利用目标基因测序技术发现马方综合征FBN1新突变

目的:建立目标基因捕获结合第二代测序技术,对马方综合征(Marfan syndrome,MFS)患者的原纤维蛋白-1(fibrillin-1,FBN1)基因进行突变筛查,探讨MFS与FBN1基因突变的关系。方法:提取5例MFS患者外周血全基因组DNA,利用GenCap目标基因捕获技术(北京迈基诺公司),设计FBN1的65个外显子区域特异性捕获探针,与基因组DNA文库进行杂交,将目标基因组区域的DNA片段进行富集后,再利用illumina hiseq2000第二代测序仪进行测序,通过数据分析,确定突变位点,用Sanger测序法对突变位点进行验证。结果:设计合成的目标基因特异性捕获探针可有效地捕捉并富集基因组DNA的目标靶片段。5例患者目标区域平均测序深度为173.85~280.73,97.10%~98.00%目标区域4×覆盖度。经过数据分析及Sanger测序验证,发现1个新的无义突变c.5968 CT(p.Gln1990X)。结论:本研究所建立的GenCap目标基因捕获技术结合illumina hiseq2000第二代测序技术成功的发现了FBN1的新突变。该方法快速而有效,可以使我们对MFS分子病因学有更好的认识。     

CD8~+ T细胞在早期内毒素血症对心功能的损害作用

目的:探讨CD8+T细胞在早期内毒素血症心脏损伤中的浸润及其对心功能的影响。方法:野生雄性小鼠20只随机分为野生对照组和野生内毒素血症组,每组各10只;CD8敲除雄性小鼠10只,随机分为CD8敲除对照组和CD8敲除内毒素血症组,每组各5只。对照组均给予0.9%氯化钠液腹腔注射,内毒素血症组均给予脂多糖腹腔注射。6 h显微超声检测射血分数及短轴缩短分数;即刻处死并收取野生对照组及野生内毒素血症组各3只小鼠心脏组织,流式细胞技术检测心脏细胞悬液中巨噬细胞(F4/80+细胞)及CD8+T细胞、CD4+T细胞分布;其余小鼠心脏组织进行病理切片HE染色,观察心肌纤维断裂及炎症细胞浸润。结果:与野生对照组相比,野生内毒素血症组射血分数及短轴缩短分数显著降低(均为P<0.05);野生内毒素血症组F4/80+细胞、CD4+T细胞及CD8+T细胞均显著增加(均为P<0.05)。与野生内毒素血症组相比,CD8基因敲除内毒素血症组射血分数及短轴缩短分数均显著升高(均为P<0.05)。结论:急性内毒素血症导致心肌纤维损伤、心功能不全,心脏组织CD8+T等炎症细胞浸润;而缺乏CD8+T细胞时则减轻内毒素血症导致的心功能损伤,提示CD8+T细胞在急性内毒素血症诱导的心功能不全早期发挥重要作用。     

mTOR通路对癫痫的影响及中医药干预作用研究进展

癫痫是常见的神经系统疾病,其发病机制复杂,病理改变亦多样化,以海马神经元细胞凋亡、胶质细胞增生、苔藓纤维出芽等为主要病理表现。近年来,国内外对于抗癫痫治疗专注于分子水平及其信号通路的研究,其中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)这一信号通路通过细胞生长增殖、蛋白质代谢、细胞凋亡自噬、突触可塑性等对抗癫痫发挥重要的作用。中医药在治疗癫痫上疗效明显,大量实验证明中医药干预,包括中药单体、中药复方等治疗,能够通过mTOR信号通路发挥抗癫痫作用,从而减少癫痫发作频率、保护神经元细胞、改善癫痫症状等。mTOR信号通路也成为中医药治疗癫痫的重要靶点。现综述mTOR通路对癫痫的影响及中医药干预作用的研究进展。     

综合康复对社区脑卒中患者运动功能及日常生活活动能力的影响

目的 观察综合康复疗法对社区脑卒中患者的运动功能及日常生活活动能力的影响.方法 将276例脑卒中患者随机分为综合康复组、西医康复组和西药组,每组92例.综合康复组采用一站式社区康复;西医康复组采用机能康复疗法;西药组仅以西药治疗.分别于治疗前及干预中（1个月）和干预后（3个月）对3组患者进行运动功能评定（采用SFMA评分法）和日常生活活动能力评定（采用Barthel指数评分法）.结果 治疗1月后,3组的SFMA评分均较治疗前改善,综合康复组与西医康复组对比无统计学意义（t=0.56,P〉0.05）,综合康复组与西药组对比有统计学意义（t=1.73,P〈0.01）,治疗3个月后综合康复组与西医康复组对比有统计学意义（ P〈0.01）.治疗1月后,3组的Barthel评分均较治疗前改善,综合康复组与西医康复组对比有统计学意义（t=2.02,P〈0.05）,治疗3个月后综合康复组与西医康复组对比有统计学意义（t=2.73,P〈0.01）.结论 综合康复疗法、西医康复疗法及西药疗法对社区脑卒中患者的运动功能及日常生活活动能力改善均有一定效果,但综合康复疗法的效果明显优于其他康复疗法,尤其表现在长期疗效方面.     

脑卒中后运动再学习法康复治疗研究撮要

运动再学习方法（motor relearning programme，MRP）是一种运动疗法，它把中枢神经系统损伤后运动功能的恢复训练视为一种再学习或再训练过程。它主要以生物力学、运动科学、神经科学、行为学等为理论基础，以任务或功能为导向，在强调患者主观参与和认知重要性的前提下按照科学的运动学习方法对患者进行再教育以恢复其运动功能。     

围手术期临时心脏起搏器的应用

目的：探讨临时心脏起搏器应用于手术病人的适应证及方法。方法：回顾性总结围手术期应用临时心脏起搏器的病人126例，术前有不同程度的窦房结功能障碍或传导异常，采用穿刺股静脉、锁骨下静脉及右颈内静脉途径分别为46例、44例和36例。以AAI方式起搏8例，VVI方式起搏118例，起搏频率设置为60次，分。结果：52例在完全起搏下完成手术，74例在部分起搏下完成手术．起搏电极维持手术后1小时～4天，未出现心血管意外。结论：对有窦房结或心脏传导异常及高龄病人，手术麻醉期采用临时心脏起搏器保护，可安全完成手术。     

视黄醇结合蛋白检测在观察高血压及糖尿病早期肾脏改变中的应用

视黄醇结合蛋白（retionl binding protein，RBP）是血液中维生素A的转运蛋白，在肝肾疾病的早期诊断和疗效观察中有重要意义。我们选择2003年到我院进行健康查体人群中的高血压、糖尿病及糖尿病伴高血压病例进行血、尿RBP、尿微量白蛋白（mAlb）、尿素（Urea）和肌酐（Cr）的检测，以探讨血RBP在高血压、糖尿病肾脏功能早期损害中的临床意义。     

静脉应用胺碘酮治疗老年冠心病并房颤的临床观察

目的观察胺碘酮治疗老年冠心病并快速心房颤动的临床疗效。方法26例老年冠心病患者,发作时快速房颤后静脉推注胺碘酮治疗,首次3-5 mg/kg,5-10 mg/min注入,继之以微量泵维持,前6 h 1 mg/min,其后0.5 mg/min,观察24 h临床症状及心率、血压的变化情况。结果静脉应用胺碘酮后显效18例（69.2%）,有效23例（88.8%）,无严重不良反应。结论胺碘酮应用于老年冠心病并房颤患者有效率高,副反应少,尤其适用于老年患者的抢救。     

白介素-17对大鼠心肌梗死后心室重塑的影响

目的探讨大鼠心肌梗死(MI)后白介素-17(IL-17)的表达在MI后心室重塑发生中的作用。方法采用液氮冷冻法建立大鼠MI 4周和8周模型。将MI大鼠随机分为MI对照组(C组)、小鼠同型IgG组(G组)和IL-17抗体组(A组)。每组又随机分为4周和8周亚组,每个亚组约8～10只。另设假手术组8只(S组)。共54只。S组和C组分别腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)(0.8mL PBS溶液,并注入0.2mL空气促使液体分散到腹腔内),G组、A组分别注射小鼠同型IgG1+PBS溶液(100μgIgG1溶于0.8mL PBS,同样注入0.2mL空气)、小鼠抗人IL-17单克隆抗体+PBS溶液(100μg IL-17抗体溶于0.8mL PBS溶液,同样注入0.2mL空气)。每隔1天用药1次,连续用药5次。应用超声心动图及病理学方法测定胶原的表达以评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程,同时用Western blot检测IL-17蛋白表达水平。结果超声心动图检测显示大鼠心室重塑模型构建成功。与S组比较,MI组大鼠心肌组织IL-17表达显著增加(P<0.05),与MI组比较,A组IL-17表达显著减少(P<0.05),超声心动图各相关指标明显改善(P<0.05),Ⅰ/Ⅲ胶原比例较之显著降低(P<0.05)。而G组与C组相比无明显差异(P>0.05)。结论 MI后大鼠心肌组织IL-17表达明显增加,IL-17表达可能与MI后心室重塑的发生密切相关。