脑卒中后吞咽障碍临床疗效评价进展

吞咽障碍是脑卒中临床常见症状之一,对其临床疗效评价方法多样,但均不够系统全面。了解脑卒中后吞咽障碍的评价方法,选择适合的评价手段进行临床疗效评定,对规范其临床研究具有积极的推动作用。文章从临床检查、量表评价、实验室检查及营养评估等方面对脑卒中后吞咽障碍的临床疗效评价进行综述。     

益肾化浊方对阿尔茨海默病模型大鼠海马区BDNF及其受体TrkB蛋白表达的影响

目的:观察益肾化浊方对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)及其酪氨酸蛋白激酶受体B(Trk B)蛋白表达的影响,探讨益肾化浊方治疗AD的作用途径。方法:雄性SD大鼠随机分为5组,即假手术组、AD模型组、益肾化浊方低、中、高剂量组。参照《大鼠脑立体定位图谱》,选取左侧侧脑室注射聚集态的β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35),制备AD大鼠模型。造模成功后予益肾化浊方低、中、高剂量(2.8,5.6,11.2 g·kg-1),每日灌胃1次,共灌胃4周。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,Western blot法检测海马区BDNF及其受体Trk B蛋白表达的变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期时间延长,穿越平台次数减少,海马区BDNF及其受体Trk B蛋白表达显著下降,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组相比,益肾化浊方低、中、高剂量组大鼠逃避潜伏期时间缩短,穿越平台次数增加,海马区BDNF及其受体Trk B蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益肾化浊方可能通过促进AD模型大鼠海马区BDNF及其受体Trk B蛋白的表达,进而改善其学习记忆功能。     

益肾化浊方对AD大鼠海马突触形态及Ca2+相关激酶表达的影响

目的: 观察益肾化浊方(YSHZR)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马区神经元突触形态学和Ca²⁺相关激酶钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ),蛋白激酶C(PKC)表达的影响,初步探讨YSHZR治疗AD的作用机制。 方法: 将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,YSHZR低、中、高剂量组。往大鼠左侧侧脑室注射聚集态的β-淀粉样蛋白片段25-35(Aβ_25-35)制备AD模型。各剂量组造模后分别按2.8, 5.6, 11.2 g ·kg^-1剂量灌胃给予YSHZR,假手术组与模型组给予等体积生理盐水灌胃,每日灌胃1次,持续4周。采用电子显微镜观察大鼠海马区神经元突触数量和形态学结构,Western blot法检测海马区CaMKⅡ和PKC表达水平。 结果: 与假手术组相比,模型组大鼠海马区突触间隙融合模糊不清,突触前成分重度水肿,突触小泡重度减少,大小不均一,线粒体绝大部分嵴和膜融合消失,模糊不清,有嵴断裂现象及空泡现象,YSHZR低、中、高3个剂量组均可一定程度地改善突触形态,以低剂量组尤为明显;与模型组相比,YSHZR低剂量组间隙清晰的突触数量显著增加(P<0.05);YSHZR各剂量组间隙部分融合的突触数量无明显变化;但间隙完全融合的突触数量均显著低于模型组(P<0.05);与假手术组相比,模型组大鼠海马区CaMKⅡ和PKC的表达水平明显下降(P<0.05),YSHZR各剂量组均能显著上调CaMKⅡ和PKC的表达(P<0.05)。 结论: YSHZR可能通过改善AD模型大鼠海马区突触形态学,并促进海马区CaMKⅡ和PKC的表达,从而发挥治疗AD的作用。     

从JAK/STAT信号转导通路探讨益肾化浊方对神经干细胞定向分化的影响

目的探讨益肾化浊方治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法从孕14天昆明小鼠体外提取并培养神经干细胞,建立分化系统中可溶性Aβ25-35(5μmol/L)介导的具有神经毒性的阿尔茨海默病细胞模型。实验分为对照组(等量培养基)、模型组(5μmol/L Aβ25-35100μl)和益肾化浊中药组(5μmol/L Aβ25-35100μl+0.1μg/ml益肾化浊方100μl)。常规消化细胞,计数后以细胞密度每毫升2×105/个(每孔2ml)接种于6孔板,培养48 h。Western Blot法检测神经胶质酸性蛋白(GFAP)、微管蛋白(Tubulin)和转录激活子3(STAT3)、磷酸化转录激活子3(P-STAT3)、Smad1蛋白表达;RT-PCR法检测GFAP、STAT3、Smad1、Tubulin基因的表达。结果与对照组比较,模型组GFAP、STAT3基因及蛋白表达显著增加、PSTAT3蛋白表达显著增加,Tubulin基因及蛋白表达显著减少(P0.05),Smad1基因及蛋白表达增加不明显(P0.05);与模型组比较,益肾化浊中药组GFAP、STAT3、Smad1基因及蛋白表达均显著下降、PSTAT3蛋白表达亦下降,而Tubulin基因及蛋白表达显著增加(P0.05)。结论益肾化浊方可能通过调控JAK/STAT信号通路中相关蛋白及基因表达,从而抑制神经干细胞向星形胶质细胞方向分化来延缓阿尔茨海默病发展。     

齐墩果酸对快速老化小鼠学习记忆能力突触形态及环磷腺苷效应元件结合蛋白表达的影响

目的 观察齐墩果酸对9月龄快速老化动物模型SMAP8小鼠行为学、突触结构完整性以及皮质及海马环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)表达的影响.方法 30只9月龄健康雄性SMAP8小鼠随机分为模型组、齐墩果酸组、安理申组,每组10只,10只同龄同源健康雄性正常小鼠作为正常对照组.齐墩果酸组、安理申组给予相应的药物灌胃治疗,正常组、模型组给予等量生理盐水灌胃.4周后进行Morris水迷宫实验观察行为学变化,电镜观察各组小鼠海马神经元突触形态学变化,采用Western Blot法检测CREB蛋白的表达.结果 (1)Morris水迷宫结果显示:在隐蔽平台实验中,与正常组相比,模型组小鼠潜伏时间[(83.33±4.96)s,(75.13±6.01)s,(71.75±7.77)s,(63.40±8.93)s,(60.97±8.38)s]较长;与模型组相比,齐墩果酸组[(75.97±4.49)s,(64.98±4.93)s,(64.16±6.23)s,(53.47±5.99)s,(47.91±7.64)s]及安理申组[(71.30±7.65)s,(63.32±7.57)s,(59.82±4.69)s,(52.28±5.90)s,(46.22±7.27)s]小鼠潜伏时间明显缩短(P＜0.05).空间探索实验中,与正常组相比,模型组穿越次数减少;与模型组相比,齐墩果酸组及安理申组小鼠穿越次数增多(P＜0.05).(2)模型组与正常组相比突触数量少,突触间隙发生融合现象,突触前高度水肿,突触小泡不均一,线粒体数量极少,不能看出清晰的线粒体轮廓,而经齐墩果酸和安理申干预后突触轮廓清晰,突触前轻度水肿,小泡密集均一,不易见到清晰的线粒体膜和嵴结构.(3) Western Blot结果发现,与正常组比较,模型组不论海马还是皮质中的CREB蛋白表达量均下降,与模型组相比,齐墩果酸组与安理申组CREB蛋白表达量均上调(P＜ 0.05).结论 齐墩果酸具有改善模型小鼠的学习记忆能力的作用,这一作用可能与保护模型小鼠突触形态、提高CREB蛋白表达量有关.     

化痰通络方联合rt-PA对急性脑梗死溶栓后神经功能缺损及皮质神经元微观形态的影响

目的:观察化痰通络法对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂( rt-PA)溶栓后神经功能缺损评分及神经元微观形态的影响,为化痰通络法防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注损伤提供实验依据.方法:选择健康雄性SD大鼠80只,随机分为3组,即假手术组、模型组、化痰通络法联合rt-PA组(每组又分6,24 h,3,7d4个时相),采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(M CAO),化痰通络法结合rt-PA组于血栓注入后3h一次性由尾静脉缓慢注入2 mL 0.9％生理盐水+5.67 mg· kg-1rt-PA,并分别给予高、低剂量化痰通络方灌胃治疗(2.88,1.44 g·kg-1),每日2次.对大鼠不同时相进行神经功能缺损评分,并通过光电镜对大脑皮质缺血区神经元进行形态观察.结果:Bederson's评分:与模型组相比,治疗组神经功能缺损评分明显降低(P＜0.01),其中以rt-PA联合化痰通络方低、高剂量组神经功能缺损评分降低最为明显(P＜0.05).光镜下,在同一时相中,与模型组相比,治疗组皮质神经元少量变性,组问并无显著差别.同组不同时相比较,以7d神经元变性最多.电镜下,在同一时相中,与模型组相比,治疗组均起到保护神经元及内皮细胞的作用,但以化痰通络方联合rt-PA组更为显著.同组不同时相比较,以24 h神经元水肿最为严重,7d神经元破坏最为严重.各组横向比较,以化痰通络方联合rt-PA高剂量组24 h时相对神经元的保护作用最好,化痰通络方联合rt-PA低剂量组3d和7d对神经元形态保护为最佳.结论:化痰通络法可以减轻急性脑梗死溶栓后神经功能缺损症状,改善皮质微观形态学变化,同时针对溶栓后不同时相调整中药的用药剂量,可以更好的减轻溶栓后缺血再灌注损伤.     

何首乌有效成分二苯乙烯苷对Aβ_(25-31)诱导神经干细胞定向分化的影响

目的探讨何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样肽(Aβ25-31)诱导神经干细胞(NSCs)定向分化的影响。方法从孕14d昆明小鼠体外提取并培养NSCs,分别建立起两组分化系统可溶性Aβ25-31体外诱导NSCs损伤的阿尔茨海默病(AD)细胞模型:神经元细胞分化模型M1(Aβ25-312 5μmol/L)、星形胶质细胞分化模型M2(Aβ25-315μmol/L)。TSG低、中、高剂量组(TSG浓度分别为10-8、10-7、10-6mol/L)分别干预模型M1和模型M2,采用WST-1细胞增殖及细胞毒性试剂盒检测各组NSCs细胞活性,采用免疫荧光法及蛋白印迹法观察各组GFAP、Tubulin阳性细胞率及其蛋白表达情况。结果模型M1组和模型M2组细胞活性A值较相应的对照组明显降低(P0.05);TSG中、高剂量组A值明显高于相应的模型组(P0.05)。与相应的对照组比较,模型M1组Tubulin阳性细胞率及其蛋白相对丰度值明显降低,模型M2组GFAP阳性细胞率及其蛋白相对丰度值明显升高(P0.05);与相应的模型组比较,TSG高剂量组Tubulin阳性细胞率及其蛋白相对丰度值均显著升高,GFAP阳性细胞率显著降低(P0.05)。结论高剂量的TSG具有促进Aβ25-31诱导的NSCs向神经元方向分化的趋势,抑制向星形胶质细胞的分化。     

三种补肾中药有效成分对AD小鼠胚胎神经干细胞自我更新及神经元样分化作用研究

目的观察三种补肾中药补骨脂、女贞子、何首乌各自有效成分补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷对Aβ25-35介导的神经干细胞（neural stem cells,NSCs）自我更新及向神经元方向分化的调控作用。方法取孕14天昆明小鼠体外分离、培养其胚胎神经干细胞,并随机分为对照组、Aβ25-35组、Aβ25-35+补骨脂素组、Aβ25-35+齐墩果酸组、Aβ25-35+二苯乙烯苷组,其中Aβ25-35干预浓度为25 μmol/L,中药有效成分的干预浓度均为10-7mol/L,通过NSCs计数法观察NSCs增殖能力;采用Western blot及免疫荧光法观察神经元标志物Tubulin蛋白表达。计算Tubulin+/DAPI比值。结果与对照组比较,Aβ25-35组NSCs球的形态破坏,NSCs计数、Tubulin蛋白表达及Tubulin+/DAPI均降低（P<0.01,P<0.05）。与Aβ25-35组比较,3个给药组NSCs计数、Tubulin蛋白表达及Tubulin+/DAPI均升高（P<0.01,P<0.05）。结论25 μmol/L Aβ25-35可抑制NSCs自我更新及神经元样分化,而补骨脂素、二苯乙烯苷及齐墩果酸能促进NSCs的自我更新,并能促进其向神经元方向分化。     

化痰通络法治疗急性脑梗死100例随机对照临床研究

[目的]评价化痰通络法治疗急性脑梗死的临床疗效,为脑梗死急性期临床治疗方案提供依据。[方法]将符合纳入标准的急性脑梗死患者100例,随机分为中药组和对照组。两组患者均采用常规基础治疗,中药组加服化痰通络法中药。分别评估两组患者治疗有效率,记录两组患者治疗前后的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、随访至治疗后90 d,记录Barthel指数及改良Rankin指数评分情况。[结果]中药组有效率为92%,高于对照组的82%;在NIHSS评分、Barthel指数评分改善方面治疗组均优于对照组(P<0.05);在改良Rankin指数评估方面治疗组优于对照组,具有一定优势。[结论]化痰通络法中药疗效肯定,可改善急性脑梗死患者的神经功能状况,提高患者日常生活能力和社会活动参与能力,提升患者生存质量。