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构建人源抗TNF-α单链抗体基因,并尝试其在E.coli中的表达和纯化,采用人工接头,按VH-linkerVL的结构将人源抗TNF-a的VH,VL基因拼接成单链抗体(ScFv)基因,并将构建好的ScFv基因插入表达载体pQE30,转染E.coli M15,以IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂纯化表达产物,构建的ScFv基因长723bp, 列分析表明,该序列拼接正确,SDS-PAGE显示,用重组的pQE30转化的M15菌经诱导后,有相对分子质量(M)约为52000的外源蛋白表达,Ni-NTA树脂纯化的表达产物纯度大于90%,因此,成功地构建了人源抗TNFa的ScFv基因,并在E.coli DH5a中表达和纯化的该基因的产物。 相似文献
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1977年出版的D.O.Hall及K.K.Rao写的一本《光合作用》(Photosynthesis)小册子(第二版),在七十页左右的篇幅里,对光合作用的基本过程扼要地作了叙述,它比较确切而简略地说明了这些知识是如何获得的,以及现在正在研究哪些问题等。这对希望了解光合作用概貌的读者是一本很有益的书。但是,这本书有一些重要的遗漏,这是它的不足之处。1981年,又出现了这书的第三版,它保留了第二版的基本内容,但对前版的遗漏作了些补充,并增添了一些最新的进展。现将所增补的内容简要地作一个介绍,供持有本书第二版的读者参考。 相似文献
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人抗E.Coli J5噬菌体抗体制备的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以E.Coli J5株对合人Ig基因的噬菌体抗体库进行淘筛富集,免疫印迹筛选,以及ELISA检测,结果获得4株能与E.Coli J5株结合的阳性克隆,且阳性克隆结合抗原的活性可分别被E.Coli J5株、E.Coli Rc-LPS和抗E.Coli J5株核心糖脂域MAb抑制.PCR检测表明,4株阳性克隆均分别带有约660bp大小的重链和轻链基因片段.SDS-PAGE与蛋白质印迹的结果显示,经IPTG诱导的阳性克隆能表达分子量约为50000大小的蛋白,提示该4株阳性克隆能够表达具有一定抗原结合活性的人源Fab片段. 相似文献
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应用单抗和流式细胞仪分析淋球菌的表面抗原 总被引:1,自引:0,他引:1
报告了利用流式细胞仪测定分析10株抗淋球菌脂寡糖单克隆抗体所识别的抗原分子表达的特点,定量地显示了这些抗原分子表达的稳定性和数量的多少,评价了单克隆抗体与不同血清型淋球菌的反应性。 相似文献
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基因工程抗体:单克隆抗体技术发展的新时代 总被引:1,自引:0,他引:1
基因工程抗体:单克隆抗体技术发展的新时代俞晓峰,黄策(军事医学科学院微生物与流行病研究所,北京100071)关键词基因工程抗体,单克隆抗体Kohler和Milstein于1975年创立的用杂交瘤技术制备单克隆抗体(MAb)的新方法标志着细胞工程抗体时... 相似文献
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第六届国际微生物学与免疫学快速及自动化技术讨论会(Sixth International Congresson Rapid Methods and Automation in Microbiologyand Immunology-RAMI-90)于1990 相似文献
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从混合的噬菌体抗体库中直接筛选高亲和性的抗肿瘤坏死因子-α人源单克隆抗体 总被引:1,自引:0,他引:1
采用噬菌体抗体库技术,从未经免疫的混合人噬菌体抗体库直接筛选抗TNFα的人源单克隆抗体,3种不同的检测手段表明,经过5轮的筛选,能够与TNFα结合的噬菌体抗体得到了有效的富集。对所获得的噬菌体抗体克隆进行的初步鉴定表明,7个噬菌体抗体克隆能有效地与人重组TNFα结合,并且这种结合具有特异性,由这7个噬菌体抗体克隆制备的抗体Fab片段也能有效地与TNFα结合。由此,我们通过噬菌体抗体技术直接获得了TNFα的人源单克隆抗体,这为进一步制备具有临床应用前景的人源抗TNFα单克隆抗体打下了基础。 相似文献
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1981年5月26—29日在美国华盛顿召开了第三届国际微生物学快速方法及自动化讨论会(International symposium on Rapid Methods and Automation in Microbiology)。前二届讨论会是分别于1973年(瑞典斯德哥尔摩)和1976年(英国剑桥)召开的。本届会议共约1000人参 相似文献