两种方法联合评估新疆维吾尔族ＯＳＡＨＳ患者的听觉功能

摘 要： 【目的】 为了评估阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（ＯＳＡＨＳ）对新疆维吾尔族听觉功能的影响,探讨其损害部位及特点。【方法】 ７０例维吾尔族成人经多导睡眠监测系统（ＰＳＧ）检查分为轻、中、重组ＯＳＡＨＳ患者,选取３５例维吾尔族健康成人为对照组。所有研究对象分别进行畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）及听性脑干反应（ＡＢＲ）检测及分析,通过比较ＤＰＯＡＥ的反应幅值及ＡＢＲ的各波潜伏期和波间期变化评估听觉功能损害情况。【结果】ＯＳＡＨＳ患者 ＤＰＯＡＥ各频率（７５０ ～ ８ ０００ Ｈｚ）的反应幅值较对照组降低,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。经ＡＢＲ检测,轻中度ＯＳＡＨＳ组与对照相比,波Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ潜伏期及Ⅰ－Ⅲ、Ⅰ－Ⅴ波间期的延长,差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）;重度ＯＳＡＨＳ组的各波潜伏期及波间潜伏期均较对照延长,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）;轻中度组与重度组ＯＳＡＨＳ相比波Ⅰ、Ⅲ潜伏期及Ⅰ－Ⅴ波间期的延长,差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）。ＯＳＡＨＳ的病情程度与ＢＭＩ、阻塞部位、鼾声指数、最低血氧饱和度关系密切（Ｐ ＜ ０．０５）,并且不同病情程度的ＯＳＡＨＳ患者的ＤＰＯＡＥ检出率、ＡＢＲ异常率相比较差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）。【结论】 ＯＳＡＨＳ对维吾尔族听觉功能有损害,其中耳蜗主动听觉功能降低,尤以高频听力下降明显,可能合并听觉传导通路中的听神经中枢段及听觉中枢的损害,需联合ＤＰＯＡＥ和ＡＢＲ综合评估筛查听觉损害,尽早发现,及时干预。     

ＣＤ４５单抗介导的淋巴瘤荷瘤裸鼠三步法预定位放免显像

摘 要： 【目的】 评价生物素化ＣＤ４５单抗介导的９９ｍＴｃ－生物素在人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠模型中三步法预定位放免显像的价值。【方法】 ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记采用直接标记法。取人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠１８只,随机分为２组,每组９只。实验组为三步法预定位放免显像组,静注生物素化ＣＤ４５单抗１００ μｇ,４８ ｈ后静注亲和素２００ μｇ,再过４８ ｈ静注９９ｍＴｃ－生物素７．４ ＭＢｑ（２０ μｇ）;对照组为９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗放免显像组,静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗１００ μｇ。上述两组裸鼠分别于注药后３、６、１２ ｈ分别进行ＳＰＥＣＴ显像,每个时间点各取３只裸鼠断颈处死后,取脏器组织及肿瘤,称重后在γ计数仪中测量放射性计数,经放射性衰变校正后计算各脏器的％ＩＤ／ｇ及肿瘤／非肿瘤（Ｔ／ＮＴ）比值。【结果】平均每分子ＣＤ４５单抗约结合１２分子生物素,ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记率分别＞７０％和＞８０％。三步法给药后荷瘤裸鼠ＳＰＥＣＴ显像及生物分布示：整个显像期间血池内放射性均较低,肝脾见较多放射性浓聚;注射标记物后３－６ｈ,肿瘤显影清晰,并持续到１２ ｈ;注药后３、６和１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ分别为１．７３ ± ０．２２、１．２４ ± ０．０３和０．９４ ± ０．０７;肿瘤／血液比值分别为３．５、４．９和７．８;肿瘤／肌肉比值分别为８．２、８．９和１０．４。而静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗后则可见肝脾及肾脏明显放射性聚集,１２ｈ血池内见较多放射性分布,肿瘤部位见有少量放射性集聚,１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ为０．８９ ± ０．１３,肿瘤／血液及肿瘤／肌肉的比值分别为１．６和２．５。【结论】与９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗相比较,９９ｍＴｃ－生物素三步法预定位放免显像明显改善肿瘤Ｔ／ＮＴ比值,标记物注射后３ ｈ即可使肿瘤显影。     

ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５在未刺激多囊卵巢综合征卵巢组织中的异常表达

摘要：【目的】检测未经过促排卵刺激的ＰＣＯＳ患者和正常排卵妇女卵巢组织中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的蛋白表达水平以及比较两组之间的表达差异。【方法】收集未经过卵巢刺激的ＰＣＯＳ患者（ＰＣＯＳ组）和正常排卵妇女（对照组）的卵巢组织,采用免疫组织化学染色的方法检测卵母细胞和颗粒细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的蛋白表达水平。【结果】ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５蛋白在未刺激卵母细胞和颗粒细胞中均有表达,并且呈现阶段依赖性。ＧＤＦ９蛋白在ＰＣＯＳ早期卵泡卵母细胞和颗粒细胞中的表达水平均低于对照组并且表达滞后（Ｐ＜０．０５）,ＢＭＰ１５蛋白在ＰＣＯＳ早期卵泡的颗粒细胞中也存在表达水平降低和滞后现象（Ｐ＜０．０５）,但是在ＰＣＯＳ卵母细胞中的表达与对照组没有差异（Ｐ＞０．０５）。【结论】ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５蛋白在未刺激卵母细胞和颗粒细胞中均呈现阶段依赖性表达;两种因子在ＰＣＯＳ早期卵泡阶段存在表达水平降低并且滞后现象,提示可能与ＰＣＯＳ卵泡发育紊乱有关。     

Ｔ１ρ－ＭＲＩ 技术评价腰椎不同内固定方式对相邻节段椎间盘退变的影响

【目的】应用Ｔ１ρ－ＭＲＩ技术定量评价后路腰椎椎间融合固定术（ＰＬＩＦ）与棘突间动态固定术（ｗａｌｌｉｓ）对相邻节段椎间盘退变的影响,并分析退变的相关因素。【方法】 通过前瞻性研究方法,选取Ｌ４／５退变性失稳患者４２例,按随机数字法将患者随机分为ＰＬＩＦ组和Ｗａｌｌｉｓ组,分别为２２例和２０例。通过Ｔ１ρ－ＭＲＩ技术以及拍摄Ｘ线片,测量固定节段上位相邻节段椎间盘髓核Ｔ１ρ值、椎间盘高度、椎间隙动态角度变化,并通过ＪＯＡ评分及腰功能障碍指数（ＯＤＩ）评价临床效果。终末评估时间设为术后２４个月。【结果】４２例患者均获得随访,Ｗａｌｌｉｓ组手术时间及出血量均少于ＰＬＩＦ组,且差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。末次随访,两组ＯＤＩ、ＪＯＡ评分改善率以及Ｌ３／４节段影像学退变率均无显著性差异（Ｐ＞ ０．０５）;但两组Ｌ３／４椎间盘Ｔ１ρ值末次随访均存在下降趋势,且ＰＬＩＦ变化值明显大于Ｗａｌｌｉｓ组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 与ＰＬＩＦ术式相比,棘突间动态固定（Ｗａｌｌｉｓ）具有出血少、用时短等优点,且可显著延缓上位相邻节段椎间盘髓核中ＰＧ退变趋势,但两者临床效果无显著性差异。     

肝动脉灌注化疗联合热疗治疗肝门部胆管癌的临床价值

【目的】 初步评价肝动脉灌注化疗联合局部内生场热疗（热化疗）在肝门部胆管癌治疗的临床应用价值。【方法】对２００３年１０月至２０１３年６月期间３９例接受介入治疗的肝门部胆管癌病人进行回顾性研究,其中热化疗组２０例,于肝动脉置管,灌注吉西他滨后,再行肝动脉持续灌注卡铂及肿瘤区域内生场热疗６０ｍｉｎ,热化疗后连续肝动脉灌注５－Ｆｕ ３ ｄ,第８天静脉应用吉西他滨１次。对照组１９例,肝动脉置管及化疗方案同前,未行热疗。上述治疗每４周为１疗程。化疗期间观察化疗毒副反应、并发症及耐受性,随访期间的疗效评价以无肿瘤进展生存时间（ＰＦＳ）和生存时间（ＯＳ）为主要参考指标,并对两组的生存数据进行生存评估。【结果】热化疗组共行１０７个疗程治疗,ＯＳ为７．２～ ８５．８个月,中位ＯＳ为２３．７个月,ＰＦＳ为７．２～８０．３个月,中位ＰＦＳ为２０．３个月。对照组共行１００个疗程治疗,ＯＳ为６．０ ～ ２２．３个月,中位ＯＳ为１７．５个月,ＰＦＳ为３．５～ １９．５个月,中位ＰＦＳ为１４．２个月。经Ｌｏｇ－ｒａｎｋ检验显示热化疗在延长患者ＯＳ和ＰＦＳ与对照组的治疗有统计学差异（Ｐ ＜ ０．０５）。治疗期间两组均无严重的化疗毒副反应和并发症。【结论】肝动脉灌注化疗联合内生场热疗在治疗肝门部胆管癌具有安全、微创、耐受性良好的特点,有望成为一个新的辅助性治疗。     

ＩｇＡ肾病患儿血浆氧化应激水平及早期联用ＡＣＥＩ的影响

【目的】 研究ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）患儿血浆氧化应激水平的变化及其与临床病理的关系,探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）对ＩｇＡＮ患儿血浆氧化应激水平的影响。【方法】３８例ＩｇＡＮ患儿根据按临床表现分为３组：血尿蛋白尿（ＨＰ）组（１４例）,急性肾炎（ＡＧＮ）组（７例）,肾病综合征（ＮＳ）组（１７例）;按病理分级分为３组：病理Ⅲ级组（２２例）,病理Ⅳ级组（１０例）,病理Ⅴ级组（６例）;按初次就诊时是否曾接受激素和（或）免疫抑制剂治疗分为２组：初发组（２８例）,非初发组（１０例）;其中,初发组ＩｇＡＮ患儿根据是否早期联用ＡＣＥＩ治疗随机分为２组：ＡＣＥＩ组（１０例）和非ＡＣＥＩ组（１８例）。选取同期在我院体检的２０例健康儿童为对照组。分别采用Ｗｉｔｋｏ－Ｓａｒｓａｔ法、硫代巴比妥酸分光光度法和黄嘌呤氧化酶法检测病例组和对照组血浆晚期蛋白氧化产物（ＡＯＰＰ）、丙二醛（ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）水平,并分析其与临床表现及病理改变的相关性。【结果】 ①与对照组相比,ＩｇＡＮ组血浆氧化应激水平明显升高,表现为ＡＯＰＰ和ＭＤＡ水平明显升高［ＡＯＰＰ：（９９ ± ２７） ｖｓ （５３ ± ２１）μｍｏｌ／ｍＬ,ＭＤＡ：（５．３ ± ２．１） ｖｓ （２．５ ± １．４） ｎｍｏｌ／ｍＬ,均Ｐ ＜ ０．０１］,ＳＯＤ水平明显下降［（６７ ± ２１） ｖｓ （９５ ± ２０）Ｕ／ｍＬ,Ｐ＜ ０．０１］。②血浆氧化应激水平在肾病综合征组和病理Ｖ级组最高,且与ＩｇＡＮ患儿的肾脏Ｋａｔａｆｕｃｈｉ评分密切相关。③与非ＡＣＥＩ组相比,ＡＣＥＩ组治疗后血浆氧化应激水平明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。【结论】 ＩｇＡＮ患儿存在血浆氧化应激水平的升高,表现为血浆ＡＯＰＰ和ＭＤＡ水平升高,且血浆ＳＯＤ水平下降,氧化应激与ＩｇＡＮ患儿的进展及预后有关,早期联用ＡＣＥＩ治疗可以改善ＩｇＡＮ患儿血浆氧化应激水平。     

外源性硫化氢通过抗氧化应激逆转过氧化氢诱导的 人脐静脉内皮细胞衰老

摘 要： 【目的】探讨硫化氢（Ｈ２Ｓ）对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导的人脐静脉内皮细胞衰老的影响及其抗氧化机制。【方法】建立Ｈ２Ｏ２诱导的人脐静脉内皮细胞衰老模型,采用不同浓度的硫氢化钠（ＮａＨＳ）预处理内皮细胞,观察其对衰老的作用。【结果】与对照组相比,６０ μｍｏｌ／Ｌ Ｈ２Ｏ２预处理后,能显著提高细胞ＳＡ β－ｇａｌ阳性率和血浆纤溶酶原激活物抑制剂－１（ＰＡＩ－１）的表达,同时增加丙二醛（ＭＤＡ）含量,但减少过氧化物歧化酶１（ＳＯＤ１）的表达。而ＮａＨＳ的预处理可以显著减少细胞ＳＡ β－ｇａｌ阳性率和ＰＡＩ－１的表达,减少ＭＤＡ的含量,增加ＳＯＤ１的表达。【结论】ＮａＨＳ可以逆转Ｈ２Ｏ２诱导的内皮细胞衰老,其机制与抗氧化应激有关。     

雌激素对乳鼠心肌细胞脑钠肽表达的影响及机制

【目的】 探讨雌激素对原代培养的心肌细胞内脑钠肽（ＢＮＰ）的表达是否有影响以及雌激素影响ＢＮＰ表达的机制。【方法】 视实验目的给予无血清饥饿状态下的心肌细胞不同浓度的雌激素以及相应通路抑制剂处理,以ＲＴ－ＰＣＲ测定细胞内ＢＮＰ的ｍＲＮＡ水平,以Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔｔｉｎｇ测定细胞内ＢＮＰ的蛋白表达量以及相关通路的磷酸化水平,以免疫荧光技术观察雌激素刺激下心肌ＢＮＰ的亚细胞定位。【结果】 雌激素刺激能够显著上调心肌细胞内的ＢＮＰ ｍＲＮＡ以及蛋白水平（Ｐ＜ ０．０５）,雌激素受体抑制剂ＩＣＩ １８２ ７８０能够抑制该效应（Ｐ ＜ ０．０５）。雌激素处理能够上调心肌Ａｋｔ以及ｐ３８蛋白磷酸化水平（Ｐ ＜ ０．０５）,但不能上调Ｅｒｋ１／２蛋白磷酸化水平。预处理ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路抑制剂ＬＹ２９４００２或 ｐ３８ ＭＡＰＫ通路抑制剂ＳＢ２０３５８０均能够降低雌激素诱导的心肌细胞ＢＮＰ表达（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 雌激素能够特异性地通过其受体影响心肌细胞ＢＮＰ的表达,并且ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路以及ｐ３８ＭＡＰＫ通路均参与了雌激素诱导的心肌细胞ＢＮＰ表达过程。     

ＥＮＨ 蛋白与病理性疼痛相关性研究

摘 要： 【目的】 观察ＥＮＨ（Ｅｎｉｇｍａ Ｈｏｍｏｌｏｇ）蛋白在大鼠坐骨神经选择性损伤（ＳＮＩ）疼痛模型引起的病理性疼痛中的表达,并探索其与疼痛的相关性及可能机制。【方法】取１５只雄性ＳＤ大鼠,分为３组（每组５ 只）,分为ＳＮＩ组,麻醉治疗组和假手术对照组。另取３０只雄性ＳＤ大鼠,分为６组（每组５ 只）,按时间点分为非手术组对照组和实施ＳＮＩ手术的１、４、７、１０、１４ｄ组。通过检测大鼠５０％机械刺激撤足阈值,观察ＳＮＩ,ＳＮＩ＋利多卡因和罗哌卡因复合制剂及假手术组在４、７、１０ ｄ大鼠痛敏的改变以及ＳＮＩ手术组大鼠在１、４、７、１０、１４ｄ的痛敏变化。免疫荧光组织化学染色方法观察各组术后１０ ｄ相应脊髓节段内ＥＮＨ蛋白的表达。蛋白质印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ） 检测相应各实验组及时间点脊髓节段裂解液内ＥＮＨ蛋白的表达量。【结果】与假手术组相比,ＳＮＩ术后１０ ｄ大鼠手术侧痛敏明显增高（ｎ ＝ ５／组,Ｐ ＜ ０．０１）,而ＳＮＩ ＋ 麻醉药组大鼠痛敏则与假手术组接近。免疫荧光染色与蛋白质印迹法显示ＳＮＩ术后１０ｄ,脊髓Ｌ４－６节段手术侧背角内ＥＮＨ表达明显高于假手术组（ｎ ＝ ５／组,Ｐ ＜ ０．０１）;ＳＮＩ ＋麻醉药组的ＥＮＨ蛋白表达则与假手术组接近。ＥＮＨ与正常对照组相比,ＳＮＩ组术后手术侧痛敏、ＥＮＨ蛋白及ｍＲＮＡ有一过性增高继而恢复正常,并随时间推移而逐渐再次增高（ｎ＝ ５／组）。【结论】 ＥＮＨ蛋白在大鼠慢性病理性疼痛模型中有表达,且其改变与痛敏的进程一致。这些结果为ＥＮＨ可能作为一种新的疼痛分子标志物奠定了理论基础。     

运用三色ＦＩＳＨ技术确定自然流产夫妇染色体微小区域倒位

摘要： 【目的】 对２例婚后妻子连续２次流产伴２１号染色体结构改变病例进行多探针荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）,探讨ＦＩＳＨ技术在临床诊断微小区域染色体结构异常的应用价值。【方法】通过染色体常规Ｇ 显带技术初步确定染色体结构异常类型及染色体断裂的区带位置,然后挑选位于２１号染色体长臂位点特异性ＢＡＣ克隆,缺口平移法将其标记为探针,与２１号染色体长臂末端的商品化探针混合,进行三色ＦＩＳＨ。【结果】ＦＩＳＨ结果排除了涉及其它染色体结构异常的可能,确定这２例均为２１号染色体长臂微小区段的臂内倒位,这是首次关于２１号染色体臂内倒位导致自发流产病例的报道。【结论】２１号染色体臂内倒位与自然流产相关;多色ＦＩＳＨ 技术在诊断和确定微小区域染色体结构异常中有非常重要的作用和应用价值。