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目的 考察一个548位点C→T单核苷酸突变的雌激素受体(ER)在体外条件下,对乳腺癌细胞株(MCF-7)信号通路的影响,以探讨ER单核苷酸突变引起非雌激素依赖性性早熟的可能机制.方法 用重叠延伸PCR定点诱变技术对548位点的碱基进行定点突变.构建定点突变表达载体pSG5-MuER.构建含雌激素受体反应元件(ERE)的萤光素酶报告基因载体pGL3-ERE-Luc.将野生和突变ER质粒分别和pGL3-ERE-Luc共转染MCF-7细胞,观察萤光素酶的变化,以检测突变ER反应活性的变化.结果 成功构建ER突变质粒psG5-MuER和ER报告质粒pGL3-ERE-Luc,psG5-MuER较pSG5-ER能够增加萤光素酶的产生.结论 该突变雌激素受体在体外具有高促转录活性特征,构建的载体可用于进行进一步的相关研究. 相似文献
3.
目的:研究雌激素在骨质疏松发病过程中导致骨髓间充质干细胞(BMMSCs)Fas配体(FasL)表达降低对CD4+T淋巴细胞凋亡的作用。方法:选用8周龄健康雌性小鼠行双侧卵巢切除术(OVX),建立绝经后骨质疏松模型。选用同一批次周龄相同、体重相近的健康小鼠行双侧卵巢附近脂肪组织部分切除,建立假手术组(sham),Micro-CT确定模型成功建立。流式细胞术对BMMSCs行表型鉴定,将OVX组、sham组和sham+雌激素刺激组BMMSCs与激活的T淋巴细胞共培养,以Annexin V/7-AAD/CD4流式细胞仪计数3组共培养体系中CD4+T淋巴细胞的凋亡差异,用实时荧光定量PCR和Western blotting检测OVX组、sham组及不同浓度雌激素刺激BMMSCs后FasL的表达情况。结果:流式检测显示sham+雌激素刺激组CD4+T淋巴细胞凋亡程度大于sham组(P<0.05),sham组CD4+T淋巴细胞凋亡程度大于OVX组(P<0.05),实时荧光定量PCR及Western blotting显示OVX组FasL mRNA及蛋白水平表达都较sham组低。在一定范围内不同浓度雌激素刺激下的sham组BMMSCs中FasL mRNA及蛋白表达与雌激素浓度呈梯度上升。结论:雌激素能够调控BMMSCs中FasL的表达,雌激素调控BMMSCs表达FasL能够影响CD4+T淋巴细胞凋亡的改变,这可能与绝经后骨质疏松发病相关。 相似文献
4.
目的:探讨高场磁共振扩散成像表观扩散系数(ADC )值与纤维化含量、成纤维细胞活化蛋白(FA P )表达评分的相关性。方法对18例经病理证实的胰腺癌患者进行3.0T MRI平扫及扩散加权成像(DWI)扫描,使用单一层面法选取感兴趣区(ROI)测量癌区ADC值,并对胰腺癌患者的蜡块进行Masson染色及FAP免疫组化染色,采用 Pearson相关分析检验ADC值与纤维化含量、FA P染色评分的相关性。结果胰腺癌区的ADC值与纤维化含量呈负相关( r=-0.459),但无统计学意义( P=0.056),中~高分化组ADC值与纤维化含量呈负相关( r=-0.564,P=0.044)。ADC值与 FA P染色评分呈负相关( r=-0.479,P=0.036)。结论胰腺癌的ADC值与其病理参数间呈负相关,DWI有望对胰腺癌的病理特征实现定量成像,有助于进一步了解其病理特征。 相似文献
5.
目的探讨卵巢癌患者血清人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)及甲壳质酶蛋白-40(YKL-40)水平与其病理特征的相关性。方法选取80例上皮性卵巢癌患者(上皮性卵巢癌细胞组)、40例上皮性卵巢肿瘤良性患者(良性卵巢肿瘤细胞组)及40例健康妇女(对照组)血清,使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HE4、YKL-40含量,使用电化学发光免疫法测定CA125含量。分析血清YKL-40、HE4、CA125诊断卵巢癌的敏感度,并确定血清HE4、CA125和YKL-40最佳界限值。结果对照组、良性卵巢肿瘤细胞组、上皮性卵巢癌细胞组YKL-40、HE4、CA125含量两两比较,差异均有统计学意义(P 0. 01)。上皮性卵巢癌患者血清YKL-40含量与病理类型(浆液性、黏液性)、淋巴结转移、病理分级密切相关(P 0. 05),血清HE4、CA125含量与病理类型(浆液性、黏液性)、临床分期、病理分级、淋巴结转移密切相关(P 0. 05)。YKL-40、HE4、CA125阳性卵巢癌患者生存率均显著低于其对应的阴性卵巢癌患者(P 0. 05)。HE4、CA125、YKL-40的最佳临界值分别为101. 200 pmol/L、95. 200 U/m L、53. 600 ng/m L,Youden指数分别为0. 852、0. 547、0. 749。HE4、CA125、YKL-40单独诊断卵巢癌的灵敏度分别为91. 5%、87. 0%、72. 0%,3者联合诊断的灵敏度为96. 5%,差异有统计学意义(P 0. 05); HE4、CA125、YKL-40单独诊断卵巢癌的特异度分别为92. 0%、93. 0%、95. 0%,3者联合诊断的特异度为85. 0%,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论卵巢癌患者血清HE4、CA125、YKL-40水平与卵巢癌的发生及不良预后密切相关。 相似文献
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原发性女性生殖系统非霍奇金淋巴瘤25例临床分析 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨原发性女性生殖系统非霍奇金淋巴瘤(primary female genital system lymphoma,PFGSL)的临床特征、治疗及预后。方法:回顾性分析天津医科大学附属肿瘤医院1976年1月-2006年8月收治的25例原发性女性生殖系统非霍奇金淋巴瘤患者的临床资料,分析其临床分期、恶性程度、治疗及影响预后的因素。结果:25例PFGSL患者平均年龄41.2岁,病变部位分别位于卵巢(11例)、宫颈(7例)、子宫(5例)和外阴(2例)。其中B细胞来源22例,T细胞来源1例,来源不明2例。按照国际工作分类(1WF),PFGSL低、中度恶性占78.3%。高度恶性占21.7%。按Ann Arbor分期,ⅠE期8例(32.0%),ⅡE和ⅣE期各6例(24.0%),ⅢE期5例(20%)。治疗方法采用手术和化疗为主的综合治疗,采用手术+放疗+化疗3例,手术+化疗18例,放疗+化疗2例,单纯手术2例。全组患者中位生存期(MST)25个月,5年生存率32.0%。研究发现原发部位、临床分期及IWF不同,其生存期差异有显著性。原发于卵巢者预后最差,晚期(ⅢE,ⅣE)、高度恶性的病例预后明显差于早期(ⅠE,ⅡE)、低度恶性的病例。结论:PFGSL临床症状不典型,预后较差,治疗方法应采用手术及化疗为主的综合治疗;原发部位、临床分期及IWF是预后的影响因素。 相似文献
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F10基因与绿色荧光蛋白融合载体的构建及亚细胞定位 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:构建F10基因与绿色荧光蛋白的融合蛋白表达载体,进而观察F10基因编码蛋白在细胞内的定位情况。方法:运用RT—PCR技术从葡萄胎组织中分离F10基因的完整ORF,构建pEGFP-N2/F10和pEGFP—C2/F10的融合表达载体,以1Apofect AMINE2000为介导剂,将重组载体转染入人乳腺癌细胞MCF-7,并在荧光显微镜和共聚焦显微镜下观察表达的融合蛋白。结果:显微镜下观察到,GFP/F10融合蛋白呈不规则的颗粒状、环状分布于细胞核,或细胞浆,或者在核浆中均有分布,而且在细胞浆中主要分布在细胞器中。而对照的pEGFP蛋白均匀分布在整个细胞浆和细胞核。结论:F10蛋白在细胞的不同周期分布不同,或在细胞核,或在细胞胞浆中,或者在核浆中均有分布。 相似文献
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目的:检测高迁移率族蛋白-1(HMGB-1) mRNA和晚期糖基化终产物受体(RAGE) mRNA在宫颈鳞癌(CSEC)组织中的表达及其与临床病理参数间的关系,探讨它们与CSEC发生、侵袭和转移的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CSEC、癌旁及正常宫颈组织中HMGB-1 mRNA和RAGE mRNA的表达情况。结果:(1)HMGB-1 mRNA在CSES、癌旁组织表达水平均高于正常宫颈组织(P<0.05)。其表达与肿瘤分期、淋巴转移明显相关(P<0.05),而与肿瘤直径、分级无关(P>0.05)。(2)RAGE mRNA在CSES、癌旁及正常的宫颈组织中的表达水平无明显的统计差异(P>0.05),其表达与肿瘤直径、分级、分期无关(P>0.05),仅与淋巴转移相关(P<0.05)。结论:HMGB-1可作为判断宫颈肿瘤侵袭、转移的生物指标,RAGE与CSEC转移相关,HMGB-1/RAGE可能是促进CSEC转移发生的重要信号通路,它们将有可能成为治疗宫颈癌淋巴转移的新靶点。 相似文献
9.
目的:通过对我院用药咨询情况进行整理分析,就热点问题进行讨论,总结工作经验,以提高合理用药的水平。方法:将2010年度用药咨询记录共计5 213份作为统计对象,按咨询方式,咨询者身份、性别、年龄情况,咨询完成情况、咨询内容以及咨询药物品种分布情况进行统计分析。列举一些特殊案例,提出合理性建议。结果:咨询者以老年患者居多,占总咨询数的96.1%,且女性多于男性。咨询内容中一般性问题占总咨询数的76.1%,专业性问题总体上涉及较少,但个别患者提出的问题又非常专业,反映了患者对药品知识的了解情况不一。结论:提高药物咨询工作质量对促进合理用药有非常重要的意义,有利于进一步树立药师的公众形象。 相似文献
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探讨宫颈鳞癌组织中晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达情况及其与肿瘤分化程度、大小、分期、浸润和转移的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测了30例宫颈原位癌、90例无转移的宫颈癌、30例有转移的宫颈癌和30例正常宫颈鳞状上皮中RAGE表达情况,并应用Western blot技术定量检测其表达情况。结果:RAGE在宫颈鳞癌组织中呈强阳性表达48.0%(72/150),正常宫颈鳞状上皮中弱表达13.3%,差异具有显著性(P<0.01),RAGE的高表达与宫颈鳞癌的发生、分期、侵袭和转移有关(P<0.01),而与其组织分化程度、大小无关(P>0.05)。结论:RAGE在宫颈鳞癌组织中尤其是发生转移的宫颈鳞癌组织中呈强阳性表达,可作为宫颈鳞癌浸润、转移的重要判定指标之一,并有望成为基因治疗的靶点。 相似文献