人Leptin基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的克隆Leptin基因,构建其重组表达菌株,并对表达产物进行免疫学鉴定。方法利用RT-PCR方法从脂肪细胞RNA中扩增出人瘦素前体(pre-Leptin)的cDNA片段和去信号肽序列的Leptin成熟基因片段,并插入pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达重组人瘦素(rh-Leptin)的菌株。结果DNA序列分析显示获得的pre-Leptin和成熟基因片段的序列与预计序列一致,菌株诱导后经SDS-PAGE检测,rh-Leptin表达量达菌体总蛋白的40%以上。Western blot分析显示重组Lep-tin具有免疫学活性。结论已获得高效表达Leptin的重组菌株。     

重组人乳铁蛋白基因克隆及表达

目的　构建重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株 ,并对表达产物进行评价。方法　由外周血白细胞总RNA经RT- PCR克隆获得HLF基因结构cDNA ,测序后克隆入酵母表达载体获得质粒pPIC9K- HLF ,线性化后电转化入毕赤酵母 ,经G4 -18 YPD筛选多拷贝后进行甲醇诱导表达。结果　获得基因与GenBank中的人HLF0 1基因基本相符。 2株多拷贝菌株诱导表达产物均能与人HLF抗体反应 ,具有抑制大肠杆菌生长的作用。结论　获得了能分泌有活性HLF的重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株。     

北京纺织服装业现状与发展趋势

文章通过对北京纺织产业链现状及北京纺织服装产业发展现状的分析,认为北京服装设计产业在逐步形成,产业低端加工环节外迁及产业向高端发展有助于产业向时尚设计及文化创意方向发展。     

不同层面下服装纺织业转移趋势研究

<正>一、全球层面下服装纺织业转移趋势全球层面下的产业转移可理解为生产要素在不同国家间持续重组。一般意义的产业转移本质依然是劳动力、资金、技术等要素在不同区域间转移的经济行为。特别是伴随全球化提速及服装纺织产业链延伸和再细分,产业已在由较早的订单转移向产业链转移转变。梳理全球服装纺织业已发生的若干次大规模转移,其规律和趋势如下:(1)出于拉动区域经济及区域产业优化考虑,部分地区服装集群仍倾向于更大程度地承接     

婚纱消费者购买偏好及影响因素分析——以北京地区女性为例

在婚纱市场的不断发展和完善中,消费者在其中起到了重要作用。文章研究了婚纱消费者购买偏好对婚纱业的推动作用,并以北京地区婚纱消费者为研究对象,提出婚纱产品描述、炫耀性消费心理、购买经验、婚纱产品知识四个关键影响因素,并通过阅读相关文献提出相关假设。运用问卷调查采集数据,构建了结构方程模型。研究表明,四要素与感知价值之间存在正相关,并与感知风险存在负相关;感知价值与消费者购买偏好之间存在正相关;感知风险与消费者购买偏好之间存在负相关;感知风险与感知价值存在中介作用。根据研究结果,文章提出相应对策。     

人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达

目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体。结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Westernblot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽。结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株。表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽。     

建设项目造价管理与工程质量浅谈

建设工程造价、建设工程进度和建设工程质量，共同构成建设工程的三大要素。这是众所周知的。建设工程管理的主要内容之一就是要尽可能地节约投资、控制造价、保证工期、保证质量，最佳地实现建设工程的总目标。工程造价、工期和质量这三者都具有各自的独立性，又有着密不可分的内在联系，尤其是建设工程，他们的内在联系表现得更为突出。     

我国女性传统婚服的文脉与趋势

我国女性传统婚服虽经漫长演变,其蕴含的民族特征与文化精髓至今依存。在追求个性的时代中,人们虽可自由选择婚服,但婚礼习俗依然带有传统特色。如加以引导、推广和创新,女性传统婚服依然有着满足现代消费者的基础。     

乳糖诱导重组人睫状神经营养因子在大肠杆菌中的可溶性表达

目的利用乳糖替代IPTG,诱导重组人睫状神经营养因子(Recombinanthumanciliaryneurotrophicfactor,rhC-NTF)在原核工程菌BL-TCS中可溶性表达,并选择最适的诱导表达条件。方法在不同的温度下,利用不同浓度的乳糖及0·5mmol/L的IPTG,诱导含有人CNTF基因的工程菌9h,比较菌体生长、乳糖消耗以及目标蛋白的表达规律。结果乳糖组的菌体A600值均高于IPTG组。乳糖诱导产生的rhCNTF主要以可溶形式表达,各浓度乳糖的诱导效果均能接近或超过IPTG的效果。以2%乳糖在25℃下诱导6h,可以达到比较好的诱导效果。结论乳糖可取代IPTG诱导人CNTF基因表达,并获得良好效果。