三七总皂苷和三七剪口高效液相色谱指纹图谱和含量测定方法的建立

 目的 建立三七总皂苷和三七剪口的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱和含量测定方法，为三七总皂苷的质量控制提供有效手段。 方法 采用三七总皂苷对照品作为随行对照, 用岛津 C18（150 mm × 4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-水梯度洗脱，检测波长 203 nm，流速均为 1.0 ml·min^-1，确定构成三七总皂苷指纹的 10 个共有峰。 结果 采用梯度洗脱的方法能使三七总皂苷的 5 种主要成分三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 和 Rd 实现基线分离，并可对这 5 种主要成分进行定量。以人参皂苷 Rgl 为参比峰，所测定的 10 批三七总皂苷样品的相似度均 ≥ 0.995. 结论 所建立的 HPLC 指纹图谱和测定方法以三七总皂苷对照品作为随行对照，可避免由于仪器、试剂和人员的不同所产生的误差，并且简化了实验操作，可作为三七总皂苷的质量控制手段。     

动态观察不同的药理性阻断剂对膜磷脂PtdIns(4,5)P2的代谢过程的影响特征

目的时空观察PtdIns(4,5)P2在细胞内水解及再合成的动态变化过程,并比较渥曼青霉素(wortmannin)、氯化锂(LiCl)、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4,5)P2代谢过程的影响.方法利用绿色荧光蛋白(GFP)与磷脂酶Cδ1 (PLCδ1)PH区(PLCδ1PH)的融合体(PLCδ1PH-GFP)作为标记PtdIns(4,5)P2的特异性荧光探针,使用激光扫描共聚焦显微镜技术动态观察及测量PtdIns(4,5)P2位置的变化.结果在CHO细胞,用ATP刺激内源性表达的P2Y受体,可引起PLCδ1PH-GFP荧光转位可恢复性的变化;渥曼青霉素和LiCl不影响PLC激活所介导的PLCδ1PH-GFP荧光由胞膜到胞浆的转位变化,但可阻断此转位的恢复;U73122可以阻断PLC激活所介导的PLCδ1PH-GFP荧光由胞膜到胞浆的转位变化; 新霉素对PLCδ1PH-GFP的转位无影响,但可抑制未表达PLCδ1PH-GFP的细胞中PLC激活后水解PtdIns(4,5)P2的作用.结论 PLCδ1PH-GFP可作为一种有价值的荧光探针来标记PtdIns(4,5)P2的动态变化;渥曼青霉素、LiCl、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4,5)P2代谢过程有不同的影响;PLCδ1PH-GFP可阻断新霉素发挥其抑制PLC水解PtdIns(4,5)P2的作用.     

细胞内pH对胆碱能受体介导的Kir3.1/3.4电流的调节

目的　研究细胞内pH对胆碱能受体介导的Kir3 1/3 4电流的调节作用。方法　应用AzideNa、KHCO3 和通过灌流直接降低细胞内 pH ,用双电极电压钳和膜片钳方法观察在蛙卵细胞中表达的Kir3 1/ 3 4钾离子通道电流的变化和M受体激活对Kir3 1/ 3 4电流调节的变化。结果　细胞内 pH降低能抑制Kir3 1/ 3 4的电流 ;Kir3 1/ 3 4对细胞内pH的敏感性介于另外两种Kir通道Kir2 1和Kir2 3之间 ,即这三种通道对细胞内 pH的敏感性依次为Kir2 3>Kir3 1/ 3 4 >Kir2 1;细胞内pH降低能够减弱M1受体激活对Kir3 1/ 3 4的抑制作用 ,加强M2 受体激活Kir3 1/ 3 4电流后的去敏作用。结论　在维持细胞静息电位方面起重要作用的Kir3 1/ 3 4通道在细胞内pH降低的情况下基础电流和M受体激活调节电流均发生了变化 ,这些变化在缺血缺氧引起的细胞 (如心肌细胞 )兴奋性改变中可能有重要的生理学意义     

中药联合CIK治疗对改善肿瘤患者免疫状态的研究进展

免疫系统对肿瘤细胞的识别和清除发挥着重要作用。CIK作为一种新型高效的免疫活性细胞,已成为抗肿瘤过继性细胞免疫治疗的首选。已有研究及临床实践证实中药具有免疫双向调节和保持免疫平衡作用,对肿瘤患者的免疫功能具有明显的促进作用。近年来,中药联合生物免疫疗法治疗肿瘤的临床研究也越来越多,此联合不仅是手术、放化疗等抗肿瘤治疗的补充,并能促进免疫系统的重建、消除残留病变等。此外,联合治疗对正常骨髓或造血干细胞有最小的细胞毒活性,不良反应小,更为晚期不适于手术或无法承受放、化疗所带来的副作用的患者开辟了一个新的治疗途径。     

隔药灸治疗原发性痛经的研究现状与治疗进展

中医治疗痛经历史悠久,治疗方法包括中药内服、针灸、穴位贴敷、综合疗法等,隔药灸是对药物、艾灸的综合运用,现从隔药灸治疗原发性痛经的机制、适用程度及证型、穴位配伍、介质、剂量、方法等方面进行综述。     

甘草抽出物在体外实验中促进精母细胞的分化

目的:明确甘草对精子发生过程中精母细胞分化的影响.方法:采用小鼠睾丸器官培养方式,添加甘草抽出液,进行抗-Rec 8-抗体免疫染色,检测精母细胞的Rec 8的表达,判断其对精母细胞的分化的影响,同时设对照组.结果:发现甘草组和对照组相比有明显的促进精母细胞的分化,且显示浓度依赖性.结论:甘草能促进在小鼠精子发生过程中精母细胞的分化.     

股骨颈骨折卧床患者的压疮防治综合护理体会

压疮,俗称褥疮,是因长期保持同一体位,致躯干四肢骨骼突起部位由浅渐深的皮肤软组织溃疡。长期平卧位者好发于骶尾部、足跟、甚至肘部、尺骨茎突;侧卧位者好发于大粗隆、内外踝;坐位者常见于坐骨结节部位。压疮的发生是由于长时间的压迫致局部皮肤和皮下组织缺血、缺氧导致营养不良,进而组织溃疡形成。常见于长期卧床者,年老体弱、截瘫、糖尿病患者发生率更高。压疮的防治不当,常形成恶性循环,增加患者的生理、心理痛苦和经济压力,增加护理工作难度,甚至可继发感染、骨外露、败血症而危及生命。骨科创伤中股骨颈骨折发生率较高,而其高发人群即为老年人,合并营养不良、慢性贫血、糖尿病者居多,术前、术后均需卧床休养,因此压疮发生的几率很高。压疮的预防与护理已成为骨科护理工作人员的重要工作内容之一,同时也是护理的主要评价指标之一。我科通过采用综合措施,股骨颈骨折卧床患者压疮预防及治疗工作取得较为满意结果,现总结经验及体会报道如下。     

镁合金对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响研究

目的：探讨镁合金对人骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖及成骨分化的影响。方法抽取人骨BMSCs并予以鉴定;采用AZ31B镁合金浸提液培养人BMSCs 1、3、5、7 d,以普通培养基为对照组,CCK-8法检测细胞增殖活性;应用浸提液培养人BMSCs,诱导分化后检测成骨分化相关基因（COLⅠ、ALP、OPN）的表达。另设置调节pH值AZ31B组（pH-AZ31B组）,以观察pH值变化对实验结果的影响。结果 BMSCs表达CD34（-）、CD45（-）、CD44（＋）、CD73（＋）、CD90（＋）、CD105（＋）。浸提液培养1、3、5、7 d,AZ31B组细胞相对增殖率低于对照组（P＜0.05）,毒性评级为2级;对照组和pH-AZ31B组细胞活性较好,两组细胞相对增殖率比较,差异无统计学意义（P ＞0.05）。AZ31B组COLⅠ基因表达量与对照组比较,差异无统计学意义（P ＞0.05）;AZ31B组ALP基因表达量较低（P＜0.05）,pH-AZ31B组与对照组无显著差异（P＞0.05）;AZ31B组OPN基因表达量在诱导分化后6 d、12 d显著高于对照组（P＜0.05）,pH-AZ31B组与对照组无显著差异（P＞0.05）。结论镁合金对BMSCs增殖及成骨分化无不良影响,其影响可能与浸提液pH值的变化有关。     

多奈哌齐对急性缺血性脑卒中运动性失语患者的 言语功能的影响

目的:探讨多奈哌齐对急性缺血性脑卒中后运动性失语患者语言功能的影响。方法:急性缺血性脑卒中运动性失语患者30例随机分为多奈哌齐组和对照组,各15例。2组均给予常规抗血小板聚集等基础治疗,多奈哌齐组加用盐酸多奈哌齐片治疗,同时给予康复及语言治疗,疗程均为2周。所有患者分别于治疗前、后,检查血常规、肝肾功能、凝血常规,并进行语言任务态的功能磁共振扫描、美国国立卫生院脑卒中量表(NIHSS)评分及失语指数(AQ)评分。结果:治疗前,治疗后,2组的AQ及NHISS评分均较治疗前改善(均P0.01);且多奈哌齐组改善程度较对照组明显(均P0.01)。治疗后,多奈哌齐组诱导出的激活增强主要位于左侧额中回后部Broca区(BA44/45)(P0.01,FDR,Ke≥10);多奈哌齐诱导出的Broca区激活增强与AQ改善成正相关(P0.05)。结论:多奈哌齐能促进急性缺血性脑卒中运动性失语患者语言功能区的激活,促进脑功能的重塑,有利于语言损伤的恢复。