快速大量分离血浆低密度脂蛋白亚组分的方法

目的 :研究快速大量分离低密度脂蛋白亚组分的方法。方法 :通过2步超速离心法分离LDL亚组分 ,并用电泳法及电镜观察鉴定2种亚组分。结果 :仅用10h就将LDL亚组分分开 ,并证实经分离的2种亚组分为纯品。结论 :本方法是1种分离LDL亚组分较好方法     

HPV16 E6E7癌蛋白通过TWEAK/Fn14信号途径对细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨HPV16 E6E7对TWEAK/Fn14信号途径及细胞增殖和凋亡的影响。方法:制备表达HPV16 E6E7的逆转录病毒,感染原代角质形成细胞。用流式细胞仪分析可诱导纤维母细胞生长因子14(Fn14)表达,Real-time RT-PCR和Western blot法检测调解活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、干扰素-γ诱导蛋白10水平(IP10)和肿瘤坏死因子(TNF)受体相关因子(TRAF2)表达,生物化学法检测Ras GTpase活性,TUNEL检测细胞的凋亡,MTT法检测细胞增殖。结果:表达HPV16 E6E7的逆转录病毒感染角质形成细胞后,Fn14高表达,RANTES、MCP-1、IP10和TRAF2表达增加,Ras GTpase活性升高。与未感染表达HPV16 E6E7逆转录病毒的细胞比较,表达E6E7感染的角质形成细胞对TNF-α刺激不敏感,细胞增殖显著增加(P0.05)。结论:表达HPV16 E6E7细胞激活TWEAK/Fn14信号途径,从而上调RANTES和TRAF2表达,导致细胞增殖,这可能是高危型HPV的一个致病机制。     

紫外酶促法检测血浆及尿中D-乳酸盐

目的本研究旨在建立了1种检测血浆和尿液中D-乳酸盐的酶学方法并对该法进行了方法学评价。方法用改良的紫外酶促法对血浆及尿中D-乳酸盐检测分析。结果在浓度为0-500μm血浆和尿标准曲线的线性非常好（相关系数,R=0．99）。血浆和尿液批内变异系数（CV）分别为为3．0％和5．8％;血浆和尿液的批间变异系数分别为7．1％和6．8％;血浆和尿液的平均回收率分别为（103．48．2％）和（100．1±7．2）％;结论该方法具有可接受的精度和回收率,准确快速,不需要大型仪器,可适用常规检测。     

改良紫外酶促法在糖尿病患者血浆、尿D-乳酸检测中的应用

目的:建立一种检测D-乳酸含量的改良紫外酶促法,并探讨其在糖尿病患者血浆、尿D-乳酸检测中的临床应用.方法:对检测血浆、尿D-乳酸含量的商品试剂盒加以改良,并用改良紫外酶促法检测80例糖尿病患者和85例健康成人的血浆和尿液标本中D-乳酸含量.结果:改良紫外酶促法检测血浆、尿D-乳酸在0～200 μmol/L的范围内具有良好线性关系;平均批内及批间变异系数分别为3.0%、5.8%,7.1%、6.8%;平均回收率分别为(103.4±8.2)%,(100.1±7.2)%.糖尿病患者血浆D-乳酸的含量[(40.1±24.5)μmol/L]明显高于健康成人[(23.2±10.1)μmol/L],尿中经肌酐校正的D-乳酸含量差异也有显著性[(37.4±5.6)μmol/(L·mMCr)vs(19.3±12.6)μmol/(L·mMCr)].结论:改良紫外酶促法检测血、尿D-乳酸含量具有较宽的线性范围和可接受的精度及回收率,适合在常规实验室推广应用.糖尿病患者血浆、尿D-乳酸含量明显高于健康成人,检测D-乳酸含量对糖尿病的诊疗有一定的临床意义.     

不同病理类型肺癌患者血清hsCRP和SA的表达

选择121例肺癌患者和40例健康体检者,采用免疫透射比浊法检测血清高敏C反应蛋白(hsCRP)水平,酵素法测定血清唾液酸(SA)水平.发现肺癌患者血清hsCRP、SA水平均明显高于对照组.不同病理类型肺癌患者间血清h8CRP和SA的水平相比无统计学差异.认为检测血清hsCRP和SA的水平有可能对肺癌的临床诊断提供有效的依据.     

检测血清总胆汁酸及转氨酶对肝胆疾病诊断价值

目的探讨血清胆汁酸(TBA)和转氨酶(ALT、AST)的联合检测在急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌及胆道疾病中的诊断价值。方法酶法检测血清中胆汁酸(TBA)的浓度及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性。实验分组:经诊断为急性肝炎63例,慢性肝炎48例,肝硬化35例,肝癌28例,胆道疾病30例,对照组60例为正常健康体检人群,并进行各组结果同对照组比较。结果健康对照组、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肝胆疾病血清TBA值分别为8.4±3.81、53.8±23.4、19.6±5.24、68.3±38.8、36±12.5、15.6±8.7μoml/L。血清ALT值分别为20.8±8.6、589±214、85±45.2、68±22.3、112±68.5、45±8.94U/L。血清AST值分别为21±7.8、63±26.3、84±34.52、128±35.5、54±26.73、32±5.7U/L。结论胆汁酸(TBA)的测定对急性肝炎,肝硬化患者有高度灵敏性,对ALT、AST正常的慢性肝炎和肝硬化患者有独特的诊断价值,TBA与ALT、AST联合检测能全面反映患者的病情变化。     

血清D-3-羟基丁酸测定与传统血酮体定性检测比较分析

目的 建立酶法测定血清D—3—羟基丁酸的一种新方法，并比较其与传统的血酮体测定方法在诊断糖尿病酮症中的意义。方法 对35例临床诊断糖尿病并发酮症的患者血清进行D—3—羟基丁酸测定及应用亚硝基铁氰化钠法进行血酮体定性分析。结果 35例患者血清D—3—羟基丁酸全部升高，而定性分析阳性例为26例，有9例为假阴性，两组差别经统计学分析有显著性差异。结论 血清D—3—羟基丁酸测定是一种快速、灵敏的检测血酮体的指标，它对临床糖尿病酮症的早期诊断较传统的亚硝基铁氰化钠法更准确。     

马拉色菌属RAPD基因分型与相关疾病的关系

目的 :探讨马拉色菌属在临床疾病中的意义。方法 :利用RAPD对临床分离株进行基因分型 ,建立马拉色菌属带型关系树状图 ,分析与相关疾病的对应关系。结果 :临床标本可分成 6类 ,其中 5类可进一步分为亚类。各类与疾病无明显的对应关系 ,但可得到具有临床意义的结果。结论 :RAPD作为研究马拉色菌属基因多态性的工具 ,马拉色菌属在相关疾病中存在多样性     

重组腺病毒 Ad–sh–SOCS1 增强宫颈癌树突状 细胞疫苗免疫反应的作用研究

〔摘 要〕 目的：研究沉默树突状细胞（DCs）中细胞因子信号抑制因子 1（SOCS1）能否强化宫颈癌癌蛋白 E7 的表位 肽 E7.49–57 脉冲 DCs 疫苗的免疫反应。方法：制备的重组腺病毒 Ad–sh–SOCS1 和 Ad–sh–mSOCS1 感染体外培养的小鼠 骨髓来源的树突状细胞（BMDCs）,用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT–PCR）检测 SOCS1 的表达,用酶联免疫吸附试 验（ELISA）检测培养上清液肿瘤坏死因子 α（TNF–α）、白细胞介素（IL）–12、IL–6 的水平;并用表位肽 E7.49–57 脉冲 被感染的 DCs,体内、外研究对小鼠抗组成式表达 HPV16E6E7 的小鼠肺上皮肿瘤细胞（TC–1）的抗肿瘤效果。结果：重 组腺病毒 Ad–sh–SOCS1 能显著抑制 DCs 中 SOCS1 的表达。与 DCs 组和 Ad–sh–mSOCS1 感染 DCs 组比较,感染重组病毒 Ad–sh–SOCS1 的 DCs 分泌的细胞因子 IL–6、IL–12 和 TNF–α 显著增多,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。E7.49–57 多 肽脉冲的 Ad–sh–SOCS1 感染的 DCs 在体内及体外均能显著抑制 TC–1 肿瘤细胞的生长,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：重组腺病毒 Ad–sh–SOCS1 能增强宫颈癌 DC 疫苗的抗瘤免疫反应。     

复制缺陷型腺病毒介导的SOCS1沉默加强树突状细胞疫苗对表达癌蛋白E7荷瘤小鼠的免疫治疗

目的探讨一种对宫颈癌可能有治疗作用的方法。方法构建SOCS1 RNA沉默的复制缺陷型腺病毒（rAd-RNAi-SOCS1）,用重组腺病毒体外感染从小鼠骨髓中分离培养的树突状细胞（DCs）,用多肽E7.49-53脉冲,并用LPS使DCs成熟,然后回输到已致瘤的小鼠体内,观察不同处理组小鼠模型肿瘤的生长情况和存活率。结果重组腺病毒的构建经测序证实构建的腺病毒是正确的,定量RT-PCR体外证明SOCS1 RNA对DCs表达SOCS1有抑制作用。用多肽E7.49-53在体外经rAd- RNAi-SOCS1处理后的DCs对荷瘤小鼠模型较对照组有显著的抑制肿瘤生长的作用,小鼠的存活率提高,存活时间延长（P〈0.05）。结论SOCS1的干扰介导DCs对肿瘤动物模型的治疗作用,机理可能为SOCS1的沉默突破了机体对肿瘤的免疫耐受。