抗Cyclin D1胞内抗体AD5N基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

目的：构建细胞核定位的抗CydinD1胞内抗体基因的真核表达载体并分析其对乳腺癌细胞增殖的抑制效应。方法：利用PCR技术和分子克隆技术，构建编码细胞核定位的抗CydinD1胞内抗体基因（AD5N）的真核表达载体pcDNA3．1-ADSN，利用脂质体介导法转染MCF-7细胞，RT-PCR、间接免疫荧光、Westernblot和流式细胞术分析该胞内抗体基因ADSN在MCF-7细胞中的表达、定位及抑瘤效应。结果：经限制性内切酶分析及序列分析发现，成功构建编码细胞核定位的抗CyclinD1胞内抗体（AD5N）基因的真核表达载体pcDNA3．1-ADSN，基因片段为855bp，编码285个氨基酸，分子量约为30kD。RT-PCR、免疫荧光及Westernblot实验结果显示，仅在转染胞内抗体基因的MCF-7细胞中存在该胞内抗体的表达，并且主要分布在细胞核区域。与野生型MCF-7细胞和转染空质粒的细胞相比，在MCF-7／pcDNA3．1-ADSN细胞中ADSN的表达可明显抑制MCF-7细胞增殖，显著诱导细胞凋亡（P〈0．01），使G0-G1期细胞周期指数增高12．64％，S期指数下降15．22％，凋亡细胞指数上升9．15％。结论：细胞核定位的抗CyclinD1胞内抗体ADSN基因的表达，可有效抑制乳腺癌细胞的增殖，阻滞细胞周期进展，并诱导细胞凋亡。     

抗Cyclin D1胞内抗体AD5N对宫颈癌HeLa细胞的影响

目的：抗CyclinD1胞内抗体AD5N对宫颈癌细胞增殖的抑制效应分析。方法：将携带抗CyclinD1胞内抗体AD5N的真核表达载体pcDNA3．1-ADSN，利用脂质体介导法稳定转染宫颈癌HeLa细胞。G418筛选阳性细胞株，进一步通过Westernblot、MTT法及流式细胞术分析该胞内抗体的细胞内表达和抗肿瘤效应。结果：AD5N在稳定筛选的细胞株中有效表达，与空细胞和空质粒转染的细胞株相比，明显抑制HeLa细胞增殖，并诱导细胞凋亡（P〈0．01），细胞周期G0-G1期指数增高10．35％，S期指数下降15．77％，凋亡细胞指数上升6．38％。结论：抗CyclinD1胞内抗体AD5N基因的表达。抑制宫颈癌细胞的增殖．阻滞细胞周期进展．并诱导细胞凋亡。     

石斛伪品石仙桃的鉴别

中药石斛系兰科石斛属多种植物的干燥茎 ,笔者近来发现一种与正品石斛不同的伪品流入市场 ,经参考有关资料鉴别[1,2 ] ,系兰科石仙桃属植物石仙桃 ( Pholidota chinensis Lindl.)带少量根状茎的假鳞茎。现将其鉴别特征介绍如下。1　石仙桃性状1 .1　根状茎　呈圆柱形 ,长短不等 ,直径 2～3mm。表面黄褐色 ,具密集的环节 ,其上残存鳞叶 ,顶端鳞叶密集包住尖头 ,有的具须根。质硬 ,断面皮部淡棕色、木部黄白色。气微 ,味淡。1 .2　假鳞茎　呈长纺锤形 ,微弯曲 ,长 2～ 7cm,中部直径 0 .3～ 0 .8cm。表面金黄色或棕褐色 ,具纵棱 ,顶端有叶痕 ,…     

高台封闭垃圾箱设计特点及评价

目前部队营区垃圾暴露问题,一直未能得到很好的解决,既影响营区整洁,又成为苍蝇孽生地和污染源。为消除污染,创造优美的营区卫生环境,我们于1987年设计修建了一种高台封闭式垃圾箱。经过三年使用观     

氯吡格雷联合阿司匹林治疗不稳定型心绞痛临床疗效观察

目的：探讨氯吡格雷联合阿司匹林治疗不稳定型心绞痛（UA）的疗效及安全性。方法：选择诊断明确的,出现症状后48h内就诊的118例不稳定型心绞痛患者,将其随机分成两组,在常规抗心绞痛治疗的基础上,对照组（58例）单服阿司匹林,治疗组（60例）在服用阿司匹林基础上联合氯吡格雷口服,疗程4周。观察两组疗效,各种心血管事件及不良反应情况。结果：治疗组总有效率为86.67%,高于对照组的63.79%,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。且治疗4周后均未出现严重不良反应及终端心血管事件。结论：氯吡格雷联合阿司匹林治疗不稳定型心绞痛较单用阿司匹林疗效显著,不良反应小,安全可靠。     

儿童弱视防治

弱视是指在视觉发育未成熟期出现的、由于异常的双眼相互作用和视觉剥夺及视皮质主动抑制等因素所造成视觉空间分辨能力下降[1]，而眼部检查无器质病变，戴矫正镜片不能改善视力，通过治疗可以好转者。我国中华眼科学会全国儿童斜视弱视防治学组[2]将视力界值为矫视力〉0．9；赵堪兴等[3]认为在诊断弱视时要特别注意儿童的年龄因素，应对不同年龄组儿童采用不同的视力标准；如3岁儿童的正常视力参考值下限为0．5，4～5岁0．6，6—7岁为0．7。弱视的危害是无完善的立体视。国内外研究表明，斜视弱视发生后主要损害的是精细立体视觉，发生视网膜对应异常、眼球运动异常、知觉融合与运动融合异常，破坏已经发育或正在发育的双眼视觉，故重建双眼视觉已成为弱视治疗的最终目标。     

急性冠脉综合征患者38例护理体会

目的探讨急性冠脉综合征患者的护理经验。方法对2009年中38例急性冠脉综合征病人通过加强急救措施,严格观察病情变化,密切配合医生治疗,做好心理护理和健康指导。结果 38例患者中35例康复出院,死亡3例。结论护理人员必需掌握急性冠状动脉综合征（ACS）的诊治规程,心电图的操作技术,精湛的专业技术和良好的心理素质可以促使ACS病人早日康复,提高病人生存质量。     

中西医结合治疗24例视网膜静脉阻塞疗效观察

目的:观察中西医结合疗法对视网膜静脉阻塞临床治疗效果。方法:将44例视网膜静脉阻塞患者分为治疗组24例和对照组20例,观察视力、黄斑水肿消退、眼底出血吸收情况并评定疗效。结果:治疗组有效率87.5%,对照组有效率55.0%,治疗组有效率优于对照组(P﹤0.01)。结论:中西医结合疗法治疗视网膜静脉阻塞疗效显著。     

儿童弱视防治

弱视是指在视觉发育未成熟期出现的、由于异常的双眼相互作用和视觉剥夺及视皮质主动抑制等因素所造成视觉空间分辨能力下降[1],而眼部检查无器质病变,戴矫正镜片不能改善视力,通过治疗可以好转者。我国中华眼科学会全国儿童斜视弱视防治学组[2]将视力界值为矫视力>0.9;赵     

急性腹泻患者蓝氏贾第鞭毛虫感染情况调查

蓝氏贾第鞭毛虫是引起急性腹泻的常见病原体之一。其临床表现缺乏特异性，急性症状又有自限性，加之临床医生对该病认识不足，容易误诊。其感染情况存在明显地区差异，主要与当地卫生状况有关。所以对急性腹泻患者蓝氏贾第鞭毛虫感染情况调查研究，对于临床和公共卫生方面有指导作用。[第一段]