单核细胞增生李斯特菌的耐药特征及机制

食源性疾病已成为当今世界重大的公共卫生问题,由单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, Lm)等病原细菌引起的食源性疾病是影响食品安全的主要因素之一。近年来Lm耐药率呈上升趋势,多重耐药菌株不断出现,给世界公共卫生和人类健康带来了严重威胁。Lm的耐药机制十分复杂,包括可移动元件介导的耐药基因转移、药物作用靶点的改变、抗生素的外排作用、灭活酶的产生、生物被膜的形成等多种机制。本文就近年来国内外食品及临床来源Lm的耐药特征及机制进行综述,为李斯特菌病的合理用药,耐药菌株的监测以及公共卫生策略的制定提供科学依据。     

综合治疗跟痛症的临床观察

目的综合治疗跟痛症的临床疗效观察。方法将99例患者随机分为：综合治疗组（33例）,针灸治疗组（33例）,穴位注射治疗组（33例）。3组患者均用陈醋熏蒸患足,针灸治疗组：主穴悬钟、太溪、然谷、阿是穴。穴位注射治疗组：太溪穴位注射。综合治疗组：穴位注射加针灸治疗加陈醋熏蒸。结果综合治疗组、针灸治疗组、穴位注射治疗组三组总有效率分别为93.9%、72.7%、69.7%,综合治疗组明显优于针灸治疗组、穴位注射治疗组（P〈0.01）。结论综合治疗跟痛症疗效显著而持久。     

做卫生宣教工作的体会

我院一贯重视卫生宣教工作,特别自1963年度大力开展计划生育以来,全院建立了卫生宣传网,按部门分成小组,各部门负责人为组长,全体医务人员均参加了不同形式的宣传。1963年接受教育的有68,385人次。凡住院的产妇或病人,要求除治好疾病外,还要懂得两种以上的避孕方法,每个产妇都要给予新的育儿常识。休养员对这样做法非常欢迎,她们说,     

绵羊李斯特菌病病原诊断及其生物学特性研究

目的 单核细胞增生性李斯特菌(Lm)是引起人兽共患李斯特菌病的病原菌,该菌感染宿主中枢神经系统是导致高死亡率的主要原因.本研究对农场暴发的呈现神经症状的绵羊李斯特菌病病例进行病原诊断,进而对其病原学特性开展相关研究.方法 利用选择培养基和鉴别培养基进行细菌的分离和鉴定,借助多重PCR方法和Lm诊断血清对分离株的血清型进行研究,并测定了该菌株的溶血活性和药物敏感性,基于毒力基因actA的遗传谱系进行分型,最后对其LD50进行了测定.结果 从绵羊脑实质组织中成功地分离到一株血清型为4b的Lm菌株NTSN,其溶血效价为24,LD50为104.30CFU,是具脑侵袭性的强毒菌株,可用青霉素类药物治疗.遗传谱系分析表明Lm NTSN可能属于高侵袭性的流行克隆.结论 LmNTSN的分离鉴定及其生物学特性的研究,为深入探讨Lm的致病机理和预防控制奠定了基础.     

"以临床应用为导向"的住院医师心电图实践教学效果探析

目的探讨住院医师规范化培训(下文简称住培)中"以临床应用为导向"的心电图实践教学效果。方法本研究采用试验对照和问卷调查方法。选取2019年参加中山大学附属第五医院心电图课程的96名住培学员作为研究对象。将参加春季课程的49名住培学员设为对照组,采用传统教学方法;参加秋季课程的47名住培学员设为试验组,采用"以临床应用为导向"的实践教学方法。分析比较两组学员的课程考核成绩和对课程满意度的问卷调查结果。结果试验组学员过程考核成绩(86.16±20.21)分高于对照组学员的(71.49±23.86)分,试验组学员期末考核成绩(74.00±9.33)分高于对照组学员的(66.53±8.29)分,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。对于授课内容和方法可以运用到临床工作中,试验组学员的满意度95.7%(45/47)高于对照组学员的83.7%(41/49);对于课程形式有助于增加学习心电图的兴趣和投入度,试验组学员的满意度87.2%(41/47)高于对照组学员的51.0%(25/49),差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论"以临床应用为导向"的心电图实践教学,有助于提高住培学员的学习成绩和对课程的满意度。     

β受体阻滞剂降低静息心率对急性心肌梗死患者心功能的影响

目的 观察静息心率(RHR)与急性心梗患者心功能的关系及应用β受体阻滞剂降低RHR对心功能的影响.方法 将332例急性心梗患者分为RHR1(RHR<85次/min)组及RHR2(RHR≥85次/min)组:B1(RHR降低<10次/min)组及B2(RHR降低≥10次/min)组,观察各组心功能情况.结果 RHR2组急性左心衰发生率显著高于RHRI组(P<0.05),LVEF显著低于后者(P<0.05).B2组心衰发生率显著低于对照组(P<0.001)及B1组(P<0.05),LVEF显著高于后两组(P<0.05).B1组心衷发生率及LVEF较对照组差别无显著统计学意义(P>0.05).结论 RHR增快是急性心梗的独立危险因子;控制RHR对急心肌梗塞患者心功能有保护作用,此保护作用与RHR的控制程度相关.当RHR降低达10次/min以上时,可更好地保护心功能.     

单核细胞增生性李斯特菌作为肿瘤疫苗运送载体的研究进展

单核细胞增生性李斯特菌是一种兼性胞内寄生菌,能直接感染抗原递呈细胞,使所运送的外源抗原可以同时进入MHCⅠ类和MHCⅡ类抗原递呈途径,从而诱导强烈的CD⁺₈T细胞和CD⁺₄T细胞免疫应答。目前,减毒李斯特菌作为一种新型的活疫苗载体,在运送宫颈癌、黑色素瘤等肿瘤相关抗原方面业已取得较好的免疫保护效果,在抗肿瘤治疗中显示出诱人的前景。本文综述了单核细胞增生性李斯特菌的免疫应答特性及其作为治疗性肿瘤疫苗载体的相关研究进展。     

沙门菌、产单核细胞李斯特菌多重PCR检测方法的建立及应用

目的建立沙门菌、产单核细胞李斯特菌多重PCR检测方法,提高检测效率和敏感性。方法选择沙门菌组氨酸转运操纵子基因、产单核细胞李斯特菌溶血素基因序列设计引物,在单一PCR方法基础上,建立检测两种病原菌的多重PCR技术。结果在495bp和850bp处分别出现预期的特异性DNA扩增条带,敏感性试验显示该体系能检测出32pg的沙门菌DNA和274pg的李斯特菌DNA,样品检测表明该方法与单一PCR和国标方法的符合率达100%。结论本研究建立了能同时检测沙门菌和产单核细胞李斯特菌的多重PCR技术,为主要食源性病原菌快速检测提供了新方法。     

NDRG1干扰载体的构建及稳定过表达NDRG1人脑微血管内皮细胞的建立

目的 构建N-myc下游调节基因1（NDRG1）的shRNA干扰载体和过表达载体,转染人脑微血管内皮细胞（hCMECs）后验证干扰和过表达效果并获得稳定过表达NDRG1的细胞。 方法 将pGPU6-GFP质粒采用BamH Ⅰ和Bbs Ⅰ双酶切后,分别与设计的8条shRNA连接构建pGPU6-GFP-NDRG1 shRNA干扰载体,经测序鉴定后采用Lipofectamine 2000转染hCMECs,采用荧光显微镜观察载体转染效率,将PCR扩增的NDRG1编码区序列与pMD19-T连接,经测序正确后将重组质粒与pcDNA3.1空质粒采用限制性内切酶BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,连接后构建pcDNA3.1-NDRG1过表达载体,采用Lipofectamine 2000将测序正确的过表达载体转染hCMECs,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测干扰和过表达的hCMECs中NDRG1 mRNA表达水平,Western blotting法检测hCMECs中NDRG1蛋白表达水平,采用新霉素筛选出阳性克隆hCMECs。 结果 pGPU6-GFP载体经双酶切后,电泳结果显示完全线性化,测序结果显示shRNA均成功连接至pGPU6-GFP载体;荧光显微镜观察载体转染效率约为70%;RT-qPCR法检测,有3个shRNA干扰载体的干扰效果良好,转染后hCMECs中NDRG1 mRNA表达水平分别约为对照组的26%、21%和13%;Western blotting法检测到对应的特异性蛋白条带,重组质粒pcDNA3.1-NDRG1经双酶切后,电泳结果可见大小为1 185和5 428 bp的2条DNA条带,测序结果显示NDRG1基因成功插入,成功制备阳性克隆hCMECs。RT-qPCR法检测,阳性克隆hCMEC中NDRG1 mRNA表达水平较对照组升高,约为对照组的25.96倍;Western blotting法检测,hCMEC中NDRG1蛋白表达水平较对照组升高。 结论 成功构建pGPU6-GFP-NDRG1 shRNA干扰载体并验证干扰效果;成功构建pcDNA3.1-NDRG1过表达载体和稳定过表达NDRG1的hCMECs。     

TWEAK在心肌梗死后大鼠心肌组织中表达特点的研究

目的探讨心肌梗死后大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)的表达。方法 72只雄性SD大鼠随机分成两组:心肌梗死组和假手术组。心肌梗死组采用结扎冠状动脉左前降支(LAD)方法构建大鼠心肌梗死模型。假手术组仅开胸,不结扎冠状动脉。两组大鼠再随机分成24 h、2周、4周、8周共4个亚组。记录两组大鼠术前及术后2周心率、体重变化。应用超声心动图仪测定术前及术后2周大鼠左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD),计算左室短缩分数(LVFS)、左室射血分数(LVEF)。Western Blot(WB)检测心肌组织TWEAK蛋白表达情况。结果与假手术组相比,心肌梗死2周后大鼠心率加快(P0.01),大鼠心室前壁运动减弱,LVEDD、LVESD扩大,LVEF、LVFS显著降低(P0.01)。心肌梗死后24 h、2周、4周及8周大鼠心肌组织TWEAK蛋白表达均明显增加(P0.01),至8周时已出现下降趋势。2周时大鼠心肌组织中TWEAK表达量与LVEDD、LVESD呈正相关,与LVEF、LVFS呈负相关(P0.01)。结论心肌梗死大鼠心肌组织的TWEAK表达增高,并随着梗死后时间推移而逐渐升高,至8周时出现下降趋势。心肌梗死2周后大鼠心室腔扩大,心脏收缩功能降低,与心肌组织中TWEAK的表达存在相关性,提示TWEAK可能参与心肌梗死后心室重构过程。