日本血吸虫Mf2基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究

目的 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum，Sj）Mf2蛋白，并对表达产物进行免疫保护效果测定。方法 将SjMf2基因亚克隆至pCEX—5X—3原核表达载体，以GST融合蛋白的形式在ER2688中表达，表达产物免疫小鼠，免疫用抗原剂量为50μg/次.鼠，对照组分别注射FCA或PBS，在0、2、6周共免疫3次。第3次免疫后2周进行攻击感染，42d后杀鼠，观察减虫和减卵效果。结果 在IPTG诱导下，表达载体中的SjGST基因与重组的SjMf2基因在大肠杆菌中得以高效表达，形成了SjGST—Mf2融合蛋白，用这种融合蛋白免疫小鼠，诱导产生了27．75％的减虫率和45．7％的每雌肝组织虫卵减少率(LEPF)。结论 SjMf2基因亚克隆至pGEX—5X—3载体后可在大肠杆菌中高效表达，表达产物能诱导小鼠产生一定程度的抗日本血吸虫保护性免疫力。     

化州柚叶挥发油化学成分的研究

对化州柚叶挥发油进行了气一质联用分析，从化州柚叶挥发油中分离出５９个成分，初步鉴定出１８种化合物，占总量的９１．７０％。这些化合物均为首次报道，其相对百分含量用色谱峰面积归一法测定．     

脑电图结合CT预测一氧化碳中毒迟发性脑病

探讨预测一氧化碳中毒迟发性脑病的检查方法,以及高压氧治疗时间与脑病的关系。方法用脑电地形图和头颅ＣＴ分析２９３例一氧化碳中毒不同程度、不同高压氧治疗时间与一氧化碳中毒迟发性脑病发生的关系。结果中重度中毒脑电地形图与轻度中毒异常率比较差异显。     

重组日本血吸虫SjGST-Sj32蛋白诱导小鼠保护性免疫的研究

应用基因工程技术分别表达出ＳｊＧＳＴＳｊ３２,Ｓｊ３２和ＳｊＧＳＴ,用于保护性免疫的动物实验及其体液免疫机制的初步探讨。结果：与对照组相比,重组ＳｊＧＳＴＳｊ３２组,Ｓｊ３２组,Ｓｊ３２＋ＳｊＧＳＴ组均有明显的减虫效果（Ｐ＜０．０５）。上述三组及ＳｊＧＳＴ组的肝脏虫卵计数均较对照组为少（Ｐ＜０．０１）。提示重组Ｓｊ３２ｋＤ蛋白可诱导小鼠产生明显的抗日本血吸虫攻击感染的保护性免疫及抗生殖免疫效果,而ＳｊＧＳＴ仅表现出一定的抗生殖免疫效果。     

高良姜根茎叶挥发油化学成分的比较

采用ＧＣ－ＭＳ－计算机联用技术从高良姜根、茎叶挥发油中分别鉴定出２４、２１和１６种化学成分，其中有１３种成分为３个部位所共有。但根、茎、叶的含油量及同一成分在不同部位的含量差异较大。     

3种国产牛奶中脂肪酸营养价值分析

目的测定不同种类牛奶中脂肪酸的含量。探讨牛奶脂肪酸的营养价值。方法以3种市售国产牛奶为研究对象，采用毛细管气相色谱-质谱法进行牛奶脂肪酸的分离测定。结果3种国产牛奶含有13～16种脂肪酸，酸牛奶总脂肪酸的含量最低。不同类型脂肪酸的比例不均衡。其中饱和脂肪酸的含量最高，约占70％；多不饱和脂肪酸的含量最低，仅为3％～7％。除低脂牛奶外。全脂牛奶和酸牛奶的ω-6／ω-3脂肪酸比率基本接近推荐值。结论与全脂牛奶和低脂牛奶相比。酸牛奶更适宜高血脂患者或心脑血管病高危人群的饮用。3种国产牛奶中的饱和脂肪酸（SFA）：单不饱和脂肪酸（MUFA）：多不饱和脂肪酸（PUFA）均不符合世界卫生组织推荐的1：1：1。有必要优化牛奶脂肪酸的组分以满足人体的营养需求。     

IMMUNOSCREENING OF SCHISTOSOMA JAPONICUM EGG cDNA LIBRARY

目的：从日本血吸虫虫卵文库中筛选并鉴定出与免疫诊断及免疫预防有关的基因克隆。方法：采用Ｓ．ｊＳＥＡ超免疫兔血清对日本血吸虫卵文库进行筛选。先去除抗大肠杆菌抗体，经三轮筛选得到１２个阳性克隆，然后，用辅助噬菌体进行体内剪切，经抗菌素平板筛选含重组质粒的阳性菌落，每个菌落分为２份，一份进行ＰＣＲ扩增以测定插入片段的大小。另一份用于制备纯质粒ＤＮＡ模板，进行ＤＮＡ序列测定，通过ＧＣＧ软件对所得ＤＮＡ序列与ＧｅｎＢａｎｋ中的序列进行同源性比较。结果：共筛得１２个阳性克隆，ＰＣＲ后测得其长度大多为１．２ｋｂ，其中８个与Ｓ．ｊ热休克蛋白７０的基因同源，２个与Ｓ．ｊ钙网蛋白同源，１个与Ｓ．ｍｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎ同源，１个与Ｓ．ｊ２３ｋＤａ蛋白同源。结论：本研究首次报道用抗ＳＥＡ血清对日本血吸虫虫卵文库的筛选结果，所得的１２个阳性克隆均为编码日本血吸虫免疫诊断及预防有关的基因。     

湖光牛奶脂肪酸的气相色谱-质谱联用分析

[目的]建立简易方法检测湛江市湖光牛奶脂肪酸,并分析其营养价值。[方法]以BF3/MeOH溶液为衍生化试剂,正十七碳饱和脂肪酸（C17：0）为内标,牛奶脂肪酸的抽提和甲酯化一步完成;经DB-WAX石英毛细管柱分离,气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）进行定性定量分析。[结果]（1）本方法重现性试验脂肪酸CV为1.15%～5.68%,仪器重现性CV为2.31%～9.81%,回收率为84.2%～105.0%。（2）湖光牛奶含有16种脂肪酸,平均饱和脂肪酸：单不饱和脂肪酸：多不饱和脂肪酸为11.80：4.38：1,饱和脂肪酸的含量最高,达到69%;多不饱和脂肪酸的含量最低,仅为6%;ω-6/ω-3脂肪酸比率为2.30。[结论]本方法高效易行,准确可靠,节省时间,适合大标本量的检测;湖光牛奶饱和脂肪酸,单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸比例不均衡,有必要优化脂肪酸的组分以提高其营养价值。     

日本血吸虫尾蚴体外培养细胞的形态学与抗原性初步研究

目的探索日本血吸虫尾蚴细胞培养技术，分析培养细胞的形态特征与抗原性。方法采用改良RPMI-1640培养基对日本血吸虫尾蚴细胞作体外培养，观察培养细胞的生长特性和一般形态，取培养3周的细胞作HE染色和超微结构观察，并用SDS—PAGE、Western blot技术、免疫荧光和凝集试验检测其抗原性。结果在培养早期，细胞呈半悬浮状并向培养瓶中心聚集生长，观察到细胞分裂增殖现象，随着’培养时间延长，细胞生长繁殖速度渐渐减慢，培养至8周，多数细胞死亡。培养3周的细胞，大小不均，呈多形性，大部分细胞呈高核质比率，仅少数细胞胞浆较丰富。电镜观察培养细胞表面呈现特殊结构。SDS—PAGE和Immuno blot分析表明：尾蚴细胞与尾蚴虫体的蛋白带谱大体相似，感染兔血清对尾蚴虫体和尾蚴培养细胞抗原分子识别的条带略有不同。用尾蚴培养细胞与感染兔血清作凝集试验和免疫荧光检测，二者均可出现特异性结合。结论日本血吸虫尾蚴细胞在体外出现有限增殖，该细胞在血吸虫病的免疫诊断中具有潜在的应用价值。     

黄皮果核挥发油成分的研究

黄皮果核系云香料植物黄皮Clausena lan-sium(Lour.)Skeels的果核,具有行气止痛、健胃消肿的功能,常用于治疗胃痛、腹痛、疝痛、风湿骨痛、痛经等。有关黄皮果核挥发油的成分未见报道,本文采用GC-MS-计算机联用技术对其挥发油成分进行了分析,共鉴定出其中14种化学成分。1 材料和方法1.1 样品来源及挥发油的提取:样品自采于湛