先天性巨结肠病NOS阳性神经和VIP能神经的异常改变──酶组织化学与免疫组织化学联合法的研究

本文应用还原型辅酶Ⅱ（ＮＡＤＰＨ－Ｏ）－黄递酶组织化学和血管活性肠肽（ＶＩＰ）的免疫组织化学联合染色法,对１０例先天性巨结肠病扩张段和狭窄段结肠及４例“正常对照”结肠进行观察,结果发现：（１）狭窄段结肠壁丛内均缺失含一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和ＶＩＰ神经元胞体。（２）狭窄段结肠肌层内ＮＯＳ和ＶＩＰ阳性纤维比“正常”结肠明显减少,酶活性或免疫反应性弱。结果表明,二种神经在病变肠段痉挛狭窄的神经病理机制诸因素中起重要作用。     

小强荧光细胞的组织化学及生理作用

小强荧光(SIF)细胞是指交感神经节内体积小、荧光强的颗粒细胞。近年来,不少学者用各种技术,如电镜、荧光组化、生化、电生理及药理学等,从不同角度对 SIF 细胞进行了多方面研究。现主要就 SIF 细胞的某些组织化学及生理作用概述如下。SIF 细胞这一概念,最早由 Er(?)nk(?)和 H(?)rk(?)nen 提出。当时,他们用甲醛诱发荧光方法,在显示大鼠颈上神经节内儿茶酚胺(CA)研究过程中,发现为特亮的黄色荧光性小细胞,故称为 SIF 细胞。随后有人报道,SIF 细胞不仅存于大鼠颈上神经节内,而且也出现在其它交感神经节以及其它种属动物的交感神经节内。但是,以后在文献记载上,对 SIF 细胞的定义比较混乱。有人根据肾上腺髓质内含去甲肾上腺素(NE)的嗜铬细胞也显出较强的甲醛诱发荧光,而且在人、兔、猫和狗的腹腔神经节内确实观察到有嗜铬反应的阳性细胞,     

先天性巨结肠病结肠壁内P物质能神经的免疫电镜观察

本研究应用电镜免疫细胞化学方法,对小儿先天性巨结肠病结肠壁内含Ｐ物质（ＳＰ）神经进行了观察。结果发现：狭窄段与结肠扩张段相比较,狭窄段含ＳＰ神经元缺失,神经终末减少,含无颗粒囊泡的神经终末增多,而含小颗粒囊泡的神经终末相对较少。本研究在超微结构水平为先天性巨结肠病结肠壁内肽能神经成份的改变及其与临床症状的可能关系提供了形态学证据。     

慢性炎症痛引起DRG感觉神经元P2X3受体表达的改变

目的探讨脊髓背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）P2X3受体参与大鼠足底慢性炎症痛相关的热痛觉过敏机制。方法 1）用行为学的研究方法,以大鼠右侧后脚掌注射松节油加石蜡（各占50％）0．1ml建立后脚掌慢性痛模型,用热测痛的方法测量后脚掌皮下注射松节油后的痛阈,每天1次,连续测15d。2）用免疫组织化学技术观察大鼠后脚掌慢性炎症后第2天和第7天,炎症侧脊髓背根神经节（L4—6）神经元中P2X,受体阳性细胞类型的分布变化;以及正常脊髓背根神经节（L4—6）神经元中P2X,受体阳性细胞类型的分布作为对照。结果1）炎症后大鼠后脚掌侧痛阈出现降低,在第2天痛阈达到最低,后逐渐恢复,14d后恢复正常痛阈值。2）正常大鼠P2X,主要表达于DRG的中小神经元上,炎症后DRG（L4—6）,中小型P2X,受体阳性细胞数比对照组明显增加。细胞平均面积增大。结论后脚掌慢性炎症痛可以引起大鼠对伤害性热刺激的痛觉过敏,并导致脊髓背根神经节（L4—6）神经元qbP2X3受体阳性细胞数目增加,表明P2X3在DRG的中小神经元的改变可能对松节油引起脚掌炎症痛时热痛觉过敏的形成与维持起重要作用。     

大鼠初级感觉神经元P2X3受体的表达及其与SP的关系

目的研究在大鼠初级感觉神经元细胞上P2X3受体的表达情况及其与P物质的关系。方法取SD大鼠背根神经节(DRG)和三叉神经节(TG)固定后切片;用抗P2X3受体抗体和抗SP抗体进行免疫组织化学反应,并通过两种不同的显色方法同时进行P2X3受体和SP的双标。结果P2X3免疫反应阳性细胞主要集中在小细胞和中等细胞(其中在TG,P2X3-ir阳性神经元约占整个细胞的24.8%;在DRG约31.7%的神经元是P2X3-ir阳性),并且在DRG和TG细胞上均存在有P2X3受体和SP共存(TG上的双标细胞占P2X3-ir阳性细胞总数的36.26%,DRG上占46.81%)。结论由于ATP门控阳离子通道受体P2X3本身就与伤害性感受的初级传入有关,而它与SP的共存可提示当组织中的ATP释放时可以通过P2X3受体作用于含SP的伤害性感觉神经末梢上,促使SP释放引起痛觉过敏。     

大鼠小肠移植后一氧化氮合酶组织化学观察

监测大鼠小肠移植后一氧化氮合酶的变化与排斥反应的关系以及肝小肠联合移植与单纯小肠移植后的变化异同。两组移植后分别于１、３、７……天同时取肠壁病理和组织化学标本对比,病理为常规ＨＥ染色观察, 一氧化氮合酶（ＮＯＳ） 组织化学检查按Ｄａｗ ｓｏｎ 方法显示其活性。结果两组肠壁ＮＯＳ的活性随移植后排斥反应加重而降低或消失, 单纯小肠移植比肝小肠联合移植变化明显。大鼠小肠移植后肠壁内ＮＯＳ变化与排斥反应相关, ＮＯ 可以作为小肠移植后监测排斥反应的参考指标之一     

丹参酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内白介素1β和白介素6 mRNA表达的影响

目的探讨丹参酮(tanshinone, Tan)抗β-淀粉样肽神经元毒性的分子机制.方法应用凝聚态β-淀粉样肽1-40片段(amyloid β-peptide1-40, Aβ1-40)在大鼠双侧海马齿状回背侧细胞带进行微量注射以建立拟人类阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)样动物模型;采用明暗箱被动回避法、穿梭法测试学习记忆功能;用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定海马内白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)mRNA含量;以丹参酮(tanshinone, Tan)(50mg/ kg)对Aβ1-40处理的大鼠连续灌胃14d,观察其干预效果.结果海马内注射Aβ1-40 14 d后,经行为学检测大鼠学习记忆功能明显减退,海马内IL-1β和IL-6 mRNA表达均显著高于对照组(P< 0.01);Tan(50mg/ kg)连续灌胃14 d能显著抑制大鼠学习记忆功能的减退和上述病理变化.结论 Tan对Aβ1-40诱导的大鼠学习记忆功能障碍具有显著改善作用,并能有效地抑制其海马内IL-1β和IL-6 mRNA的升高,这可能为Tan治疗AD样大鼠的分子机制.     

狗和大鼠回肠壁丛内5－羟色胺能神经元免疫组织化学观察

狗和大鼠回肠壁丛内５－羟色胺能神经元免疫组织化学观察邓成国,李林,林传友,殷光甫,茹立强（同济医科大学神经生物学教研室,武汉４３００３０）应用５－羟色胺（５－ＨＴ）抗体的免疫组织化学改良ＰＡＰ法对正常小狗（２只）回肠切片标本,正常大鼠（８只）和５－羟...     

大鼠脊神经节内交感神经支配的荧光组织化学与HRP示踪观察

本研究应用乙醛酸诱发儿茶酚胺（ＣＡ）荧光技术观察大鼠肾上腺素（ＮＡ）能神经在脊神经节内的分布;并应用ＨＲＰ顺、逆行追踪技术对脊神经节内ＮＡ能神经纤维的起源及其与脊神经节神经元的关系进行了探讨。荧光组织化学观察发现、有些神经节神经元胞体周围分布有带膨体的ＮＡ能神经末梢;有的紧密围绕脊神经节细胞——卫星细胞复合体。颈上交感神经节内注射霍乱毒素Ｂ亚单位结合ＨＲＰ（ＣＢ┐ＨＲＰ）,在同侧Ｃ３～６节段脊神经节内可见标记的点状纤维末梢紧邻于节细胞旁。Ｔ１１～Ｌ２节段脊神经节内注射ＨＲＰ后,在同侧椎旁交感链（Ｔ９～Ｌ１）内可见标记的交感节后神经元胞体。上述实验结果表明,交感节后神经元发出节后纤维可直接到达脊神经节内,与节细胞发生接触。本研究提示、交感神经在脊神经节水平可能参与躯体初级传入信息的调制