转HSSP基因大豆的分子检测和遗传稳定性分析

HSSP是用大豆密码子改造的10 kD玉米醇溶蛋白基因。在前期研究中,从获得的转基因大豆中筛选到1份单拷贝转基因材料GSDH5。该研究采用染色体步移法获取转基因大豆GSDH5的T-DNA插入位点的左边界旁侧序列,对获得的左边界旁侧序列进行分析,设计特异性引物,建立转基因大豆GSDH5特异性检测方法;采用Real-time PCR检测外源基因在转基因大豆不同组织部位(根、茎、叶、花和种子)中的表达量,采用RT-PCR和Western blot检测外源基因在转录和翻译水平上的遗传稳定性,并对转基因大豆GSDH5中的粗蛋白、含硫氨基酸含量及主要农艺性状进行测定分析,为培育高含硫氨基酸转基因大豆新品种奠定基础。结果表明:(1)分子鉴定显示,外源基因HSSP和筛选标记基因Bar成功整合到受体大豆‘东农50’基因组中,且以单拷贝的形式整合到大豆基因组中。(2)HSSP基因成功插入到大豆基因组1号染色体非编码区52 873 883 bp处。(3)HSSP基因在转基因大豆GSDH5的种子中特异性表达,且在T_2～T_4代转基因大豆中能够稳定遗传并表达。(4)‘东农50’粗蛋白含量在41.53%～43.32%之间,GSDH5粗蛋白含量在40.18%～43.03%之间,两者相比无显著差异;GSDH5种子中硫氨基酸占种子干样的比例为1.35%,占种子蛋白的比例为3.14%,与转基因受体品种‘东农50’相比,占比显著升高,分别增加了11%和16%。(5)转基因大豆GSDH5植株与受体品种‘东农50’在单株荚数、百粒重、株高、结荚习性、花色、叶形等方面均无显著差异,证明HSSP基因的插入对大豆植株的生长发育无不良影响。研究认为,转基因大豆GSDH5材料具备进一步培育成高含硫氨基酸大豆新品种的潜力。     

工业有机污染对小型水体沉积物真菌群落的影响分析

【背景】有机污染对水体沉积物中的微生物多样性影响极大,而目前有关污染水体沉积物中真菌多样性的研究较少。【目的】研究不同程度有机污染下水体沉积物中真菌种群的多样性特征,探究工业有机污染对真菌群落的影响。【方法】应用化学分析方法和高通量测序技术进行研究,并分析水质、沉积物成分等环境因子与沉积物真菌多样性的相关性。【结果】随着污染程度的降低,水体沉积物中真菌序列数、OTU数和Shannon多样性指数均呈上升趋势。未分类真菌、子囊菌门和担子菌门是沉积物真菌群落中的主要优势种类,主要优势属为Zopfiella、Westerdykella、Clypeosphaeria、Ilyonectria、Paracremonium、Aspergillus。真菌Shannon指数与水体溶解氧(dissolvedoxygen,DO)极显著正相关,与沉积物有机质和总磷含量显著负相关,Simpson指数与水体总氮(total nitrogen,TN)、氨氮(NH3-N)、总磷(total phosphorus,TP)显著相关。【结论】有机污染导致水体溶解氧下降和沉积物有机质增加,从而导致污染区真菌多样性显著下降。Zopfiella、Penicillium、Emericellopsis、Westerdykella、Jugulospora、Chromelosporium可能参与曝气处理区域沉积物兼氧条件下污染物的去除,Ilyonectria、Mortierella、Epicoccum可能主要参与水生生物残体分解、污染物的吸附沉降等过程。     

不同海拔高原适应相关肝脏功能与脂代谢变化

目的：分析高原移居者肝脏功能及血脂水平。方法：选择不同海拔高原移居者（平均10年以上）男性80名,无高血压及糖尿病病史。按高原会议订立标准分组：低海拔组（〈1500米）8例,中海拔组（1500-2500米）9例,高海拔组（2500-4500米）36例,特高海拔及以上组（〉4500米）9例,运输组（2700-4600米）18例。清晨抽取空腹静脉血5mL,Roche Modular PE全自动生化免疫分析仪检测肝脏功能及血脂水平。结果：高海拔移居者,总胆红素和直接胆红素升高,总胆固醇、低密度脂蛋白降低;特高海拔及以上移居者（〉4500米）,直接胆红素升高,总胆固醇、低密度脂蛋白、载脂蛋白B降低。结论：本文研究结果提示了,高原缺氧环境下,肝脏自身功能抗缺氧发生改变或高原饮食受限可引起肝脏功能变化,进而影响脂类代谢,是机体对长期乏氧状态的适应性改变。     

北京市6-13岁儿童维生素A营养水平及影响因素

目的：了解北京市6~13岁儿童维生素A营养水平及影响因素。方法：于2017年采用多阶段分层抽样对北京市982名6~13岁儿童进行调查,分析血清维生素A水平与食物种类、视黄醇活性当量摄入量、血生化指标、体格等指标的关联。结果：血清维生素A缺乏率和边缘缺乏率分别为0.10%、10.5%;膳食维生素A摄入量低于平均需要量的比例为71.6%（以视黄醇活性当量计）;血清维生素A水平与年龄、BMI、血红蛋白水平、铁蛋白水平、蔬菜摄入量存在显著正相关（P<0.05）,与超敏C反应蛋白存在显著负相关（P<0.05）。结论：北京市6~13岁儿童维生素A整体缺乏率较低,但仍有部分儿童处于边缘缺乏状态。膳食维生素A摄入量按视黄醇活性当量计算不能满足膳食营养素推荐供给量的风险高,蔬菜摄入量可能是血清维生素A水平的影响因素之一。     

光照时间对双尾新小绥螨生长发育及种群参数的影响

【目的】为了进一步明确光照时间对双尾新小绥螨Neoseiulus bicaudus Wainstein生长发育的影响。【方法】在实验室恒温条件下,采用生命表研究方法,研究在不同光照时间下,双尾新小绥螨捕食土耳其斯坦叶螨的生长发育情况。【结果】双尾新小绥螨在不同光照时间段下均能完成世代周期。在光照时数小于12 h时,从卵发育至成螨的各个发育阶段所需时间均呈缩短趋势,当光照时数大于16 h后各个发育阶段所需的时间又呈增长趋势。产卵期在12L︰12D光照时数下最长为20.74 d,且同其他光照条件均存在显著性差异(P<0.05)。产卵后期、寿命、总产卵量均表现在16L︰8D光照时数下最长,分别为11.93 d、31.05 d和42.4粒。双尾新小绥螨种群的净增值率(R_0)在16L︰8D时达到最大值33.88,在8L︰16D时最低为14.97。【结论】光照时间在12~16 h范围内最适合双尾新小绥螨生长发育。     

糖类抗原153在恶性肿瘤中的诊断价值

目的:采用电化学免疫发光法探讨糖类抗原153在不同恶性肿瘤诊断中的应用价值。方法:回顾性分析CA153对807例恶性肿瘤患者的诊断价值,包括胰腺癌162例、结肠癌101例、胃癌139例、肺癌131例、乳腺癌101例、宫颈癌65例和前列腺癌108例。结果:与健康对照组比较,糖类抗原153在7种肿瘤中的含量均有显著性升高。与乳腺癌组相比,除肺癌组异常率无统计学差异外,其余各组均有统计学差异。CA153对于乳腺癌的诊断价值最高,灵敏性和特异性分别为70.4%和56.7%。结论:血清CA153水平的检测对恶性肿瘤的诊断具有一定的临床应用价值,但其灵敏性和特异性均不高,证明单一标志物对于肿瘤的诊断价值有限。     

高通量检测大样本桑黄发酵液总黄酮含量方法的建立北大核心CSCD

建立了大样本的桑黄发酵液样品中总黄酮的高通量测定方法。通过L9（3^4）正交实验设计优化,确定了基于亚硝酸钠．硝酸铝比色法的微孔板检测方法,优化后总黄酮含量测定的最佳反应条件：5％亚硝酸钠30μL,10％硝酸铝30μL,10％氢氧化钠50μL,室温反应10min,检测波长为510nm。检测结果表明,针对大样本检测,该法稳定性高,平均回收率为100．7％,相对标准偏差为0．607％,线性范围为0—50μg／mL,线性相关系数r^2=0．9994。比较分析结果显示,和多种传统总黄酮测定方法相比,实验所建立的高通量测定方法检测大样本快速、准确、用药量小,且稳定性高。     

糙皮侧耳脲酶基因的克隆和原核表达分析

尿素是现代农业生产中应用较为广泛的一种氮素化肥,而脲酶（EC 3.5.1.5）是尿素分解利用的关键酶。本文以糙皮侧耳Pleurotus ostreatus栽培菌株New 831为试验材料,探究了糙皮侧耳对尿素的利用情况,结果表明：糙皮侧耳可利用尿素作为唯一氮源,平板培养时尿素最适添加量为20mmol/L;在液体摇瓶培养过程中,培养液中的铵根浓度表现为先急剧升高后缓慢降低。通过对P. ostreatus PC15菌株基因组分析,获得了一个功能注释为脲酶的基因,并克隆获得了其全长基因组DNA（gDNA）和编码区（CDS）片段,命名为Pourease。结果表明：Pourease基因的gDNA和CDS长度分别为3 003bp和2 517bp,由10个外显子和9个内含子组成;Pourease蛋白由838个氨基酸组成,预测分子量为90.03kDa,与SDS-PAGE分析结果相符;Pourease蛋白与细菌、真菌和植物来源的脲酶具有52%-82%的一致性,且含有脲酶保守的镍离子结合位点;与洋刀豆脲酶空间结构类似,Pourease蛋白也以同源三聚体的形式存在。     

湘潭锰矿区植物资源调查及超富集植物筛选

通过设置样地,对湘潭锰矿区的植物资源进行了全面调查。结果表明:锰矿区植物丰富,共有28科,53种,植物以自然定居种为主,少见人工栽培种;生活史以多年生植物为主,少见1年生植物。群落结构上,以草灌丛为主,少见乔木种;当前锰矿区形成的以多年生草灌丛为主的局部群落,是原锰矿区植被在开采中被彻底破坏后,处在逐步向亚热带常绿阔叶林演替的一种初级阶段;其次,对矿区植物锰富集能力进行的分析表明,植物各组织(根、茎、叶)之间锰富集量差异明显,大部分物种地下部分锰含量大于地上部分,表现出一般植物的共性,只有少部分植物地上部分锰含量大于地下部分,表现出其特殊性;此外,植物种之间富集锰能力差异显著;莎草地上与地下部分锰含量均大于超富集植物10000mg.kg-1的临界浓度且富集系数与转移系数均大于1的超富集植物评价标准,表明其具有超强的富集锰能力。调查还发现,位于中-高锰矿区莎草生物量高达507.06g.m-2,符合超富集植物应具有较高生物量的标准。可见,莎草可作为中-高锰污染区生态修复的首先超富集植物种。