加替沙星联合普适泰治疗慢性前列腺炎130例疗效观察

<正>慢性前列腺炎是泌尿外科和男科临床上最常见的炎症性疾病之一,即使长期治疗,其症状也总是反复,属于难治性疾病,因机制不完全清楚,尚无很好的治疗方法。我院泌尿外科和男科门诊2007年12月至2009年12月应用加替沙星联合普适泰(舍尼通)治疗慢性前列腺炎患者130例,取得了满意疗效,现报告如下。     

病毒融合基因包膜糖蛋白诱导急性髓系白血病细胞死亡的实验研究

目的 探讨猿猴白血病病毒融合基因包膜糖蛋白（GALV-FMG）诱导急性髓系白血病细胞系的死亡效应及其作用机制。方法 通过构建表达GALV-FMG 的真核表达的重组载体pcDNA3.1(+)-GALV-FMG,应用脂质体转染法、PI和DAPI染色、乳酸脱氢酶释放实验、AO/EB染色等来判断GALV-FMG对急性髓性白血病细胞的死亡效应,以NF-κB以及IκB分析GALV-FMG诱导急性髓性白血病细胞死亡的可能机制。结果 GALV-FMG的表达对急性髓性白血病细胞有显著的细胞毒效应,导致大量多核合胞体的形成,引起细胞发生了坏死性死亡。GALV-FMG的表达能导致IκBа的降解受阻、引起NF-κB的活性受到抑制。结论 GALV-FMG的表达能诱导急性髓性白血病细胞发生坏死性死亡,其作用机制可能和NF-κB的抑制有关。     

人内皮抑素小环载体在真核细胞中的生物活性

目的通过对人内皮抑素小环载体在真核细胞中的表达和生物学效应的研究,探讨小环载体作为生物治疗载体的可行性。方法将mc-hES、pcDNA-hES分别转染人肝癌细胞HepG2后,通过ELISA、RT-PCR和Westernblot观察hES表达。MTT法检测其对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的增殖抑制作用。结果 mc-hES和pcDNA-hES均能表达hES,mc-hES能明显抑制HUVEC的生长,而对HepG2无明显作用（P〈0.05）。在相同条件下,小环较常规质粒在体外能快速介导转基因的表达,且较传统质粒高6～8.3倍。结论 mc-hES较普通质粒pcDNA-hES在肝癌细胞中能高效表达转基因,为小环载体进一步研究提供了很好的实验基础。     

重组内皮抑素对肿瘤血管结构和乏氧改善作用的实验观察

目的 观察重组内皮抑素作用下小鼠Lewis肺癌移植瘤在血管退化前是否存在血管正常化时间窗,在此时间窗内肿瘤乏氧是否改善.方法 激光共聚焦显微镜动态观察重组内皮抑素作用下肿瘤血管的形态学变化,免疫组化染色检测不同时间段肿瘤乏氧细胞比例,观测肿瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线.结果 重组内皮抑素处理后肿瘤血管密度逐渐下降,连续治疗9 d较对照组下降最为明显.重组内皮抑素处理后周细胞覆盖内皮细胞比例逐渐增加,第3天开始明显增加,第5天增加最明显,第7天后明显下降.对照组基底膜与内皮细胞连接松散,厚度增加,而重组内皮抑素处理后,基底膜与内皮细胞连接紧密,厚度下降.在重组内皮抑素处理后第5天肿瘤乏氧细胞比例下降最明显,连续5 d用重组内皮抑素,肿瘤生长未见加快.结论 重组内皮抑素能使肿瘤血管正常化,其时间窗为治疗后3～7 d;此时肿瘤氧供明显改善,为临床联合应用放疗和重组内皮抑素提供了实验依据.

Abstract：

Objective To investigate whether recombinant human endostatin can create a time window of vascular normalization prior to vascular pruning to alleviate hypoxia in Lewis lung carcinoma in mice. Methods Kinetic changes in morphology of tumor vasculature in response to recombinant human endostatin were detected under a confocal microscope with immunofluorescent staining in Lewis lung carcinomas in mice. The hypoxic cell fraction of different time was assessed with immunohistochemical staining . Effects on tumor growth were monitored as indicated in the growth curve of tumors . Results Compared with the control group vascularity of the tumors was reduced over time by recombinant human endostatin treatment and significantly regressed for 9 days. During the treatment, pericyte coverage increased at day 3, increased markedly at day 5, and fell again at day 7. The vascular basement membrane was thin and closely associated with endothelial cells after recombinant human endostatin treatment, but appeared thickened, loosely associated with endothelial cells in control tumors. The decrease in hypoxic cell fraction at day 5 after treatment was also found. Tumor growth was not accelerated 5 days after recombinant human endostatin treatment. Conclusions Recombinant human endostatin can normalize tumor vasculature within day 3 to 7, leading to improved tumor oxygenation. The results provide important experimental basis for combining recombinant human endostatin with radiation therapy in human tumors.     

腹部闭合性损伤67例诊治体会

现将我院近五年来收治的腹部闭合性损伤67例的诊治体会总结如下。1临床资料1．1一般情况。本组男51例，女16例。年龄最大的62岁，最小的8岁，平均42岁。1．2致伤原因。车祸48例．挤压伤9例，跌落扭伤6例，钝器击伤及踢伤4例。2治疗结果本组24例腹部软组织挫伤，均施行非手术治疗，严密观察病人的生命体征对症处理，痊愈出院。本组对43例施行了剖腹探查术，急诊手术32例，其中边抗休克边开胆探查24例。观察6—8小时后病情加重再手术11例，术中证实42例有腹腔内脏器损伤，l例术前诊断为脾破裂．术后证实为腹膜后血肿。本组手术病例均痊愈出院…     

14-3-3σ调控p27抑制Rat1-Akt细胞增殖

目的： 研究腺病毒介导14-3-3·σ（Ad-14-3-3·σ）对Akt过表达Rat1-Akt细胞增殖的影响，并探讨其作用是否通过调控p27而实现。 方法： 通过5-溴-2′脱氧尿嘧啶（BrdU）实验检测Ad-14-3-3·σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响，并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3·σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响。 结果： Ad-14-3-3σ转染的细胞BrdU阳性率（45%）低于PBS处理组（100%）或Ad-β-gal转染的对照组细胞（98%）。14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位。 结论： 转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Rat1-Akt增殖，14-3-3σ通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性，阻断Akt介导的p27胞浆错位，从而发挥其抑制Rat1-Akt细胞增殖。     

14-3-3σ负调控Akt抑制Rat1-Akt细胞成瘤性

目的:研究腺病毒介导14-3-3·σ（Ad-14-3-3·σ）对Akt过表达Rat1-Akt细胞成瘤性的作用，并探讨其作用是否通过负调控Akt而实现。 方法:通过半体内和体内实验观察Ad-14-3-3·σ转染对Rat1-Akt细胞在裸鼠中成瘤性的影响；采用Western blotting方法检测转染14-3-3·σ基因后肿瘤组织内14-3-3·σ蛋白及其对Akt蛋白、Akt磷酸化活性和Akt磷酸化底物水平的影响。 结果:无论体外用Ad-14-3-3σ处理Rat1-Akt细胞，还是体内经瘤内注射Ad-14-3-3σ，均可见14-3-3·σ可使荷瘤鼠肿瘤体积显著缩小（P＜0.05）,出现肿瘤的时间推迟，其中以长时间不间断给药疗效最好；转染14-3-3·σ基因治疗组的肿瘤组织中Akt蛋白、Akt-Thr308位点磷酸化活性及Akt磷酸化底物水平低于转染Ad-β-gal或PBS处理的对照组。 结论:14-3-3σ可抑制Rat1-Akt细胞在裸鼠中的成瘤性，14-3-3σ通过负性调控Akt蛋白水平和磷酸化活性而抑瘤。     

猪脾细胞干扰素与人α干扰素之间的抗原性关系

<正> 用中和试验在不同细胞上对干扰素抗血清与猪脾细胞干扰素(PSIFN)及人干扰素的中和能力进行了试验,结果证明人白细胞干扰素多克隆抗体具有明显的中和猪脾细胞干扰素的能力。而人γ干扰素抗体具有微弱的中和猪脾细胞干扰素能力。猪脾细胞干扰素不仅可在同源细胞表现出抗病毒活性,而且可在异源细胞表现出高的抗病毒活性,并与人白细胞干扰素具有许多相同的生物学及抗原特性而受到人们的重视。我们实验证明猪脾细胞干扰素和人     

大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA，使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序，将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中，然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM 2000法转染HEK293细胞包装携带BDNF目的基因的重组腺病毒，少量提取重组腺病毒DNA检测证实为复制缺陷型BDNF基因重组腺病毒后大量扩增。蛋白电泳及Western blot法初步检测BDNF目的基因在HEK293细胞中的表达。【结果】成功构建了携带大鼠BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒。并证实其在HEK293细胞中可高水平表达BDNF目的基因。【结论】利用体外连接法可方便、快捷地构建携带BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并可在体外高水平表达表达其所携带的目的基因。