAAV-anti EGFR治疗,rAAV-anti EGFR治疗联合化疗、rAAV-anti EGFR治疗联合放疗、rAAV-anti EGFR治疗联合放化疗干预胰腺癌细胞株Aspc-1及裸鼠移植瘤,检测细胞或移植瘤的凋亡率以及移植瘤生长情况.结果 体外实验提示,以上处理方式使肿瘤细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05),rAAV-anti EGFR治疗联合放化疗细胞凋亡率要高于rAAV-anti EGFR治疗、单纯放疗或单纯化疗(P＜0.05).体内实验提示,rAAV-anti EGFR治疗后,肿瘤生长明显受到抑制(P＜0.05),且与放疗和化疗均有协同作用;rAAV-anti EGFR治疗后,组织中凋亡相关Caspase-3活性蛋白表达细胞数要显著高于对照组(P＜0.05),rAAV-anti EGFR治疗联合放疗或化疗其凋亡蛋白表达细胞数要多于单纯治疗组(P＜0.05).结论 rAAV-anti EGFR治疗在体内外均有良好的抗胰腺癌效应,其联合放化疗疗效优于单纯放疗或单纯化疗,且该病毒载体与化疗及放疗具有协同作用.     

重组腺相关病毒载体表达抗表皮生长因子受体抗体对胰腺癌细胞株抑制作用的研究

目的 构建能在体内长期表达抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体的重组腺相关病毒(rAAV)载体,观察其对人胰腺癌细胞株的抑制作用.方法 将抗人EGFR单链抗体可变区(SCFV)基因插入腺相关病毒载体的Kpn Ⅰ和BglⅡ位点,构建成含抗EGFR单链抗体基因的重组腺相关病毒载体(rAAV-anfiEGFR).设立对照组(rAAV1-EGFP组)和实验组(rAAV1-anti EGFR组),观察抗EGFR单链抗体蛋白的表达情况.采用Western blot检测抗体蛋白的表达、CCK-8法和流式细胞仪检测6种人胰腺癌细胞株(PCT-3、SW1990、Capan-1、ASPC-1、MiaPaCa-2及PANC-1细胞)的抑制率和凋亡率.两组比较采用t检验.结果 抗EGFR单链抗体蛋白能在6种人胰腺癌细胞株中表达,对照组和实验组胰腺癌ASPC-1细胞抑制率分别为1.1%±2.4%和15.1%±3.5%,两组比较,差异有统计学意义(t=6.598,P＜0.05).对照组和实验组PANC-1细胞凋亡率分别为7.0%±3.0%和11.4%±2.5%,两组比较,差异无统计学意义(t=1.952,P＞0.05);对照组和实验组SW1990、ASPC-1、Capan-1、PCT-3、MiaPaCa-2细胞凋亡率分别为1.1%±0.8%、1.5%±0.7%、1.7%±1.2%、1.1%±0.7%、2.2%±1.1%和17.6%±2.2%、46.9%±3.9%、20.0%±2.8%、12.1%±1.6%、31.1%±2.5%,两组比较,差异均有统计学意义(t=12.208,19.846,10.405,10.909,18.327,P＜0.05).结论 成功构建了携带抗EGFR单链抗体基因的rAAV载体,其表达的抗EGFR单链抗体蛋白对人胰腺癌细胞株有明显的抑制作用.     

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胰腺良性及低度恶性肿瘤主要包括胰腺囊性肿瘤(浆液性囊腺瘤、黏液性囊性肿瘤和导管内乳头状黏液瘤)、实性假乳头状肿瘤及无功能胰岛细胞瘤等.     

保守和手术治疗儿童MeyersⅢ型胫骨髁间棘骨折临床疗效分析

目的 对闭合复位石膏固定及关节镜下复位可吸收钉固定治疗新鲜MeyersⅢ型儿童胫骨髁间棘骨折进行临床疗效比较.方法 2010年6月至2013年6月间我科接诊的新鲜MeyersⅢ型儿童胫骨髁间棘骨折患儿,在关节镜组医生首诊的患儿共12例(12膝),进行关节镜下复位可吸收钉固定,均获得随访,作为Ⅰ组;同期非关节镜组医生首诊的患儿共19例(19膝),进行闭合复位石膏固定治疗,其中16例(16膝)获得随访,按照年龄(±1岁)、性别选择其中的12例与Ⅰ组进行匹配,作为Ⅱ组.Lysholm评分评价膝关节功能,Lachnmn试验、轴移试验评价膝关节稳定性,KT1000记录双侧膝关节松弛度差异,术后平片按照Wilfinger给出的X线评价标准分级,评价骨折愈合情况及是否存在骨骺早闭.应用PASS软件(V11.0.7,美国NCSS公司)确定所需样本量.应用两个独立样本Wilcoxon秩和检验对两组Lysholm评分进行分析,应用两个独立样本t检验对两组KT1000测量值进行分析,应用Fisher精确概率x2检验对两组Wilfinger X线分级C及D级占比进行分析.结果 男性每组各4例,女性每组各8例;年龄8～14岁,平均年龄10岁3个月.平均随访时间24个月(18～48个月).Ⅰ组12例骨折均获得并维持满意的复位,无内固定断裂、骨块松动、感染、滑膜炎等并发症发生,末次随访时无关节活动受限,膝关节Lysholm功能评分(97.5±2.0)分,Lachnmn试验、轴移试验均阴性,术后3个月内X线显示骨性愈合,按照Wilfinger给出的X线评价标准A6例,B4例,C2例,末次随访时X线检查未见骺板早闭现象.Ⅱ组末次随访时2例存在5°～10°伸直受限,Lysholm膝关节功能评分(88.0±7.2)分,与Ⅰ组比较差异具有统计学意义(U=16.500,W=94.500,Z=-3.273,P=0.001＜0.05),Lachnmn试验5例阳性、轴移试验2例阳性,X线评价B2例,C6例,D4例,两组Wilfinger X线分级C及D占比差异具有统计学意义(x2 =10.667,P =0.003＜0.05).结论 相对于保守治疗,关节镜下复位可吸收软骨钉固定治疗新鲜MeyersⅢ型儿童胫骨髁间棘骨折可更有效的重建膝关节稳定性,改善膝关节功能;可吸收软骨钉固定安全有效,可以避免二次手术.     

关节镜手术治疗儿童膝关节盘状软骨损伤46例疗效观察

目的：评估关节镜下手术治疗儿童膝关节症状性盘状软骨损伤的效果,并对术前症状持续时间与关节退变的关系进行分析。方法选择盘状软骨损伤患者46例、54膝,其中20膝行盘状软骨成形术,10膝行次全切除术,24膝行全切除术。分析患儿就诊时症状持续时间与关节退变的关系,比较不同术式的Lysholm评分。结果随着损伤后症状持续时间的增加,术前Lysholm评分呈下降趋势（P＜0．05）,术前症状持续时间＜3个月者Lysholm评分＜60分占11％,3～8个月者Lysholm评分＜60分占29．4％,＞8个月者Lysholm评分＜60分占42．1％。不同术式末次随访时的Lysholm评分差别无统计学意义（P＞0．05）。比较8例随访时间＞5年的患者末次随访时膝关节平片的Fairbank退变分级,全切组4例除1例Ⅰ级外均为Ⅱ级,成形组4例仅2例表现为Ⅰ级退变。结论关节镜下盘状软骨成形或切除术治疗儿童症状性盘状软骨损伤可有效改善关节症状与功能,但应尽可能避免全部切除;膝盘状软骨损伤急性期过后症状持续应尽早手术治疗。     

儿童经鹰嘴肘关节前脱位治疗方法的探讨

目的 探讨儿童经鹰嘴肘关节前脱位的诊断与治疗.方法 回顾分析2002-2016年收治的8例儿童经鹰嘴肘关节前脱位(北京积水潭医院7例、北京怀柔医院1例)患儿的临床资料,其中手术治疗6例,保守治疗2例.结果 随访时间5～8个月,平均6个月.肘关节活动度:屈133°(130°～140°),伸5°(0°～15°),前臂旋前66°(60°～70°),旋后83°(80°～90°),均获骨折一期愈合,无肘关节再脱位、创伤性关节炎等并发症.结论 儿童经鹰嘴肘关节前脱位是关节内骨折,多合并较重的软组织损伤,大多数情况手法整复不能获得满意复位,当闭合复位失败后,需行切开复位内固定手术.     

带线锚钉固定髌腱止点下移治疗儿童高位髌骨屡发性脱位

目的 探讨带线锚钉固定髌腱止点外侧半内下方移位(Goldthwait术式)联合近端重排(Green术式)手术治疗高位髌骨屡发性脱位的方法和临床疗效.方法 2013年1月至2014年1月收治高位髌骨屡发性脱位患儿10例(12膝).术中行近远端重排手术,远端重排时髌腱止点外侧半内下方移位后带线锚钉固定于胫骨近端干骺端内侧,术中C型臂透视确定髌骨下移位置.结果 10例(12膝)均获随访12～24个月,平均18个月.无内固定松动、断裂、异物反应等并发症,无感染、再脱位及其它不稳定表现,无低位髌骨及膝关节活动受限,未见骺板早闭现象,伸膝0°位和屈膝30°位髌骨外推恐惧试验均为阴性.末次随访时,膝关节Lysholm评分从术前(75.00±5.24)分上升至术后(93.00±4.82)分,Insall-Salvati指数从术前1.40±0.09降至术后1.12±0.08(P＜0.001).结论 带线锚钉固定髌腱止点外侧半内下方移位联合近端重排手术治疗高位髌骨屡发性脱位可以降低髌骨高度,预防再脱位,改善膝关节功能.