结晶半夏蛋白在6M 盐酸胍中的可逆变性

前文——“半夏蛋白的分离、结晶、生物活力和一些化学性质”中已报道,半夏蛋白经变性剂处理后解聚成为亚基。结晶半夏蛋白经6M 盐酸胍变性后,用分步透析法,即用缓冲液等体积递减稀释变性剂,最终“恢复半夏蛋白”于生理盐水中平衡,去除变性剂,可以重新天然化。去除胍的“恢复半夏蛋白”,分子大小、亚基结构和肽链构型不变,完全恢复其在小白鼠中抑制早期妊娠的活力,并能在天然半夏蛋白相同的结晶条件下再结晶。     

半夏蛋白变性过程的圆二色性研究

测定了半夏蛋白的紫外圆二色谱,远紫外谱显示不常见的单一的226nm负峰,[θ]_(226)=-4.42×10~3度·厘米~2/分克分子;近紫外谱给出295nm 及286nm 的正峰,248nm 的负峰,265～280nm 的宽峰。这些CD 峰的峰值因加入胍而降低,降低过程相互间大体平行,[θ]对胍浓度曲线的转折点都在2.75M 胍左右,与一般蛋白质相同。还测定了6M 胍中变性的半夏蛋白的重天然化过程,发现分两个过程,一快一慢。慢过程的一级反应速度常数是0.144分~(-1),快过程的是3.57分~(-1)。     

结晶半夏蛋白在6M盐酸胍中的可逆变性

前文——“半夏蛋白的分离、结晶、生物活力和一些化学性质”中已报道,半夏蛋白经变性剂处理后解聚成为亚基。结晶半夏蛋白经6M盐酸胍变性后,用分步透析法,即用缓冲液等体积递减稀释变性剂,最终“恢复半夏蛋白”于生理盐水中平衡,去除变性剂,可以重新天然化。去除胍的“恢复半夏蛋白”,分子大小、亚基结构和肽链构型不变,完全恢复其在小白鼠中抑制早期妊娠的活力,并能在天然半夏蛋白相同的结晶条件下再结晶。     

半夏蛋白变性过程的圆二色性研究

测定了半夏蛋白的紫外圆二色谱,远紫外谱显示不常见的单一的226nm负峰,[θ]_(220)=-4.42×10~3度·厘米~2/分克分子;近紫外谱给出295nm及286nm的正峰,248nm的负峰,265～280nm的宽蜂。这些CD蜂的蜂值因加入胍而降低,降低过程相互间大体平行,[θ]对胍浓度曲线的转折点都在2.75M胍左右,与一般蛋白质相同。还测定了6M胍中变性的半夏蛋白的重天然化过程,发现分两个过程,一快一慢。慢过程的一级反应速度常数是0.144分~(-1),快过程的是3.57分~(-1)。