吡咯喹啉醌生物合成研究进展

吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)是一种多肽修饰类天然产物,是继烟酰胺和核黄素之后第三类辅酶,具有抗氧化、抗衰老、提高免疫力等重要生理功能,在医药、保健等领域具有重要价值。目前,PQQ的大规模制备仍然存在诸多问题,限制了PQQ的广泛应用。当前迫切需求低成本的合成方式,以充分实现其广阔的应用潜力。综述了近年来PQQ生物合成途径的解析、关键酶的催化反应机理以及高产菌株选育等方面的研究动态及发展趋势,并针对PQQ生物合成微生物细胞工厂构建研究策略提出了建议及展望。     

Surfactin的生产及在石油工业的应用研究进展

表面活性素(surfactin)是由枯草芽孢杆菌代谢产生的环脂肽类生物表面活性剂。Surfactin具有卓越的表/界面活性,在石油化工、生物医疗、农业和食品工业等领域具有良好的应用前景,被认为是最具潜力的生物表面活性剂之一。但高昂的生产成本以及使用成本限制了surfactin的规模化应用。本文中,笔者对surfactin的发酵生产研究及其在石油化工领域中的应用研究进行综述,并对surfactin的发酵生产及应用研究前景进行展望。     

可控高突变率枯草芽孢杆菌工程菌株的构建及应用

【背景】适应性实验室进化是运用于菌株改良的定向进化方法之一。适应性进化已成功应用于扩大底物利用范围和提高底物(产物)耐受性。由于微生物存在错配修复机制,使得菌株自然突变率水平极低,实验室适应性进化周期长,容易导致传代过程染菌而失败。【目的】获得可控高突变率的枯草芽孢杆菌工程菌株。【方法】采用无痕等位基因置换系统,将枯草芽孢杆菌负责错配修复机制的MutSL操纵子进行启动子置换为严谨表达、可诱导的木糖启动子。【结果】通过向培养基中添加不同浓度诱导物,可控制工程菌株所需突变率水平。将高突变工程菌株应用于苯乙醇耐受性实验,结果表明高突变工程菌株相较于出发菌株,对毒性产物苯乙醇具有更好的适应性,更容易获得突变菌株。将该高突变工程菌株应用于对生长有较大抑制的底物粗甘油的适应性进化实验,筛选得到的进化菌株相比出发菌株具有更短的延滞期、更高的生物量以及更大的比生长速率。【结论】该高突变率工程菌株具有较好的可进化性和适应性,可应用于适应性进化实验,具有广泛的应用前景。     

匹多莫德对抗生素相关性腹泻患儿的免疫功能及炎症反应的影响

目的:研究匹多莫德辅助治疗抗生素相关性腹泻(ADD)患儿的临床疗效及对患儿免疫功能和炎症反应的影响。方法:研究对象选取我院2015年10月到2016年12月间收治的ADD患儿96例,采用随机数字法将其分为对照组和观察组,每组各48例。两组患儿均接受常规对症治疗,观察组患儿在此基础上口服匹多莫德治疗。比较两组患儿的治疗总有效率和复发率、治疗前后的免疫功能指标和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平的变化。结果:观察组的治疗总有效率(93.75%)明显高于对照组(72.92%)(P=0.00),复发率明显低于对照组(P=0.00)。治疗后,观察组的血清IgA、IgG、IgM水平、CD~(3+)、CD~(4+)及CD~(4+)/CD~(8+)比值均明显高于对照组(P0.01),CD~(8+)、血清TNF-α和IL-6水平均明显低于对照组(P0.01)。结论:匹多莫德能够有效改善ADD患儿的免疫功能,抑制机体炎症反应,且治疗安全性高。     

pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达质粒构建及其在人成骨样细胞SaOS-2细胞中的表达*

目的:构建结缔组织生长因子(CTGF)的pcDNA3.1(+)真核表达质粒(pcDNA3.1(+)-CTGF),并检测其在人成骨样细胞SaOS-2中的表达,为进一步研究CTGF基因在骨发育和骨修复中的机制提供技术支撑。方法:采用PCR方法体外克隆CTGF基因全序列,将其用同源重组技术连接到线性pcDNA3.1(+)载体上,构建pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达质粒,并对该质粒进行测序鉴定;鉴定无误后转染至SaOS-2细胞中,观察其48 h的表达情况。结果:基因测序证实pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达重组质粒构建成功,与对照组相比,转染SaOS-2细胞48 h后的CTGF表达水平显著上调,达到对照组的4.8×10⁵倍(P＜0.01)。结论:成功构建了pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达质粒,并能在人成骨样细胞SaOS-2中稳定表达,为深入研究CTGF基因对骨生成的调控机制奠定了基础。     

适应性实验室进化在工业生产菌株选育中应用的进展

适应性实验室进化是一种在实验室里将微生物置于一定选择压力下,通过长期驯化,筛选获得具有特定表型突变菌株的方法.近年来,该方法通过改进特定进化条件和筛选策略,已广泛应用于筛选具有优良特性的工业生产菌株,如特定表型筛选、底物高效利用、目标产物合成及生长特性优化等工业微生物菌株选育.本文综述了适应性实验室进化技术在工业生产菌...