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胃癌单克隆抗体-丝裂霉素C结合物的制备及其细胞毒特征 总被引:1,自引:1,他引:0
作者报道胃癌单克隆抗体MG11-丝裂霉素C(MMC)结合物的制备及其对肿瘤细胞的杀伤作用。首先用戊二酐处理MMC,于MMC上引入羧基,MMC衍生物与N羟基琥珀酰亚胺及2,2′-二环已基碳二亚胺反应,得到MMC活性酯,后者与抗体反应将MMC引入抗体中。经测定,每克分子抗体中引入约6~7克分子药物,结合物对人胃癌细胞KATⅢ具有较强的选择性杀伤作用,在0.56μg/ml水平(药物浓度)对肿瘤细胞杀伤牢达60%,优于游离药物(51%)及无关抗体结合物(9.3%),提示选用的胃癌单抗对MMC具有较好的导向作用。 相似文献
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目的:利用原核表达系统,构建异源血管内皮生长因子融合蛋白疫苗,研究该融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌肿瘤模型的抗血管生成主动免疫治疗效果.方法:将鸡VEGF基因克隆入pGEX-4T-2原核表达载体,经IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-NTA纯化,透析复性,构建GST-cVEGF融合蛋白疫苗.将C57BL16J小鼠随机分为3组,GST-cVEGF疫苗组10只、cVEGF疫苗组10只、生理盐水组(NS) 10只.将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只分别0、2、3周免疫100 μg GST-cVEGF融合蛋白疫苗、单纯cVEGF蛋白疫苗、生理盐水.接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态.接种肿瘤18 d后,处死小鼠,剥离肿瘤称重.检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度.结果:GST-cVEGF疫苗组、cVEGF组、生理盐水组肿瘤均重分别为(1.55±0.534) g、(1.93±0.607) g、(2.87±0.642) g.GST-cVEGF疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P<0.01).疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1:2000.结论:异种血管内皮生长因子基因重组融合蛋白疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应. 相似文献
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目的探讨表皮因子受体为靶向,重组T7噬菌体疫苗在体诱导的免疫活性。方法用构建的重组T7噬菌体疫苗免疫动物,Dot-Blot和流式细胞仪检测产生的特异性抗体,MTT法检测产生的特异性杀伤肿瘤细胞活性。结果实验组动物均产生特异性抗体,与A431细胞结合的阳性细胞率分别为37.6%、47.6%和35.1%;T7415-1b-90和T7415-1b-132实验组均诱导产生对A431细胞的特异性杀伤作用,检测的ODE+T与对照组相比具有显著性差异(P<0.01);T710-3b-638实验组对肿瘤细胞无杀伤作用。结论异源EGFR分子构建的重组T7噬菌体疫苗可以诱导机体产生体液免疫反应和细胞免疫反应。 相似文献
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VEGF受体KDR克隆及其对内皮细胞增殖和血管新生的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:克隆VEGF受体KDR基因膜外5-7区,探讨其生物学活性。方法:提取脐静脉血管内皮细胞总RNA,克隆KDR基因膜外部分5-7区,并使之在QIA表达系统进行表达;镍柱亲和层析纯化、复性、生物学活性鉴定。结果:该系统能表达KDR基因片段,表达量约占菌体蛋白总量的5%左右。经复性,可溶性蛋白具有与VEGF特异结合功能,并能抑制VEGF促使脐静脉内皮细胞增殖和鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用。结论:KDR基因片段能在QIA表达系统中得到表达,复性后表达蛋白具有与VEGF结合的生物学功能。 相似文献
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本文报道鼠抗人胃癌单克隆抗体-蓖麻毒素A链结合物的制备及其对肿瘤靶细胞的杀伤作用。抗体与3-(2-吡啶二巯基)丙酸-N-琥珀酰亚胺酯(SPDP)反应引入2-吡啶二硫化物,然后与巯基暴露的A链反应,得到抗体-A链结合物。ELISA结果表明,抗体与毒素A链连接是成功的,结合物中抗体保存较好的与靶细胞结合活性。结合物对靶细胞具有较强的选择性杀伤作用,在1×10~(-9)M水平,对人胃癌细胞KATO Ⅲ蛋白质合成抑制率为71%,而对非靶细胞作用很弱。结果表明,该单抗具有较好毒素A链导向作用。 相似文献
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半乳糖结合位点封闭式免疫毒素的制备及其特性 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道B链半乳糖结合位点封闭的蓖麻毒素—胃癌单克隆抗体(McAb)结合物的制备及其细胞毒特征.首先将引入碘乙酰基团的毒素与引入巯基的抗体反应,得到的结合物通过琼脂糖亲和层析柱除去仍保留半乳糖结合能力的部分.ELISA结果表明,结合物稀释至2 nmol/L水平,仍保留抗体结合活性.结合物对靶细胞在体外有较强的选择性杀伤作用,在0.1 pmol/L水平,对人胃癌细胞KATOⅢ的杀伤率为46%,优于McAb—蓖麻毒素A链结合物.结果表明,免疫毒素中B链的存在有助于增强A链的细胞杀伤作用。 相似文献
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越来越多的动物实验及临床应用证明,单抗介导的导向作用是确切的。在对抗人小细胞肺癌单抗2F7进行了特异性、亲和性及相关抗原表达研究的基础上,用移植人小细胞肺癌的裸鼠作为肿瘤模型,研究了碘标记 相似文献