酰胺酶催化底物特异性的研究进展

酰胺酶是一类催化酰胺水解成相应羧酸的水解酶,其作用底物谱广,有报道的酰胺酶可以广泛作用于脂肪、芳香、杂环氨基酰胺类酰胺,但是酶活差别巨大。当底物为芳香、杂环类酰胺尤其是存在邻位取代基时,酰胺酶的活力受到显著干扰,这种干扰与空间位阻和电子效应有关。     

青霉素G酰化酶的固定化研究进展

青霉素G酰化酶是一种重要的工业催化剂,每年催化制备20 000 t的6-氨基青霉烷酸,同时也用于β-内酰胺抗生素的合成.有效地回收和重复利用能够大大提高工业催化剂的应用性能,人们越来越关注青霉素G酰化酶的固定化研究.综述了青霉素G酰化酶的常用固定化方法,主要包括吸附法、包埋法、共价结合法、交联法等,以及该领域的最新研究进展.     

异麦芽酮糖醇的生理活性及生物合成研究进展

异麦芽酮糖(又称“帕拉金糖”)是由1分子葡萄糖和1分子果糖以α-1,6糖苷键连接形成的还原型二糖,将异麦芽酮糖氢化还原后可以制得异麦芽酮糖醇(又称“帕拉金糖醇”),是国际上新兴的功能性食用糖醇。异麦芽酮糖醇是1种包含2种立体异构体即α-D-吡喃葡萄糖基-(1,6)-D-山梨醇(GPS)和α-D-吡喃葡萄糖基-(1,1)-D-甘露醇二水合物(GPM)的白色晶状混合物。根据GPS和GPM比例的不同,主要有ISOMALT ST、ISOMALT GS、ISOMALT DC和ISOMALT LM 4种不同的产品。异麦芽酮糖醇是迄今为止唯一完全由蔗糖衍生获得的二元糖醇,其口感近似于蔗糖,甜度约为蔗糖的45%,热值为蔗糖的50%,具有化学性质稳定、不致龋齿、摄取后不会导致血糖和胰岛素水平波动等优点,可以作为蔗糖的健康替代品。对异麦芽酮糖醇的生理功能、工业制造及应用现状进行了梳理,系统介绍了异麦芽酮糖醇的制造工艺路线(生物催化法和加氢还原技术),并重点介绍了异麦芽酮糖醇生物合成过程的关键酶——蔗糖异构酶的结构、催化机理和分子改造等方面的研究进展,以期为相关研究工作的开展和工业化生产提供指导。     

海藻糖酶的提取及其酶学性质的研究

由家蚕通过酶分离纯化得到海藻糖酶的活力单位为25U/mL,计算得海藻糖酶的米氏常数Km为27.8mmol/L,最适温度为45oC,最适pH为5.4.由pH稳定性实验可知海藻糖酶在pH4.0～7.0范围内相对稳定,在pH＜4时,酶活力显著降低.通过海藻糖酶的热稳定性实验可以看出该酶热稳定性良好.实验还确定了反应的最低酶量,初步探讨了海藻糖酶分解海藻糖的过程.     

酰胺酶催化合成手性氨基酸的研究进展

手性氨基酸广泛应用于医药、农药、食品、化妆品等行业,开发高效、原子经济性高、环境友好的手性氨基酸合成方法具有重要的意义.酰胺酶由于其底物范围广、立体选择性专一、反应条件温和,在制备光学纯氨基酸方面具有巨大潜力.对酰胺酶的来源、分类、作用机理及在制备手性氨基酸中的应用等方面进行了综述,重点介绍了酰胺酶在制备D-苯丙氨酸、L-色氨酸、L-苯甘氨酸、O-甲基-D-丝氨酸和L-2-羧酸-哌嗪中的应用.探讨了酰胺酶存在的问题与未来的发展趋势,随着基因工程技术研究的不断深入,将会有更多的酰胺酶被开发出来并用于手性氨基酸的生产.     

蛋氨酸生产工艺研究进展

蛋氨酸广泛用于医药、食品、饲料和化妆品等领域,其中饲料添加剂的用量最大。该文论述了化学法和生物法合成蛋氨酸的工艺,重点介绍了世界上主要蛋氨酸生产厂家的生产工艺,并简要分析其特点,同时介绍了几种已报道的生物法生产蛋氨酸的工艺,展望了蛋氨酸的发展前景。     

耐高温葡萄糖异构酶的全细胞固定化条件研究

对三羟甲基磷交联Thermus oshimai葡萄糖异构酶重组菌的固定化工艺进行研究。确定所用硅藻土载体粒径36.8μm、聚凝剂聚乙烯亚胺分子质量为70 000 Da、交联剂合成前体为四羟甲基硫酸磷;运用最优的固定化条件:0.3 g硅藻土、5 mmol/L Mn~(2+)、0.12%(体积分数)聚乙烯亚胺絮凝1 h、1.5%(体积分数)三羟甲基硫酸磷交联1.5 h,所制备的固定化细胞酶活可达138.4 U/g。应用该催化剂于85℃和1 100 mmol/L D-葡萄糖底物条件下连续催化10批次,催化剂仍保留91%以上酶活,D-果糖转化率始终维持在51.7%以上。该工艺可以连续生产高果糖浓度高果糖浆,有效简化后续分离提取工艺,为进一步使用符合食品工业要求的表达系统连续制备高果糖浆奠定基础。     

生物法制备木糖醇的研究进展

木糖醇是一种存在于自然的五碳糖醇,在医药、食品和化工等领域具有广泛应用.目前,工业上制备木糖醇的方法主要是化学加氢法,生物法制备木糖醇具有反应条件温和、环境污染小等优势,已经受到了广泛的关注.对微生物发酵法和酶催化法制备木糖醇以及制备过程中所涉及到的一些方法进行了综述,并对未来在提高木糖醇产量方面的一些着手点进行展望.     

重组大肠杆菌产腈水解酶的培养条件优化

以产腈水解酶重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET-28b-NIT为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立5 L发酵罐上重组大肠杆菌产腈水解酶的高密度发酵工艺。通过分批补料培养工艺优化,表明碳、氮源的浓度以及诱导剂的浓度和诱导时机是影响菌体生长和酶活的重要因素。在优化条件下,对E.coli BL21(DE3)/pET-28b-NIT进行14 h的分批补料培养,菌体细胞浓度为13.7 gDCW/L,较优化前提高了4.3倍;腈水解酶体积酶活为36 990 U/L,较优化前提高了5.1倍。     

生物催化2-羟基-4-甲硫基丁腈制备羟基蛋氨酸菌株的筛选及转化过程的研究

筛选得到一株产腈水解酶的基因工程菌株(ZJB12048),在优化的转化条件下(反应温度50°C,反应体系pH值7.0(100 mmol/L柠檬酸/柠檬酸钠缓冲溶液),湿菌体浓度为0.02 g/m L,底物浓度为150 mmol/L),其静息细胞对2-羟基-4-甲硫基丁腈具有较高的催化活力。高效液相色谱(HPLC)、液相-质谱(LC-MS)和核磁共振(NMR)分析结果表明,反应液中的转化产物为羟基蛋氨酸(2-羟基-4-甲硫基丁酸)。