缺氧诱导因子-1α在前列腺癌中的表达及意义

目的　探讨缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)蛋白在前列腺癌 (CaP)中的表达及意义。　方法　应用免疫组化SP法检测 42例CaP和相应癌旁组织 ,12例高分级前列腺上皮内瘤 (PIN )以及 9例正常前列腺组织 (NP)中HIF 1α的表达 ,免疫印迹技术分析不同氧浓度诱导下CaP细胞株PC 3M的HIF 1α蛋白水平。　结果　 3 3例 (78.6% )CaP和 9例PIN组织HIF 1α蛋白表达阳性 ,有远处转移的CaP组织中HIF 1α表达显著高于无转移者 (P <0 .0 5) ,癌旁组织及正常前列腺组织中无阳性表达 ;PC 3M细胞株中HIF 1α表达水平随氧浓度减小而明显升高 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　HIF 1α表达是CaP形成的早期事件 ,其水平升高可能导致肿瘤向恶性发展表型 ,HIF 1α可作为CaP的早期诊断指标和治疗新靶点     

短发夹状RNA对PC-3M细胞端粒酶逆转录酶基因表达和端粒酶活性的影响

目的:研究短发夹状RNA(shRNA)对PC 3M细胞中端粒酶逆转录酶(hTRT)基因表达及端粒酶活 性的影响。方法:构建针对hTRT基因的shRNA表达质粒psilencer TRT,在质脂体介导下转染人前列腺癌PC 3M细胞,应用RT PCR及免疫组织化学检测hTRTmRNA及蛋白表达水平,应用SYBR Green染色法检测端粒 酶活性的变化。结果:重组体psilencer TRT转染细胞24h和48h后显著下调hTRTmRNA及蛋白水平,作用 48h后,其抑制率分别为85.39%和79.17%,较空白对照组差异有统计学意义(P<0.01)。同时,随着时间的延 长,端粒酶活性亦有明显下降(P<0.01)。结论:利用短发夹状RNA干扰技术能有效抑制靶基因的表达,为前 列腺癌的基因治疗提供新思路。     

男性不育症患者睾丸组织中端粒酶RNA表达状况的研究

目的 为探讨人端粒酶RNA（hTR)基因在男性不育症患者睾丸组织中的表达及其意义。方法 应用核酸原位杂交技术对47例男性不育症患者睾丸组织和10例正常睾丸组织中端粒酶hTR基因的表达进行检测和定位，并应用HPIAS-1000高清晰度图像处理系统对hTR阳性信号进行图像分析，结果 端粒酶hTR基因阳性表达与生殖细胞（精原细胞、精母细胞、精子细胞）的分布定位一致，在精细胞不发育（唯Sertoli细胞综合征）患者睾丸组织中无端粒酶hTR基因的表达。结论 提示端粒酶活性的缺乏可能是生殖细胞发育停滞的原因，但不是唯一的原因。可能还有端粒酶以外的因素起作用，对端粒酶研究有助于了解它在男性生殖中的作用，并为男性不育症在端粒酶途径的基因治疗提供理论和实验依据。     

后腹腔镜下肾上腺节细胞神经瘤切除报道

目的:总结肾上腺节细胞神经瘤的临床特点和手术疗效.方法:5例肾上腺节细胞神经瘤,采用后腹腔镜子术切除3例,开放手术切除2例,肿瘤位于左侧3例.右侧2例.结:果后腹腔镜手术顺利,无中转开放,2例开放手术时间为90～180min,3例腹腔镜手术时间为30～120min,平均为80min.开放组出血量100～300mL,腔镜组出血量20～50mL.切下肿瘤最大直径1.6～7cm,平均为(4.8±1.9)cm.4例肿瘤为单发,1例为多发.无并发症发生.术后随访未見局部复发.结论:肾上腺节细胞瘤行后腹腔镜手术切除是安全和可行的,微创、恢复快,可做为腹腔镜手术的适应证.     

反义核酸对体外培养A型精原细胞端粒酶活性的影响

我们选择鼠端粒酶RNA (mTR)模板区序列设计的反义寡核苷酸 (ASODN)作用于体外分离纯化的SD大鼠精原细胞 ,观察mTRASODN对精原细胞生理状态下合理存在的端粒酶活性的影响 ,为临床更安全的肿瘤基因治疗及端粒酶途径的男性生殖调控提供依据。一、材料和方法1.光镜及电镜观察 :为了从每个睾丸获得尽可能多的A型精原细胞并排除其他发育阶段的细胞 ,取 5～ 12d龄SD大鼠 (华中科技大学同济医学院实验动物中心提供 )睾丸 ,光镜及电镜观察睾丸曲细精管细胞组成 ,确定SD鼠最佳取材日龄为出生后第 9天。2 .硫代磷酸寡核苷酸 (ODN )的合成 :…     

会阴部血管肌纤维母细胞瘤一例报告

血管肌纤维母细胞瘤临床罕见,其临床及影像学表现缺乏特异性。2019年10月菏泽市立医院收治1例会阴部血管肌纤维母细胞瘤患者,予手术治疗,术后经病理检查确诊。     

EphA2和E-cadherin在前列腺癌中的表达及其意义

目的　探讨Eph受体酪氨酸激酶A2 (EphA2) 和上皮粘连素 (E cadherin) 在前列腺癌 (CaP) 中的表达及其意义。方法　用免疫组化SP法检测EphA2和E cadherin蛋白在44例CaP、23例高分级前列腺上皮内瘤 (PIN)及25例良性前列腺组织中的表达情况。结果　在CaP中EphA2表达显著高于PIN (P<0. 01), 两者均显著高于良性前列腺组织 (均P<0 .01)。CaP中E cadherin表达显著低于PIN及良性组织 (均 P<0. 01), 后两者间无显著性差异(P>0 .05)。EphA2高表达和E cadherin低表达与 CaP病理分级、临床分期及癌症转移密切相关。EphA2 与 E cad herin表达呈负相关。结论　EphA2可作为CaP的早期诊断指标和治疗的新靶点。E cadherin可与 EphA2 结合作为判断CaP恶性程度及预后的指标。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导前列腺癌细胞凋亡的研究

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞的凋亡诱导作用。方法 10μg/L-100μg/L的TRAIL处理培养的PC-3M细胞4～24h后，采用Annexin-V荧光染色、透射电镜、原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡；流式细胞术和MTT比色检测凋亡率、细胞生长抑制率与TRAIL的时间、浓度依赖关系。结果10μg/L～100μg/L TRAIL作用4～24h，肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变，随着TRAIL浓度的增加或药物作用时间的延长，肿瘤细胞凋亡率也增加，为13．8％～79．6％，同时细胞生长抑制率出现明显增加，药物作用8h为7．5％～37．9％，12h为16．7％～87．9％，24h为39．7％～97．6％。结论 TRAIL能够迅速和显著地诱导PC-3M细胞凋亡，可能成为晚期前列腺癌治疗的新方法。     

TMPRSS2-ERG融合基因与转移性去势抵抗性前列腺癌化学药物治疗后生存率的关系

目的 明确TMPRSS2-ERG（T-E）融合基因与转移性去势抵抗性前列腺癌（metastatic castration-resistant prostate cancer,mCRPC）多西他赛化学药物治疗（以下简称化疗）后生存率的关系。方法 选取首都医科大学附属北京同仁医院前列腺增生患者20例,前列腺癌化疗的患者50例。用实时定量聚合酶链反应（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检查患者外周血单核细胞中融合基因表达。通过前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）应答率、PSA-无进展生存率（free survival,PSA-PFS）、放射学无进展生存率（radiological progression free survival,RX-PFS）和总生存率（overall survival,OS）评估不同融合基因表达患者的治疗反应。结果 50例前列腺癌患者中10例（20%）检测到T-E融合基因。T-E阳性组的PSA应答率低于阴性组（32.52%vs 74.35%,P=0.040）。单因素生存分析显示T-E阳性患者前列腺PSA-PFS、RX-PFS、OS低于阴性患者,差异均有统计学意义（P < 0.01）。多因素Cox回归分析显示T-E阳性是PSA-PFS、RX-PFS和OS的独立危险因素（P=0.010,P=0.010,P=0.020）。结论 T-E融合基因表达是多西他赛化疗mCRPC患者PSA-PFS、RX-PFS和OS的独立危险因素。     

A型精原细胞体外分离纯化及其端粒酶活性抑制后的形态学变化

目的 :探讨分离纯化、体外培养的A型精原细胞在端粒酶活性受到抑制后细胞形态学的改变。方法 :以脂质体LipofectAMINE 2 0 0 0介导将硫代磷酸修饰的端粒酶mTR反义寡核苷酸 (ASODN)转染体外分离纯化的 (SD)大鼠精原细胞 ,采用生物发光技术检测精原细胞中端粒酶活性的改变 ,光镜及电镜观测端粒酶活性抑制后A型精原细胞的形态学变化。结果 :mTR ASODN可明显抑制精原细胞端粒酶活性 (P <0 .0 5 )。ASODN转染 4 8～ 72h后 ,光镜下可见细胞生长缓慢 ,染色质浓缩 ,胞质出现颗粒样物质 ,72h后死细胞数较空白对照组明显增多。电镜下可见部分细胞核异染色质浓聚集、浓缩和边集 ,胞质胞核内均可见空泡 ;部分细胞核完全固缩。单纯脂质体组及正义寡核苷酸对照组形态学均无显著变化。结论 :mTR ASODN可明显抑制体外培养的A型精原细胞端粒酶活性 ,并在转染 4 8～ 72h后使细胞形态学出现明显改变