多药耐药相关蛋白基因在非小细胞肺癌中的表达

探讨多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）多药耐药（ＭＤＲ）发生的关系。采用半定量逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和免疫组织化学染色方法，结合体外化疗药敏实验，检测３２例ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰ基因表达水平和对９种化疗药物敏感性。结果：ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰｍＲＮＡ表达阳性率为７１．９％，癌旁肺组织中为１０％；ＭＲＰ蛋白表达阳性率为６５．６％，在肿瘤细胞胞膜和胞浆内均有表达，癌旁肺组织中未见表达；中～高分化癌中ＭＲＰｍＲＮＡ和蛋白表达明显高于低分化癌（Ｐ＜０．０５）；ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰｍＲＮＡ表达和ＭＲＰ蛋白表达呈正相关（ｒ＝０．９７，Ｐ＝０．０００１）。ＮＳＣＬＣ中对长春新碱、足叶乙甙和阿霉素耐药组，其ＭＲＰ蛋白表达率明显高于敏感组（Ｐ＜０．０５）。表明ＭＲＰ基因表达是非小细胞肺癌原发性多药耐药的重要参与因素，它的过度表达通过转录水平和翻译水平调节实现，ＮＳＣＬＣ对长春新碱、足叶乙甙和阿霉素耐药的重要原因是ＭＲＰ蛋白表达，ＭＲＰ基因检测和体外化疗药敏实验对进一步阐明肺癌耐药机理有重要意义     

84例产后出血临床分析

目的：对84例产后出血相关因素进行临床分析。方法：通过对我院1995年1月－1999年11月产后出血84例临床资料，同时采用1：4随机选配同期分娩产妇336例作配比对照分析。结果：85．71％（74／84）的产后出血发生在产后2h内，产程延长尤其是第三产程延长致产后出血的发生率为40．48％（34／84），与对照组相比有显著性差异（P＜0．01）；胎盘粘连行人工剥离胎盘后出血占38．09％（32／84），与对照组6．64％（22／336）相比，有显著差异（P＜0．01）；妊高征、前置胎盘、妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）、肝炎、双胎等产后出血发生率增高。结论：产后出血是产科常见的严重并发症。     

髋臼骨巨细胞瘤随访24年

临床资料 女性,45岁.1988年因左髋痛和跛行,照片发现左髋臼部骨质破坏约4cm×7cm,拟诊为骨巨细胞瘤（图1）.1989年分2次行骨肿瘤刮除、骨胶填塞术.术中取组织活检确诊为左髋臼部骨巨细胞瘤（II级）.术后疼痛消失,可弃拐跛行.     

FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响

目的探讨转染试剂FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响,并寻找最佳的转染比例。方法采用转染试剂FuGNE6(以6μl为例)与GPC3-iRNA质粒(μg)比率分别为6∶0.5,6∶1,6∶1.5,6∶2,6∶4,6∶6及GPC3-iRNA量固定1μg(以此为例),转染试剂与GPC3-iRNA质粒(μg)比率分别为2∶1,4∶1,6∶1,8∶1,10∶1进行转染。分别用荧光显微镜、流式细胞仪及PI染色实验观察细胞转染效率及48h细胞存活率。结果FuGNE6固定为6μl时,质粒用量从0.5-2μg转化效率逐步增高,超过2μg后转染效率反而大大降低,各比例组在48h细胞存活率都在95%以上;质粒量固定为1μg时,随转染试剂增加转化效率不断增大,超过6∶1时,随转染试剂增加,48h细胞存活率也逐渐下降。结论FuGNE6与GPC3-iRNA比例为6∶1.5时转化效率最大,且细胞存活率高。     

鼻咽上皮细胞中过表达PIN1 激活JNK信号通路上调CyclinD1的研究

目的：研究肽脯氨酰异构酶PIN1（prolylisomerase,PIN1）可能影响的肿瘤信号通路和相关基因,探讨鼻咽癌早期发生发展的机制。方法：运用慢病毒表达系统在鼻咽上皮细胞系 NP69 中建立PIN1 过表达细胞克隆株,real-time PCR、Western blot检测PIN1表达情况;肿瘤信号通路阵列荧光素酶实验筛选PIN1可能影响的细胞信号通路,Western blot加以验证。结果：稳定表达 PIN1 的NP69 细胞可激活一系列肿瘤信号通路其中激活丝裂原活化蛋白激酶MAPK/c-Jun氨基末端激酶JNK（MAPK/JNK） 信号通路,差异具有统计学意义（P<0.01）,核转录因子－κB（P=0.036）、癌基因Myc（P=0.048）信号通路变化具有统计学意义（P<0.05）。Western blot结果显示与对照组相比,稳定表达 PIN1 的NP69实验组可明显上调JNK 信号通路重要的下游转录因子c-Jun、c-Jun Ser63、c-JunSer73的表达量,最终上调下游基因细胞周期蛋白CyclinD1（t=-7.295,P=0.002）的表达。结论：稳定表达 PIN1 的NP69 细胞可激活MAPK/JNK信号通路,明显上调JNK 信号通路重要的下游转录因子c-Jun、c-Jun Ser63、c-JunSer73的表达量,最终上调下游基因细胞周期蛋白CyclinD1的表达,PIN1与鼻咽癌早期的发生发展密切相关。     

人源类器官的研究进展及在口腔医学的展望

类器官是指在体外三维培养构建的,依赖于人造细胞外基质的多细胞团,具有自我更新、自我组织能力,并维持了其来源组织的生理结构和功能。类器官作为一种新兴的研究模型,兼具细胞系和动物模型两者的优点。其构建材料简单、培养效率高、耗时短,在疾病研究模型构建、临床药敏试验和再生医学中有良好的应用前景。类器官模型主要分为三种细胞来源类型：胚胎干细胞/诱导多能干细胞、成体干细胞、肿瘤细胞。本文将重点介绍三种细胞来源类器官最新的研究进展,并展望其在口腔医学中的应用。     

瑰及乳膏联合水胶体透明减压贴治疗压疮的临床疗效观察简

压疮是局部组织长期受压,血液循环障碍,持续组织缺氧、营养不良而形成的局部组织坏死,又称压力性溃疡[1] .随着护理质量评价体系的推广,压疮已成为衡量医院护理质量的一项主要指标[2],一旦发生不仅难以愈合,增加患者痛苦,严重影响了患者的生活质量,延长患者的住院时间,而且花费巨大,甚至可继发感染,引起败血症,加速机体的衰竭,所以压疮的防治即是护理的重点也是难点.为了探讨一种简易安全有效的治疗方法,近年来我院采用瑰及乳膏联合水胶体透明减压贴对Ⅰ-Ⅱ期压疮进行治疗,取得良好的效果,现报告如下.     

从运动神经元的TDP-43蛋白表达和ADAR2活性探讨肌萎缩侧索硬化症的发病机制

肌萎缩性侧索硬化症(ALS)是以上下两级运动神经元进行性丢失为特征的神经系统变性疾病,是运动神经元病(MND)中最常见的类型。运动神经元中的病理性TDP-43是ALS的病理特征。此外,散发性ALS运动神经元中作用于RNA的次黄嘌呤腺苷脱氢酶(ADAR2)减少、具有未经编辑Q/R位点的谷氨酸受体2(GluR2)表达增加,α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPAR)属性受影响,Ca2+通透性增加,Ca2+流入胞质增加导致神经元死亡。ALS运动神经元死亡包含病理性TDP-43和ADAR2活性下降,两种病理变化可能在细胞死亡中存在一定联系。ADAR2 mRNA是TDP-43蛋白的靶RNA,TDP-43蛋白在ADAR2的表达中起调节作用。近年来,研究者探讨ALS的基因治疗可能性:动物实验结果提示,外周静脉给予9型腺相关病毒载体(AAV9),可上调鼠运动神经元ADAR2,引发外源性ADAR2在中枢神经元表达,从而有效防治运动功能障碍。运动神经元的获救可能与TDP-43基因的正常表达有关。AAV9介导的ADAR2基因植入可能为ALS的基因治疗提供新的前景。     

HIV-1假病毒包装方法的探讨

目的：通过不同方案包装HIV-1假病毒,确定获得高重复性、高稳定性和高滴度假病毒的方法。方法从转染效率影响因素出发,通过不同的转染方案,利用pNL4-3 LucR-E-质粒与VSV-G质粒共转染293细胞包装病毒,分别于48 h和72 h收取假病毒并重新感染293细胞,48 h后测荧光素酶报告基因。结果成功包装出HIV-1假病毒,不同包装方案的病毒滴度不同,测得报告基因最高接近107 RLUs。结论应用PEI转染试剂、大提质粒pNL4-3︰VSV-G为4︰1时,转染效率最高,包装的假病毒滴度最高。     

益气养肺方干预肺癌化疗耐药的线粒体及半胱天冬酶机制

目的:研究益气养肺方对肺癌耐药细胞体外生长和多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响,探讨益气养肺方干预肺癌耐药的线粒体及半胱天冬酶机制.方法:采用体外培养肺癌耐药细胞株SW1573/2R120,分别以益气养肺方和阿霉素作用于肺癌细胞,通过MTT法检测细胞毒作用,流式细胞仪检测MRP蛋白表达,共聚焦显微镜测定线粒体膜电位和胞内钙离子(Ca2 )浓度,酶标法测定半胱天冬酶Caspase-3和Caspase-8活性.结果:与正常对照组相比,益气养肺方组细胞抑制率明显增加,MRP蛋白表达降低,线粒体膜电位和胞内Ca2 水平下降,Caspase-3和Caspase-8活性增加.结论:益气养肺方具有干预和逆转肺癌耐药的作用,其分子机制可能与下调线粒体膜电位水平和上调Caspase-3、Caspase-8活性有关.