消渴颗粒剂对大鼠系膜细胞增殖和TGF-β1表达的影响

目的：观察消渴颗粒剂对高糖刺激后系膜细胞增殖和TGF-β1表达的影响，以探讨消渴颗粒剂治疗糖尿病肾病的机理。方法：培养正常大鼠系膜细胞，经相差显微镜、扫描电镜观察，免疫细胞化学染色actin和desmin梁色均为阳性，证实为系膜细胞后，进行实验。高浓度葡萄糖刺激系膜细胞，加入中药含药血清后，用MTY法和激光共聚焦显微镜分别观察消渴颗粒剂含药血清对高糖刺激后系膜细胞增殖和TGF-β1表达的影响。     

温脾汤药物血清对体外培养的大鼠系膜细胞核转录因子-κB活化的影响

目的 探讨温脾汤药物血清对大鼠原代培养系膜细胞核转录因子NF-κB及其抑制因子IκB表达的影响，提供其肾保护作用机理的实验依据。方法 应用荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜技术，研究温脾汤药物血清对LPS刺激引起的NF-κB活化的影响；应用Western blot方法研究温脾汤药物血清对LPS刺激引起的IκBα降解的影响。结果 LPS刺激10h后，NF-κB的活性达到最高峰，且最高荧光强度位于细胞核内；大剂量药物血清明显抑制NF-κB的活性增强；IκBα在LPS刺激后迅速降解，又在1～2h内迅速恢复近正常水平；大剂量药物血清能明显抑制IκBα的降解。结论 温脾汤通过抑制LPS诱导的IκBα降解，使NF-κB与IκBα结合成复合物而减少解离，阻止了系膜细胞NF-κB的活化过程。     

循环纤维细胞和人胚肺成纤维细胞的比较研究

目的 比较人循环纤维细胞与人胚肺成纤维细胞的形态学特征和合成胶原的能力.方法 体外分离、培养人循环纤维细胞,用酶水解法和天狼星红染色法分别测定培养液中的羟脯氨酸含量和细胞层中的胶原含量,比较其在不同分化阶段与培养的人胚肺成纤维细胞合成胶原的能力,同时用Western blotting分析其分泌胶原的类型.结果 循环纤维细胞在体外分化过程中,形态学特征不断变化,从圆形幼小、多聚集成"细胞岛"的纤维细胞向梭形、透明、边缘多纤毛状突起的成纤维细胞样细胞分化,在分化过程中不断合成胶原,尤其在培养的细胞层中伴有大量胶原沉积,所分泌的胶原以I型和Ⅲ型胶原为主.结论 循环纤维细胞能够在体外分化为成纤维细胞样细胞,与人胚肺成纤维细胞具有相似的胶原合成能力.     

Fe3+及血红蛋白铁对眼源性蜡样芽胞杆菌生长能力的影响

目的 探讨Fe³⁺及血红蛋白铁对眼源性蜡样芽胞杆菌生长能力的影响。方法 实验研究。收集2011年6月至2017年2月温州医科大学附属眼视光医院外伤性蜡样芽胞杆菌性眼内炎患者26例并分离出蜡样芽胞杆菌26株。根据患者治疗后有无光感将菌株分为有光感（LP）组和无光感（NLP）组,以蜡样芽胞杆菌模式菌株ATCC14579作为对照组,检测不同菌株在缺铁环境、不同Fe³⁺浓度环境、富含Hb环境中生长的光密度（OD）值。采用独立样本t检验对数据进行统计分析。结果 26株眼部来源的蜡样芽胞杆菌在缺铁环境中生长的OD值小于模式菌株ATCC14579（t=54.098,P<0.001）。在一定范围内（0~500 μmol/L）增加Fe³⁺浓度,菌株生长的OD值随之逐渐增加,当Fe³⁺浓度高于1 000 μmol/L时,细菌生长的OD值开始下降。在Fe³⁺或血红蛋白铁为主要铁资源的环境中,NLP组菌株生长的OD值均高于LP组（t=2.618,P=0.015;t=2.202,P=0.037）。结论 眼源性蜡样芽胞杆菌的生长对Fe³⁺具有较强的依赖性;在Fe³⁺或血红蛋白铁为主的铁资源环境中生长较快的菌株感染患者,其临床预后较差。     

补肾活血方对去卵巢大鼠子宫ER及Cyclin B表达影响的实验研究

目的观察补肾活血方对去卵巢大鼠子宫的雌激素受体及周期蛋白(Cyclin)B表达的影响,探讨其治疗围绝经期综合征的作用机制。方法选择SD雌性大鼠54只,随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、补肾活血方组、联合用药组、补肾活血方+假手术组,每组9只。以双侧卵巢切除法建立大鼠围绝经期模型。各组灌胃给药40 d后取血清和子宫称重;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)浓度;HE染色观察子宫组织病理改变并测定子宫内膜厚度;免疫组化法观察雌激素受体(ER)α、ERβ在子宫组织中分布与表达情况;蛋白质印迹法(Western blot)法检测子宫组织中周期蛋白(Cyclin B)蛋白表达。结果补肾活血方治疗40 d后,与模型组比较,血清LH、FSH明显降低(P0.05或P0.01),血清E2水平升高(P0.05);同时,子宫脏器指数、子宫内膜厚度、子宫组织中ERα、ERβ和Cyclin B蛋白表达均明显升高(P0.05),与雌激素组呈现相似的作用,但作用强度均低于雌激素;补肾活血方+假手术组大鼠各项指标与假手术组比较无明显差异。结论补肾活血方具有雌激素样作用,但作用强度弱于雌激素,对正常大鼠子宫组织无显著影响。     

不同类型干扰素对Toll样受体在Huh7细胞中表达的影响

目的 探讨不同类型干扰素对肝细胞Toll样受体(toll like receptor,TLR)3、4、7、9表达的影响.方法 感染丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV) JFH-1病毒的Huh7细胞分别加入干扰素α(interferon,IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ1处理24h,以实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析Toll样受体3、4、7、9以及HCV复制水平的变化.结果 各干扰素均能抑制HCV的复制(t分别为-45.699、-68.165、-70.994、-67.111,均有P＜0.001).方差分析显示各干扰素处理组间TLR3、TLR4、TLR7及TLR9的相对表达量差异有统计学意义(F分别为125.901、263.537、163.289、31.774,均有P＜0.001),进一步两两比较可知,IFN-α、IFN-β能上调TLR3(t分别为21.312、25.420,均有P＜0.001)、TLR7(t分别为26.456、24.289,均有P＜0.001)的表达,同时下调TLR9的表达,而对TLR4的表达没有影响;IFN-γ可上调TLR4、TLR7的表达,对TLR3和TLR9的表达没有影响;IFN-λ1可上调TLR3、TLR7、TLR9的表达水平,但对TLR4的表达没有影响.结论 不同干扰素对肝细胞不同Toll样受体表达的作用不同,反映出不同干扰素具有不同的抗病毒作用机制.     

广西HIV/TB双重感染影响因素调查

目的 了解广西艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)/结核病(tuberculosis,TB)双重感染影响因素,为针对该人群的健康教育和健康策略的制定提供参考依据.方法 对来自广西南宁市第四人民医院AIDS治疗门诊和感染科住院部就诊和住院的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)单纯感染者、TB单纯感染者和HIV/TB双重感染者进行面对面问卷调查,并用Logistic回归分析双重感染的影响因素.结果 174名被调查对象中,AIDS单纯感染者83人(47.7％),TB单纯感染者56人(32.2％),HIV/TB双重感染者35人(20.1％);与HIV组比较,HIV/TB双重感染和以下因素有关:了解TB免费治疗政策(OR =2.85,95％ CI:1.03～7.85)、接受过有关预防AIDS宣教咨询等服务(OR =0.17,95％ CI:0.06～0.49);与TB组比较,HIV/TB双重感染和以下因素有关:现居住地在钦州百色或其他地区(OR =3.44,95％ CI:1.26～9.42)、仅通过医生、医院咨询服务了解AIDS(OR=3.68,95％ CI:1.28 ～ 10.56).结论 应加强社会对AIDS和TB的宣教工作和血液的管理,注意把两种疾病联合进行预防.     

温脾汤对大鼠残余肾组织中核转录因子-κB/IκB表达的影响

目的了解5/6肾切除大鼠残余肾组织核转录因子κappaB(NF-κB/IκBα)的表达与肾功能损害的关系,并观察温脾汤对NF-κB/IκBα的影响。方法采用5/6肾切除方法建立肾纤维化大鼠模型,以NF-κB p65亚基单抗及IκBα多抗为一抗,采用二步法免疫组化染色检测大鼠残余肾脏中NF-κB p65/IκBα的表达,结合血清肌酐、尿素氮、24 h蛋白尿等肾功能指标及肾脏病理损害情况,分析它们在肾脏损害中的作用,在此基础上阐明温脾汤肾保护作用与核转录因子-κB/IκB的关系。结果模型组肾组织中NF-κB p65的表达较正常组织显著增高,与尿蛋白及血肌酐增高呈正相关关系,而IκBα表达明显低于正常肾组织。与模型组相比,温脾汤可上调IκBα的表达,抑制NF-κB p65的过度活化。结论温脾汤能减轻5/6肾切除对大鼠肾功能的损伤,这一作用与其能降低肾组织NF-κB表达的异常增强有关。     

临床技能中心的建设浅探

医学专业学生的临床能力培养，是医学教育的重点，同时也面临着众多的困难。临床技能中心的建设和应用，实施模拟教学，是提高医学生临床技能培养效果的有效途径。介绍了武汉市第一医院建设临床技能中心的经验，并通过新教学方法的应用和客观结构化考试方法的实施，探讨当前形式下进行医学教学改革，进一步提高临床教学水平的方向。