硒对NO诱导的内皮细胞内游离钙离子浓度变化的影响

用Fura-2显微荧光测钙技术,研究了用外源性一氧化氮（NO）供体S-亚硝基谷胱甘肽（GSNO）诱导的,人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞胞内游离钙离子浓度（［Ca²⁺］_i ）升高以及硒的抑制效应.结果表明,GSNO作用于ECV-304细胞,短时间内即可导致其胞内游离钙离子浓度升高.胞外液换为无钙液或向胞外液中加入CdCl₂（1 mmol/L）对GSNO引起的［Ca²⁺］_i升高无影响.提示,GSNO刺激主要引起胞内钙库释放.而且,一氧化氮清除剂血红蛋白（Hb）对这一过程有抑制作用,说明GSNO引起的胞内钙库释放由NO介导.经亚硒酸钠（1 μmol/L）处理的细胞,其NO引起的［Ca²⁺］_i升高幅度明显被抑制,说明NO的这种作用可能与细胞的氧化还原状态有关.     

化疗对肠道菌群及血清5-羟色胺水平的影响

化疗不仅导致肠黏膜炎和5-羟色胺(5-HT)水平的异常,也会诱发肠道菌群失衡。平衡状态下的微生物是一道生物屏障,菌群失衡可加剧肠道炎症。近期研究发现,5-HT的水平受肠道菌群的调节。因此,化疗引起的5-HT水平改变可能与肠道菌群的异常有关。本研究主要探讨肠道菌群通过何种途径影响化疗后肠黏膜炎和5-HT水平,为临床上以益生菌调节肠道菌群来改善化疗后的胃肠道反应提供依据。     

短乳杆菌DM9218肌苷水解酶基因的异源表达及活性检测

目的探讨短乳杆菌DM9218肌苷水解酶基因A0008的异源表达及其对肌苷的分解活性检测。方法克隆来源于短乳杆菌DM9218基因组的肌苷水解酶基因A0008,构建原核表达载体,转入大肠埃希菌BL21诱导重组蛋白表达并纯化,进行体外酶活检测。结果成功构建了肌苷水解酶A0008-pET28a原核表达载体,表达并纯化出重组蛋白,酶活结果显示该重组蛋白具有水解肌苷的能力。结论短乳杆菌DM9218基因A0008可能编码肌苷水解酶并参与DM9218对肌苷的分解。     

短乳杆菌DM9218核苷酸代谢过程中的蛋白组学分析

目的探讨短乳杆菌DM9218在核苷酸代谢过程中的蛋白表达差异。方法分别提取DM9218菌株与底物(肌苷+鸟苷)反应前后的菌体蛋白,利用蛋白双向凝胶电泳(2-DE)技术,找出该菌株与底物反应前后的差异蛋白质点,选取其中差异变化较大的蛋白点进一步做蛋白质谱分析。结果 2-DE分析显示两样品蛋白点主要分布在等电点4~9和分子量11~90 kD范围内,将所得的蛋白点结合其蛋白得率、浓度、储存蛋白含量进行比较,得到匹配的蛋白点数为732个。从中选取14个差异显著的蛋白点进行质谱分析,质谱结果显示所选取蛋白质点主要与物质代谢、能量转换及基因水平转录和翻译等生物学功能密切相关。结论本研究为后期分析研究短乳杆菌DM9218在核苷酸代谢过程中蛋白的表达奠定了基础。     

饮酒对肠道微生态的影响研究

肠道微生态是肠道菌群和宿主相互作用共同构成的一个整体,与宿主的生长发育、物质代谢和衰老等有密切的关系。已报道的饮酒保健功能,多从药理学的角度评价,具有抗氧化、清除活性氧自由基、抗肿瘤、阻断致癌物的形成和抑制机体内的代谢转化、提高机体的免疫力、抗菌、抗病毒等功能。但缺乏饮酒与肠道微生态关系的研究,本综述主要论述饮酒与肠道微生态之间的关系。     

白色念珠菌磷脂酶活性与其毒力因子关系的研究

目的 探讨白色念珠菌磷脂酶活性与其毒力因子之间的关系以及与其遗传特征的相关性.方法 蛋黄平板法检测80株白色念珠菌磷脂酶活性,并测定磷脂酶高活性组、低活性组白色念珠菌的溶血活性、细胞表面疏水性、黏附上皮细胞能力及RAPD-PCR分析2组菌株的基因型特征.结果 磷脂酶阳性检出率为97.5%,2组PZ均值分别为0.639±0.043、0.847±0.079(P<0.05);2组的溶血活性、疏水率差异均无显著性(P>0.05),而磷脂酶高活性组菌株对上皮细胞的黏附力显著高于磷脂酶低活性组(P<0.05),磷脂酶活性与黏附力呈正相关(r=0.773,P<0.01).RAPD结果 表明磷脂酶活性与RAPD各电泳条带之间的回归系数不尽相同.结论 磷脂酶活性不能直接反应菌株其他毒力的情况,且RAPD分型也不能全面地反映磷脂酶这一单一的毒力特征,而是对菌株毒力特征的一个综合反映.     

5-羟色胺与Toll样受体及肠道菌群之间关系的研究

5-羟色胺(5-HT)是参与调节胃肠道运动、内脏敏感性、分泌等功能的重要神经递质和信号分子。肠道菌群对5-HT的产生有重要影响,已发现一些产芽孢细菌(spore-forming bacteria,SP)类肠道微生物能刺激肠嗜铬细胞(enterochromaffin cell,EC)产生5-HT。微生物通过Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)激活神经分泌机制来调节胃肠运动,某些TLR通过作用于5-HT受体调节小鼠回肠的自主收缩和5-HT诱导的收缩反应。通过调节肠道菌群可以对5-HT综合征及其相关生理和病理状况产生重要影响。因此,对5-HT与TLR及肠道菌群相互之间的关系进行进一步的研究有重要意义。     

南瓜未授粉子房培养形成再生植株的研究

以‘贵阳小青瓜’(南瓜)未授粉子房为外植体,在离体条件下研究热激时间和TDZ浓度对胚状体诱导的影响。进一步优化试验步骤,探讨直接获得形成再生植株的方法,加速育种进程。结果表明:35℃高温黑暗培养5d后转入25℃光照培养90d能直接形成再生植株;培养基中附加TDZ浓度在0.04~0.06mg/L能诱导离体子房直接产生再生植株,并以0.06mg/L诱导效果最好,出胚率为22.57%,植株再生率为14.30%。     

肠道菌群对肠黏膜T淋巴细胞亚群的调节作用

肠道菌群在肠道免疫稳态中起到了至关重要的作用。大量研究表明肠道菌群通过调节T淋巴细胞亚群的增殖、分化和T细胞亚群分泌不同的细胞因子,可以改变肠道免疫系统的状态。本研究综述了肠道微生物对主要T淋巴细胞亚群的调节作用。     

短乳杆菌DM9218对高果糖饮食诱导的 高尿酸血症的缓解作用及机制研究

摘要：目的 探讨短乳杆菌DM9218对高果糖饮食诱导的高尿酸血症的缓解作用及可能机制。方法 4~6周龄SPF级Balb/c雌鼠随机分为3组（每组15只）,分别为正常对照组（Control）、高果糖饮水组（HF）、高果糖饮水+益生菌干预组（Probiotic）。高果糖组和益生菌干预组每天给予15%（w/v）果糖水自由饮用;益生菌干预组在果糖饮用的同时每天以0.2 mL/只（1×109 CFU/kg）短乳杆菌DM9218灌胃,对照组和高果糖组予以0.2 mL/只的PBS灌胃处理。采用酶标仪比色法检测各组血清中血糖（Glu）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血尿酸（UA）水平;ELISA法检测小鼠肝组织匀浆上清液中内毒素（LPS）、干扰素α（IFN-α）、肌苷（Inosine）水平及黄嘌呤氧化酶（XOD）浓度、活性;Q-PCR法检测XOD mRNA的表达变化。结果 HF组Glu、TG、TC、UA水平均明显高于Control组（P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01）,Probiotic组血清UA水平显著低于HF组（P<0.01）;HF组肝脏LPS、IFN-α、Inosine水平及XOD浓度、活性显著高于Control组（P均<0.01）,Probiotic组与HF组相比LPS、IFN-α、Inosine水平及XOD浓度、活性有明显下降趋势,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05）;HF组XOD mRNA的相对表达量显著高于Control组（P<0.01）,Probiotic组与HF组相比有下降趋势,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论 短乳杆菌DM9128一方面可以改善肠屏障功能降低LPS水平,从而缓解XOD的表达及活性;另一方面经由“肝?肠循环”直接降解肌苷,从而影响血清UA的水平。