利用固定化酵母细胞转化反式肉桂酸生产L-苯丙氨酸

研究了探红酵母(Rhodotorula rubra)的培养基成分、培养固定化及转化条件。实验表明最佳培养基成分(％)：葡萄糖0 5,胰蛋白胨0．5,酵母膏0．5,磷酸二氢钾0．05,L-Phe0．05,pH．0,30℃,20L发酵罐中培养15～17h.最佳固定化条件为：用2．5％卡拉胶包埋18％的湿菌体。最佳转化条件为：1．0％反式肉桂酸,4mol／L铵离子,pH10．5,30℃。用卡拉胶固定化的深红酵母(Rhodotorula rubra)可以将77．7％的反式肉桂酸转化为L-苯丙氪酸。     

一些(糖)蛋白对胰岛素和其受体结合的影响——胰岛素和非受体蛋白结合的可能性

前文曾报道若干外源凝集素和糖苷对~(125)I-标记胰岛素和其受体结合有影响,并认为在胰岛素受体分子表面可能存在能与伴刀豆球蛋白A等外源凝集素专一结合的糖基(如甘露糖基),而且这些糖基可能参与了和胰岛素的结合。我们也曾观察到牛血清白蛋白存在时,标记胰岛素的凝胶过滤图谱中可出现两个放射活性峰,犹如胰岛素和其受体结合的图谱。为了进一步探讨胰岛素和其受体相互作用的原理,以及牛血清白蛋白中是何种组分和胰岛素结合,本文研究了一些糖蛋白和不含糖基的蛋白对标记胰岛素和人胎盘细胞膜结合的影响;并用高纯度的人胎盘白蛋白代替牛血清白蛋白作保护剂观察标记胰岛素的凝胶过滤行为。人胎盘细胞膜的制备按前文报道。~(125)I-胰岛素的制备见前文。结合实验按前文,37℃保温30分钟后迅速置冰水浴中冷却,4℃保温24小时。表1是一些糖蛋白和不含糖基的蛋白对标记胰岛素和人胎盘细胞膜结合的影响。在     

脂质体包埋猪血红蛋白的制备及其注入小鼠体内的初步试验

 为探索一条研制猪血红蛋白 (pHb)为基础的血液代用品新途径 ,开发了干膜超声法将猪血红蛋白和别构效应剂、超氧化物歧化酶等联合包埋于脂质体的技术 .考察了氢化大豆卵磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 甲氧基聚乙二醇和维生素E等在制备脂质体包埋血红蛋白 (LEH)中的作用 .通过控制磷脂与其他成分的配比 ,制得包埋率为 10 3%,pHb浓度达 16 %的稳定的LEH ;进一步将pHb微囊通过小鼠尾静脉多次注入其体内 ,检测受试小鼠血液中红细胞和白细胞数、抗体滴度、血小板聚集率及肾脏组织学等方面的变化 .小鼠体内试验表明了所制备的LEH具有低免疫原性、对肾脏无明显损害等特点 .脂质体包埋pHb是一种极具开发前景的稳定的人工载氧系统     

氧化棉子糖分子内交联猪血红蛋白对其结构功能的影响

用高碘酸盐氧化法制得氧化开环棉子糖,并用它分别修饰处在氧合及脱氧构象的猪血红蛋白得到两种不同的修饰衍生物。与天然蛋白质相比,两种修饰后的猪血红蛋白衍生物均具有明显的抗α２β２四聚体解聚的特性。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和反相ＨＰＬＣ分析发现这两种修饰衍生物均为分子内交联产物,而且交联都发生于２个β亚基之间,两种交联产物的紫外－可见光谱没有明显差别,但在相同浓度下,脱氧构象下被修饰蛋白质的荧光发射光强度明显     

天花粉凝集素糖结合专一性Ⅱ.

本文报道一些糖类、糖苷、糖蛋白和几种外源凝集素对标记天花粉凝集素和酸处理交联琼脂糖或胎盘细胞膜结合的影响。在低浓度时,所用的糖类中,乳糖是最强的抑制剂,蜜二糖和棉籽糖的抑制能力和乳糖相仿,而纤维二糖、蔗糖、麦芽糖,则无明显影响。三个所用的糖蛋白,它们的抑制活性以下列顺序递减:猪甲状腺球蛋白,人血清转铁蛋白,鸡卵白蛋白。未标记的天花粉凝集素和蓖麻凝集素,两者都专一地和半乳糖结合,它们都能竞争标记天花粉凝集素,而伴刀豆球蛋白A和半夏凝集素则不能竞争。由此,我们推测天花粉凝集素主要是和半乳糖结合,但与乳糖的结合能力最强,故推测其结合部位能容纳半乳糖和另一个单糖。     

天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂的亲和层析分离和一些性质

用酸处理交联琼脂糖6B和水不溶胰蛋白酶,可分别从天花粉的丙酮粉制剂中得到一定纯度的天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂。天花粉凝集素的分子量为60,000,等电点约5.5。天花粉胰蛋白酶抑制剂的分子量约6000,对胰蛋白酶的当量抑制比为1:4.3。由此认为上述两种生物活性物质不同于有引产活性的天花粉蛋白。不少植物种子或块茎中同时存在着外源凝集素和蛋白水解酶抑制剂。本文对这两类物质的共存现象作了讨论。     

植物糖苷水解酶的研究

糖苷水解酶和外源凝集素是研究复合糖类结构和功能常用的两种工具。它们都广泛存在于植物界。我们曾检测和分离了几种植物来源的外源凝集素。本文则对这些材料中几种糖苷水解酶的存在情况作了初步测定,并对糖苷水解酶的相对活性和外源凝集素的糖结合专一性之间是否存在相关性进行了探讨。     

天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂的亲和层析分离和一些性质

用酸处理交联琼脂糖6B和水不溶胰蛋白酶,可分别从天花粉的丙酮粉制剂中得到一定纯度的天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂。天花粉凝集素的分子量为60,000,等电点约5.5。天花粉胰蛋白酶抑制剂的分子量约6000,对胰蛋白酶的当量抑制比为1:4.3。由此认为上述两种生物活性物质不同于有引产活性的天花粉蛋白。不少植物种子或块茎中同时存在着外源凝集素和蛋白水解酶抑制剂。本文对这两类物质的共存现象作了讨论。