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从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 建立一种有效的方法,从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(rUreB)。方法重组大肠杆菌发酵后,表达的rUreB包涵体经洗涤、变性、复性,采用Q Sepharose Performance阴离子交换层析和Pheny1 Sepharose High Performance疏水层析分离纯化。使用 SDS-PAGE和HPLC检测纯度,选用 ELISA和 Western-bloning对纯化蛋白的生物学活性进行鉴定。结果 rUreB包涵体经洗涤和溶解后,rUreB的纯度>70%。包涵体溶解液经阴离子交换层析和疏水层析后纯度超过95%。rUreB纯品具有良好的生物学活性。结论 建立了从包涵体中获得高纯度的rUreB的工艺,为进一步的研究打下了基础。 相似文献
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目的对人白细胞介素-24(hIL-24)进行克隆、表达和纯化。方法分离人外周血单个核细胞,ConA刺激培养,提取细胞总RNA,应用RT-PCR技术从外周血单个核细胞中扩增hIL-24成熟肽编码区,定向克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,重组载体pGEX-4T-1/hIL-24经DNA测序鉴定后,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,阴离子交换层析纯化融合蛋白,SDS-PAGE和Westernblot鉴定。结果所得hIL-24基因经序列分析,与GenBank公布一致。所构建融合表达载体pGEX-4T-1/hIL-24测序正确,转化BL21(DE3)后,37℃诱导表达相对分子质量约为44000的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30.63%。经纯化后,纯度达85%以上。Westernblot检测能与兔抗人IL-24的多克隆抗血清发生结合反应。结论已成功构建了hIL-24的融合表达载体pGEX-4T-1/hIL-24,并在大肠杆菌中高效表达,纯化后获得了高纯度的融合蛋白,为hIL-24的功能及活性研究奠定基础。 相似文献
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对新研制的水质色度环境标准样品进行了稳定性检测、均匀性检验及定值,确立了水质色度环境标准样品的制备、检验与定值程序。研究结果表明,新研制的水质色度标准样品的均匀性良好,至少在两年的时间内稳定,定值方法可靠,量值准确。 相似文献
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高校计算机机房是高校的重要实践、实训基地,然而对于计算机机房的管理、维护是实验管理人员面临的一大问题。加强对高校计算机机房管理及维护,避免一些危险和故障的发生,找出计算机机房管理存在的问题,结合实际工作经验,制定科学、合理的计算机机房管理制度,有效地发挥计算机机房的作用。 相似文献
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在新能源高渗透系统规划阶段计及源荷储灵活性资源协同优化可以有效提升系统整体灵活性,促进新能源消纳,推进“双碳”目标的实现。基于灵活性供需分析,提出了一种考虑灵活性需求的新能源高渗透系统规划方法。综合考虑规划决策和运行模拟,将灵活性资源调节效益和碳贸易收益纳入优化目标,构建了多时间尺度协调优化规划模型。采取分解协调和多阶段迭代优化结合的方法求解可以简化问题规模,统筹规划风光火多源与源荷储灵活性资源。通过算例应用验证了所提方法能够实现资源的优化利用,在满足灵活性需求的同时实现经济性与环保性更优,提高系统的新能源消纳能力。 相似文献
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正2012年8月6日,为期10天的长江科学院江源科学考察圆满结束。8月9日,长江水利委员会主任蔡其华致信长江科学院,祝贺此次江源科学考察成功。2012年7月27~8月6日,为深入了解长江源区水资源、水环境、水生态以及社会经济的变 相似文献