薄层层析和反相高效液相色谱检测木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物

本文报道以TLC和HPLC法检测以木瓜蛋白酶在水-乙酸乙酯两相反应体系中合成的Aspartame及其中间产物（I）（Ⅱ）。TLC条件为：展开剂（正丁醇：冰醋酸：水=3：1：1），展开时间（4-5h)，检测（荧光检测253.7nm，1%茚三酮丙酮溶液显色）。HPLC条件为：流动相（乙腈：水=45：55），流速1ml/min，检测（紫外检测260nm)，进样量20ul,灵敏度6，纸速1-4mm/min，分析周期10min。该方法简便、准确、灵敏度高。用该方法也证实以木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物（Ⅱ）与以嗜热蛋白酶（Thermolysin)催化合成的Aspartame及其中间产物（Cbz-Asp-PheOMe)完全一致。     

生物技术医药产品开发和市场分析

本文综述了国内、国外生物技术医药产品研究和市场情况。在医药生物技术研究方面往往处于领先地位的美国在开发新药市场方面却落后于欧洲，以此为鉴，作者提出根据国情如何加快中国的生物技术医药产品的市场开发是一个值得重视的课题。     

高效液相色谱法同时测定药用苹果酸中的马来酸与富马酸

研究了反相ＨＰＬＣ法对药用苹果酸中杂质马来酸及富马酸进行同时测定的方法。使用Ｃ＿１８色谱柱，以ｐＨ值为２．１的硫酸溶液（约为０．００５ｍｏｌ／Ｌ）作流动相，检测波长为２１０ｎｍ，苹果酸与马来酸的分离度在２．５以上，马来酸与富马酸的分离度达７．０以上，所测杂质含量的相对标准差均小于２．０％。     

酶法合成L—丝氨酸及反应液中氨基酸的分离

含ｇｌｙＡ的基因工程菌所表达的ＳＨＭＴ可催化甲醛和甘氨酸特异地合成Ｌ－丝氨酸。对酶法合成的部分条件进行了优化,并根据甲醛滴定的原理,确定了通过检测ｐＨ变化控制甲醛流加速度的方案,最终的反应液中Ｌ－丝氨酸浓度达０．２ｍｏｌ／Ｌ。反应结束后的酶反应液中同时含有甘氨酸和丝氨酸,利用国产７１７树脂获得较为理想的分离效果,丝氨酸的收率达７７％,高效液相分析表明其中不含甘氨酸等杂质。     

SARS冠状病毒基因组序列分析与抗SARS药物设计

SARS冠状病毒是诱发SARS的主要病原体，文章综述了SARS冠状病毒基因组序列分析的最新进展，SARS冠状病毒编码的蛋白酶在病毒繁殖过程中具有重要功能，可以其作为靶点进行抗SARS冠状病毒药物的筛选。     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组E.coli L-天冬酰胺酶及药代动力学研究

目的建立大鼠血浆中重组E.coli L-天冬酰胺酶的抗体夹心酶联免疫吸附测定法,并进行药代动力学研究。方法应用重组E.coli L-天冬酰胺酶免疫家兔,分离IgG,用DEAE-纤维素柱色谱纯化,辣根过氧化物酶标记抗体,建立抗体夹心酶联免疫吸附法,测定大鼠血浆中重组E.coli L-天冬酰胺酶浓度。结果方法的线性范围为1～64 U·L^-1,血药浓度与时间的关系符合二房室模型,初期和末端的T_1/2分别为0.50～0.57 h和2.45～3.02 h,AUC与剂量成正比。结论建立的抗体夹心酶联免疫吸附法在灵敏度、特异性、线性范围、精密度和回收率等方面,满足药代动力学研究要求。实验方法和重组E.coli L-天冬酰胺酶在大鼠中的药代动力学参数为临床研究提供了手段和依据。     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组E.coli L-门冬酰胺酶研究

用重组E.coliL-门冬酰胺酶免疫家兔，DEAE-纤维素柱层析纯化IgG，采用二步戊二醛交联法将辣根过氧化物酶标记抗体，建立抗体夹心酶联免疫吸附法，测定大鼠血浆中重组E.coliL-门冬酰胺酶浓度。本测定方法的线性范围为1～64U/L，灵敏度为0.4U/L。建立的抗体夹心酶联免疫吸附法测定大鼠血浆中重组E.coliL-门冬酰胺酶具有良好的精密度、回收率、灵敏度和特异性。     

鲨肝活性肽的免疫调节和抗细胞凋亡作用

目的　为了选择鲨肝活性肽 (SHAP)临床应用的适应症并了解其作用机制。方法　分离培养人外周血单核细胞 (PBMC) ,检测SHAP对其分泌IFN α和IFN γ的影响 ;用环磷酰胺 (Cy)建立免疫低下模型 ,检测SHAP对免疫低下小鼠血清溶血素的生成及血清IL 2水平的影响 ;用流式细胞仪分析SHAP对对乙酰氨基酚 (AAP)诱导小鼠肝损伤模型中细胞凋亡的影响 :用Fas单克隆抗体诱导小鼠暴发性肝炎和抑制肝癌细胞株SMMC772 1的增殖 ,用SHAP处理后 ,分析小鼠血清谷丙转氨酶 (GPT)的水平及SMMC772 1增殖的变化情况。结果　SHAP能够有效诱导PBMC分泌IFN α和IFN γ ,促进免疫低下小鼠血清溶血素的生成和提高血清IL 2的水平 ,显著降低AAP诱导的肝细胞凋亡。 5 0mg·L- 1的SHAP可消除 5mg·L- 1Fas单克隆抗体对SMMC772 1增殖的抑制作用。 3mg·kg- 1的SHAP能显著降低Fas单克隆抗体诱导的暴发性肝炎小鼠的血清GPT水平。结论　SHAP具有免疫调节作用和抗细胞凋亡的作用 ,可能是SHAP防治肝炎的作用机制之一。     

鲨肝活性肽S-8300免疫调节作用的研究

研究鲨肝活性肽S-8300对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法：观察鲨肝活性肽S-8300对环磷酰胺致免疫抑制小鼠血清溶血素、溶血空斑形成及血清IL-2含量的影响。结果：鲨肝活性肽S-8300可显著促进免疫抑制小鼠溶血素、溶血空斑形成及血清IL-2水平增高．结论：鲨肝活性肽S-8300对环磷酰胺致免疫抑制小鼠有较好的免疫调节作用。     

广西产尖吻蝮蛇蛇毒细胞毒素的纯化与活性鉴定

采用SephadexG50,Source30Q及phenylsepharoseHP柱层析从广西五步蛇蛇毒分离纯化出一种电泳纯细胞毒素I3H3,分子质量为36ku。I3H3对体外培养的人癌细胞有较强抑制和杀伤作用。用溴化二苯四偶氮盐比色法检测其对体外培养的人癌细胞的细胞毒作用,探索量效关系。其对体外培养的人肺癌细胞株(A549),人胃癌细胞株(BGC)和人鼻咽癌细胞株(KB)的抑制作用呈明显剂量依赖关系,作用24h的IC50分别为27.75,26.90和64.46μg/m1。