钙离子通道阻断剂对胰岛素分泌及血糖水平的影响

细胞内钙离子是绝大多数细胞激素释放所必需的,它在胰岛素的分泌过程中也起着重要作用,通过生物电,电镜和放射性同位素等方法对钙离子在胰岛素释放过程中的作用已进行了详细的研究。胰岛素的分泌过程是由细胞质中钙离子的积聚触发的,即所谓的“刺激—分泌偶联”。然而,在离体研究中发现钙离子本身并不能引起胰岛B细胞释放胰岛素,但在葡萄糖和其它促分泌素刺激的胰岛素分泌反应中,钙离子是促进胰岛素分泌所必需的。     

SDF-1-CXCR4轴与缺血性心脏病的干细胞治疗

干细胞治疗为缺血性心脏病患者提供了一种简单、经济、有效的全新治疗方法,其早期临床实验也取得了令人振奋的结果,然而更广泛的临床应用亟需更深入的基础研究的支持。SDF-1-CXCR4轴在干细胞的动员和归巢中起着关键作用,将SDF-1与干细胞治疗结合将为缺血性心脏病的细胞治疗提供一个新的途径。本文就缺血性心脏病的干细胞治疗,SDF-1-CXCR4轴在干细胞动员和心脏损伤、修复中的作用作一综述。     

蛋白质组学及其在心脏病研究中的应用

人类基因组计划(human genome project,HGP)已经完成,但是要真正揭开遗传的奥秘,仅仅了解基因组的碱基序列是很不够的,还必须认识基因的产物即蛋白质.但是,传统的对单个蛋白质进行研究的方式已无法满足后基因组时代的要求.要对生命的复杂活动有全面和深入的认识,必然要在整体、动态、网络的水平上对蛋白质进行研究.蛋白质在疾病中的重要作用使得蛋白质组学在人类疾病的研究中有着极为重要的价值.可以说蛋白质组研究的开展不仅是生命科学研究进入后基因组时代的里程碑,也是后基因组时代生命科学研究的核心内容之一.     

微囊化重组CHO细胞移植促进大鼠心肌梗死后血管新生的实验研究

目的在大鼠心肌梗死部位植入微囊化重组中华仓鼠卵巢（chinese hamster ovary，CHO）细胞，观察其分泌的血管内皮细胞生长因子（VEGF）是否可以促进心肌梗死部位的血管新生，改善心功能。方法通过质粒转染的方法构建可以分泌VEGF的重组CHO细胞系，用微囊包裹，观察微囊内细胞的生长及分泌情况。制备大鼠心肌梗死模型，随机将48只8周龄SD雄性大鼠分成微囊化细胞移植组（MC—CHO组）、单纯细胞移植组（CHO组）、空微囊移植组（MC组）和无血清培养基移植组（对照组），每组12只。移植3周后检测心功能改善情况，病理切片观察微囊结构及囊内细胞存活情况，注射部位微血管计数比较促血管新生效果。结果体外检测可见重组CHO细胞在微囊生长迅速，第8d时培养上清中VEGF达3852pg／ml；移植3周后MC—CHO组左心室大小和心功能明显好于其它3组，差异有统计学意义（P〈0．05）；局部微血管密度MC—CHO组较CHO组、MC组和对照组明显增加（22．3±3．1vs．15．6±2．8，11．4±2．5和13．2±2．7个／每高倍视野，P〈0．05）；组织学检查可见微囊结构完整，内有存活且具有分泌功能的CHO细胞。结论微囊化重组CHO细胞移植可促进大鼠心肌梗死后血管新生，改善心功能。     

不同心脏状态下心梗边缘区注射干细胞后细胞的分布

目的 观察停跳与不停跳两种心脏状态下经心肌注射骨髓间充质干细胞(MSCs)后全身细胞的分布.方法 雄性猪的骨髓间充质干细胞用超顺磁铁纳米颗粒标记.雌性猪心梗后1周随机分为4组.第1组为停跳心脏细胞注射组(n=6),体外循环后心脏停跳,标记的细胞(1×108)经心肌注入心梗周边区.第2组为不停跳心脏细胞注射组(n=6),相同的细胞在跳动下心脏经心肌注入心梗周边区.第3组停跳心脏对照组(n=6)和第4组不停跳心脏对照组(n=6)中,相同剂量的生理盐水分别在停跳和不停跳心脏状态下经心肌注入心梗周边区.3 d后,体内细胞分布通过核磁共振的T2*变化及Y染色体性别决定区基因(SRY基因)的实时定量PCR检测来评价.结果 细胞可以在心、肾、脾、肺和肝中检测到.1、2组中大部分的注射细胞滞留在心脏,并且1组中心脏细胞的滞留较2组多(T2*改变:22.3±2.2比17.00±0.84;SRY gene:0.150±0.062比0.072±0.003).结论 在未来的临床实验中,在心脏停跳状态下经心肌注射骨髓间充质干细胞将是一种最适合的方法.     

急性心肌梗死后CD34+干细胞自体动员的意义

目的:已有理论提出急性心肌梗死后骨髓和外周血中的CD34 干细胞具有自身动员的潜能,观察这一潜能的变化特征及其对心肌梗死组织再生能力的影响。方法:实验于2004-09/2005-02在阜外心血管病医院完成。①实验动物:雄性SD大鼠40只,随机数字表法分为心肌梗死组、假手术组,20只/组。②实验方法:心肌梗死组大鼠采用冠状动脉结扎法建立心肌梗死模型。心电图ST段抬高或有室性心律出现,前壁心肌呈苍白色为造模成功。假手术组仅作开胸手术,前降支不予结扎。③实验评估:于心肌梗死后3,7,14,28d,流式细胞仪检测骨髓和外周血中CD34 干细胞的含量。用免疫组化方法检测梗死心肌组织中的Ki67细胞和毛细血管数量。结果:①外周血及骨髓CD34 干细胞含量的变化:心肌梗死组外周血中的CD34 干细胞数量于造模后3d开始上升,7d后明显高于假手术组(P<0.01),至14,28d时逐渐回落至假手术组水平(P>0.05)。心肌梗死组骨髓中的CD34 干细胞数量于造模后各时间点始终无明显变化(P>0.05)。②组织学评定:心肌梗死组梗死区Ki67细胞和毛细血管数量于造模后3d开始增多,7d时明显多于非梗死区(P<0.05);至14,28d梗死区Ki67细胞数量明显少于造模后7d(P<0.05),毛细血管数量的减少不明显(P>0.05)。免疫组化染色显示少数Ki67细胞分化为血管内皮细胞,未见向心肌细胞分化。③相关性分析:梗死区Ki67细胞、毛细血管数量于造模后7d与外周血中CD34 干细胞数量呈显著正相关(r=0.913,P=0.021;r=0.887,P=0.035)。结论:机体CD34 干细胞的自体动员、增殖反应的潜能随急性心肌梗死时间的延长而逐渐减弱,自体动员的干细胞功能尚不足以达到修复梗死心肌组织的效果。     

同位素标记相对和绝对定量技术在药物蛋白质组学研究中的应用

目的建立应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术进行药物蛋白质组学研究的技术平台。方法分别测定12例高血压患者在给予降压药氨氯地平治疗前和治疗后8周的收缩压和舒张压,并同时收集患者在降压药治疗前和治疗后8周的血清,应用蛋白质组学iTRAQ技术对治疗前后的血清蛋白质组进行定量分析。结果高血压患者口服降压药苯磺酸氨氯地平片8周后平均收缩压和舒张压均明显降低(P<0.01)。经iTRAQ和ProteinPilot软件分析,共鉴定出232个差异蛋白质,其中降压药物治疗后表达上调和下调超过1.5倍的蛋白质分别有12种和13种。上调的蛋白质主要参与应激、防御和免疫反应,而下调的蛋白质主要参与应激、防御、炎症和凝血反应。本研究结果提示,降压药氨氯地平治疗可以双向调节机体的应激和防御反应,可以增强机体的免疫力,抑制炎症反应和改善高血凝状态,从而有利于血压的降低。结论应用iTRAQ技术进行药物蛋白质组学研究可筛选获得多种与药物疗效相关的差异蛋白质,为药物作用靶点和分子机制等方面的研究提供了一个良好的技术平台。