表皮生长因子的发光免疫测定法——吖啶酯标记抗体的应用

介绍了吖啶酯标记抗体应用于表皮生长因子的发光免疫测定法.吖啶酯类发光剂标记抗体的优点是标记方法简便、抗体用量少、发光强度大.所述方法其标准曲线范围是400pg/ml—25ng/ml.表皮生长因子浓度与发光值之间的线性关系良好.批内及批间变异系数分别为7.3%及11%.灵敏度与使用 ¹²⁵I 标记同一抗体的放免法同属 pg 水平.加入保护剂低温保存,使标记物的使用期由原来的1个月延长到6个月.     

神经生长因子结构与功能研究进展

神经生长因子(NGF)是神经营养因子家族的典型代表, 它控制着脊椎动物周围和中枢神经系统中部分神经元的发育和存活.NGF的三维结构是以“胱氨酸结”和β折叠为基础,它以二聚体的形式结合细胞表面的受体从而发生生物学效应.参与这些反应的氨基酸残基已通过化学修饰和定点突变法加以确定,这有助于更进一步理解其结构与功能的关系.     

三种双季铵化合物对乙酰胆碱酯酶梭曼膦酰化和老化的影响

本文研究了六甲溴铵(C_6)、十甲溴铵(C_(10))和百草枯(paraquat或PQ)对电鳐电器官乙酰胆碱酯酶的作用。C_6是酶的完全竞争性抑制剂,它对梭曼膦酰化酶的老化反应有明显的延缓作用;C_(10)对酶的抑制分为两相,A相为完全竞争性抑制,B相为混合型抑制,它对老化只有轻微的延缓作用;PQ为酶的激活剂,而它对老化几乎无影响。概据这些结果可以设想,酶的活性区域的阴离子部位在梭曼膦酰化乙酰胆碱酯酶的老化中起重要作用。     

组织型纤溶酶原激活剂的发光分析法及其应用

 本文建立了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)活力的发光固相测定方法。用氨基乙基丁基异鲁米诺(ABEI)标记纤维蛋白原(Fg),在一定条件下,t-PA作用于固相(包被ABEI-Fg),产生纤维蛋白的降解产物。测定可溶性降解产物的发光强度,即能计算t-PA活性。该方法的标准曲线范围对t-PA为0.156IU/mL～40IU/mL。灵敏度可达0.156IU/mL。回收率为98.6％(n=27)。批内批间变异系数分别为6.6％及10.3％。该方法曾用于检测细胞培养液中提取t-PA样品及t-PA基因表达时培养液中t-PA的活性。也曾用于检测从组织中纯化t-PA样品及血浆中t-PA活性的测定。文中讨论了该方法与其它方法优缺点的比较。     

人CD14基因的克隆及序列测定

采用PCR技术,从佛波酯乙醇刺激的HL-60细胞基因组DNA中扩增获得了1.1 kb的人CD14基因.序列分析表明,有四个碱基发生了突变,其中两处为首次报道.     

哺乳类细胞基因表达系统

真核基因的转录和转译调控是哺乳类细胞基因表达系统建立和发展的基础,外源基因的表达水平不仅决定于启动子/增强子的强弱,还与剪接信号、终止信号和poly(A)信号以及质粒的拷贝数等因素有关。另外,在基因治疗的研究中,也已寻找到多种具有组织或肿瘤特异性的启动子,来达到特异性肿瘤基因治疗的目的。     

重组人骨形态发生蛋白-2生物学活性测定新方法的建立

目的:采用小鼠异位成骨技术及甲基麝香草酚蓝比色法检测重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的生物学活性。方法:将rhBMP-2埋入小鼠肌间隙内,14d后取出新生组织,采用血清钙试剂盒检测其钙含量。结果:随着给药组剂量递增,相应地钙含量也增加,二者具有较强的量效关系。结论:此方法为本实验室独创,较传统的血清碱性磷酸酶方法更为方便、快捷,是一种能够定量检测rhBMP-2活性的新方法。     

鲑鱼降钙素基因在大肠杆菌中的克隆与表达

降钙素(calcitonin,CT)是一种含有32个氨基酸残基的多肽激素,在体内参与钙磷的代谢,促进钙在骨中的沉淀,从而使血钙减少。CT广泛应用于治疗Paget氏疾病以及各种高血钙症,尤其在骨质疏松症的预防及治疗方面具有显著疗效。在不同种属来源的降钙素中,鲑鱼的活性最高,且降钙素的种属特异性很低,故可以用鲑鱼降钙素(sCT)来治疗人类的疾病。天然鲑鱼降钙素来源有限,化学合成成本昂贵,采用     

酵母细胞分裂周期突变株中磷酸化蛋白的变化

最近对酵母细胞腺苷酸环化酶和依赖于cAMP的蛋白激酶基因的分子生物学研究,说明磷酸化蛋白在细胞周期中有重要作用。本文用聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了酵母细胞分裂周期突变株中蛋白质的磷酸化。依赖cAMP的突变株AM18生长在无cAMP的培基中时,发生了几种磷酸化蛋白的变化,最明显的是分子量为72K Da的蛋白的积聚。细胞分裂周期温度敏感突变株cdc35生长在高于允许温度对,以及野生株生长在稳定期时,也出现类似现象。在这三种情况下,72K Da磷酸化蛋白同时还具有相同的pI值(pI=4.7),磷酸化都发生在苏氨酸残基上,用蛋白酶部分水解法证明它们有相似的肽谱。这些结果说明它们为同一蛋白。