双报告基因真核表达载体的构建及其功能鉴定

目的:构建绿色荧光蛋白和海肾荧光素酶共同高效表达的双报告基因真核表达载体。方法:将增强型绿色荧光蛋白基因和海肾荧光素酶基因以昆虫病毒T2A序列相连接而后克隆进入pcDNA3.1(-)质粒,构建双报告基因真核表达载体。将该载体转染至COS-7细胞,通过荧光显微镜观察、照度计定量分析检测绿色荧光蛋白和海肾荧光素酶生物活性,Western Bolt检测T2A序列自剪切效率。结果:双报告基因真核表达载体能够同时表达非融合的绿色荧光蛋白和海肾荧光素酶,与单独表达载体产物具有相似的生物活性和表达效率。结论:双报告基因真核表达载体建立成功,为基因表达调控等相关领域研究提供辅助工具。     

HBsAg阴性母亲及其婴儿乙肝疫苗接种情况和免疫效果研究

目的：了解乙肝表面抗原阴性（HBsAg阴性）母亲及其婴儿乙肝疫苗接种情况及抗-HBs滴度水平,从而为今后针对该特殊人群进行更好的乙肝疫苗免疫策略提供依据。方法：2010年5月～2010年10月,对陕西省227对HBsAg阴性母亲及其婴幼儿（月龄为8～24月）进行流行病学调查并采集血液标本,对母婴血清抗-HBs进行定性及定量检测。结果：母亲乙肝表面抗体（抗-HBs）阳性率为45.4%,抗-HBs平均滴度为12.88 mIU/mL（95%CI：8.91-18.19）。婴儿乙肝疫苗首针、第二针和第三针的及时接种率分别为95.2%,93.8%和85.9%。婴儿抗-HBs阳性率为77.1%,抗-HBs平均滴度为37.15 mIU/mL（95%CI：28.18-48.98）。结论：婴儿乙肝疫苗首针及时接种率较高,但三针全程及时接种率仍需提高。母亲抗-HBs阳性率较低,应当重视HBsAg阴性孕龄妇女的乙肝疫苗接种及乙肝标志物的检测,从而提高该人群的乙肝免疫水平。     

HPLC检测肠灌流模型中PMP衍生化葡寡糖含量的方法学建立

目的:建立肠灌流模型中1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化葡寡糖含量的检测方法,并进行方法学考察.方法:采用HPLC法测定,色谱条件为,色谱柱:phenomenex C18(250×4.60mm,51μm);流动相:100mMNaAc/乙腈(梯度洗脱);流速:1.0mL·min,-1;紫外检测波长245nm;进样量:20μL;柱温:40℃.结果:PMP衍生化葡寡糖在此色谱条件下获得良好分离,肠灌流液、血浆样品及酚红对10种化合物的检测均无影响.结论:该方法准确可靠,重复性良好,为寡糖的吸收研究提供了技术支持.