鼠组织中汉坦病毒RNA的检测

<正>流行性出血热广泛流行于欧亚大陆某些地区,尤其是中国,每年约有10万病例发生,过去诊断主要靠皿清学试验检测确定,汉坦病毒常规系自实验动物和细胞培养物中分离,存在严重的生物危险性,将RT和PCR结合使用的RT-PCR(直接逆转录酶多聚酶链反应)改良法系一快速而又高度敏感的方法为出血热的诊断提供了切实可行的途径。     

不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖产量的影响

目的 探索不同酸水解酪蛋白对W135群与Y群脑膜炎奈瑟菌(脑膜炎球菌)荚膜多糖产量的影响。方法 分别以NaCl质量分数为37%和14%的酸水解酪蛋白作为有机氮源配制改良半综合高盐培养基和低盐培养基,利用全自动细菌发酵罐分别在两种培养基里培养W135群和Y群脑膜炎球菌,比较这两种菌株在两种培养基中的生长时间、收获液菌密度( A 600 nm 值)、收获液去菌体后与去复合多糖后上清中的荚膜多糖含量,以及纯化后的精糖产量;比较高盐培养基收获液及其2倍稀释液中不同终含量的十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide, CTAB)溶液对多糖沉淀效果的影响。结果 W135群与Y群脑膜炎球菌在两种培养基中的培养时间差异无统计学意义( P >0.05),但高盐培养基收获液的菌密度、收获液去菌体后上清液中的多糖含量均高于低盐培养基收获液,差异有统计学意义( P < 0.05),而高盐培养基收获液纯化后的精糖产量低于低盐培养基,差异有统计学意义( P <0.05)。高盐培养液2倍稀释后,在CTAB终体积分数为0.04%时,W135群与Y群脑膜炎球菌多糖全部沉淀,而未稀释高盐培养液即使CTAB终体积分数提高到0.14%,依然也不能完全沉淀 W135群与Y群脑膜炎球菌多糖。结论 不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎球菌的生长密度和荚膜多糖产量有影响,用CTAB溶液沉淀荚膜多糖时需控制收获液盐含量。     

5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的不同糖蛋白比与免疫原性的关系

实验中比较了以不同糖蛋白比结合的5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的免疫原性。以氨还原法制备的不同糖蛋白比的5型多糖结合疫苗分别经腹腔注射NIH小鼠,共免疫3次,间隔2周。末次免疫2周后采血分离血清,以间接ELISA测定血清抗体,t检验统计分析数据。结果显示,生理盐水组(R组)无免疫原性;5型荚膜多糖组(H组)免疫原性低,无免疫加强效应;结合疫苗M组、N组第1、2针有免疫加强效应,第2、3针无免疫加强效应,而F组和Q组的两针次间均有明显的免疫加强效应。说明5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的糖与蛋白比较高时能获得较好的免疫原性。     

RSV疫苗侯选株的安全与免疫原性

依据糖蛋白的不同,呼吸道合胞病毒(RSV)分A、B两个亚群,理想的疫苗应能同时抗A、B两个亚群。BBG2Na来源于RSV-A的G蛋白部分,是一个重组亚单位RSV疫苗侯选株。有趣的是,用明矾配制的BBG2Na在接种小鼠后初期能抗RSV-B的攻击。     

神经生长因子制备工艺的改进及有关问题的讨论

为了达到规模化生产的目的 ,本文在神经生长因子制备工艺前增加了去脂处理 ,省略了CM (I)柱前的透析 ,并对影响生产收量的因素进行了探讨 ,使实验室结果得以有效放大 ,每 2 0 0 0对鼠颌下腺可提取蛋白 91mg ,总活性达 6 9× 10 7Bu。     

应用单克隆抗体ELISA检测淋球菌

利用抗淋球菌外膜蛋白的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）制备的淋球菌酶免疫试剂（ＧＯＮＯ－ＥＩＡ）检测实验室已知淋球菌的阳性低限值菌数为６．２５×１０~４／ｍｌ。对脑膜炎奈瑟氏菌、微黄色奈瑟氏菌、卡它布兰汉氏球菌、大肠埃希氏菌、绿脓杆菌和乳酸杆菌等无交叉反应。检测临床生殖泌尿系统标本４８４例,以淋球菌培养法对比,ＧＯＮＯ－ＥＩＡ的敏感性为８１．４３％,特异性为９４．９２％,,总符合率为９２．９７％。ＧＯＮＯ－ＥＩＡ方法简便,快速,整个实验不超过１２０分钟,是适用于临床实验诊断的理想方法。     

利用流式细胞术测定CTL活性方法在EIAV免疫学中的应用

利用PKH-26和CFSE两种荧光染料对靶细胞染色,建立了一种通过流式细胞术进行马传染性贫血症病毒 (Equine infectious anemia virus,EIAV)抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)反应的 新方法,避免了经典的Cr51释放法对检测人员的放射线威胁,降低了本底释放,提高了检测的灵敏度。将该检测方 法用于检测EIAV疫苗毒接种马和嵌合克隆接种马的细胞免疫反应变化趋势,数据显示细胞免疫反应在接种后3 个月达到成熟阶段而后保持在较高的反应水平。该方法的成功建立和应用为研究EIAV减毒疫苗的免疫机制提 供了好的研究手段,也为其他病毒的免疫学研究提供了新的参考方法。     

物化与免疫化学技术预测白喉类毒素质量

制备白喉类毒素疫苗最关键的步骤是甲醛脱毒。白喉类毒素(DTx)的脱毒过程通过毒素发生的部分未知化学改变来实现。因此白喉疫苗很难完全确定特性,类毒素质量也只能用常规效力与安全实验测定。本文描述了选择物理化学与免疫化学试验以替代原有体内试验监测白喉类毒素疫苗产品质量的可能性。