铜绿假单胞菌PAO1 ku基因缺失菌株的构建及其对生物被膜耐药性的影响

【背景】铜绿假单胞菌是常见的条件致病菌,易形成生物被膜,具有基因突变率高、耐药性强的特点。非同源末端连接是DNA双链断裂的主要修复途径之一,修复过程会导致DNA突变产生。【目的】研究非同源末端连接对生物被膜中的铜绿假单胞菌基因突变率和耐药性的影响。【方法】通过基因无痕敲除的方法构建PAO1菌株的ku基因缺失突变株Δku并构建其回补株。对比研究突变株和野生菌株生物被膜形成能力、生物被膜状态下各菌的基因突变率以及对抗生素的耐受性。通过荧光定量PCR检测生物被膜中PAO1菌株ku基因的表达水平。【结果】各突变株生物被膜形成能力无显著差异;与野生菌株相比,突变株Δku在生物被膜中的基因突变率以及对环丙沙星和庆大霉素的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)下降。荧光定量PCR结果表明,ku基因在生物被膜形成早期转录水平有明显上调。【结论】非同源末端连接修复途径对生物被膜中的铜绿假单胞菌基因突变率以及耐药性的提高有一定的作用。本研究将为后续进一步阐释铜绿假单胞菌耐药产生机制提供一定的理论依据。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测结果分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)的临床分布及耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 采用VITEK-2全自动微生物鉴定/药敏分析系统对细菌进行菌株鉴定及药敏分析,对产ESBLs的ECO和KPN的临床分布与耐药结果用WHONET 5.4软件进行统计分析,应用SPSS 11.5软件进行卡方检验.结果 1955株菌中共检出产ESBLs菌916株,检出率为46.9％,其中EC0 570株,检出率为58.9％,KPN 346株,检出率为35.0％,产ESBLs菌主要从痰液和尿液中检出,主要来自ICU、普外科和神经外科;产ESBLs菌对多种抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs菌,差异有统计学意义(P＜0.05),对哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦和亚胺培南较敏感.结论 产ESBLs菌株所致的感染以泌尿道感染和呼吸道感染为主,且呈多重耐药性,临床上要重视对产ESBLs菌株的检测和细菌耐药监测,有效控制产ESBLs菌株的产生和流行.     

肠球菌属细菌的临床分布与耐药性分析

目的了解2012-2017年临床分离肠球菌的分布特征及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法采用全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验,对肠球菌的临床分布与耐药情况进行统计分析。结果共分离出1 432株肠球菌,其中粪肠球菌为603株(42.11%),屎肠球菌为596株(41.62%)。肠球菌属细菌标本来源以尿液、胆汁和全血为主,分别占39.66%、34.50%和11.59%,其中粪肠球菌主要来自普外科、泌尿外科和ICU,而屎肠球菌主要来自ICU、普外科和消化内科。肠球菌总体对红霉素的耐药率最高(67.81%),其次为四环素(47.49%)、环丙沙星(47.00%)和左旋氧氟沙星(46.44%),对利奈唑胺和万古霉素的耐药率较低,分别为4.89%和1.19%。粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀、四环素的耐药率分别为83.91%和64.01%,明显高于屎肠球菌(均P0.05)。屎肠球菌对红霉素、青霉素G、氨苄西林、喹诺酮类的耐药率均超过85.00%,且均高于粪肠球菌(均P0.05)。粪肠球菌和屎肠球菌对利奈唑胺的耐药率分别为6.80%和2.18%,对万古霉素的耐药率分别为0.66%和0.67%。结论肠球菌感染病原菌以粪肠球菌和屎肠球菌为主,肠球菌属细菌对万古霉素和利奈唑胺仍然保持较高的敏感性,不同种的肠球菌其耐药性差异显著。     

379株血培养病原菌的临床分布及耐药性分析

目的了解血培养病原菌种类、临床分布及耐药情况。方法对2008年6月至2009年6月的379株血培养病原菌及其药敏情况用WHONET5.4软件进行统计分析。结果 379株病原菌中,分离率从高到低依次是凝固酶阴性葡萄球菌(133/35.1%)、大肠埃希菌(44/11.6%)、肺炎克雷伯菌(32/8.4%)、鲍曼不动杆菌(30/7.9%)、铜绿假单胞菌(25/6.6%)、金黄色葡萄球菌(18/4.7%)、肠球菌(13/3.4%)和其他(75/22.2%)。这些菌株主要分布在ICU和普外科。药敏结果分析显示:革兰阳性球菌中,未发现利奈唑胺和万古霉素耐药株。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌对苯唑西林的耐药率分别为61.1%和89.5%;屎肠球菌对多数抗生素耐药率超过80%,粪肠球菌对青霉素类抗生素敏感性较高。革兰阴性杆菌中,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株比例分别为36.4%和31.3%,且发现2株耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌;鲍曼不动杆菌除对卡那霉素保持敏感外,对其他抗生素的耐药率为50%~100%;铜绿假单胞菌对头孢曲松的耐药率为100%,对其他β-内酰胺类抗生素、氨基糖苷类和喹诺酮类抗生素的耐药率相对较低。结论临床上应规范血培养标本留取方法以减少污染,加强细菌耐药监测、严格抗生素使用,以延缓细菌耐药情况的发生和发展。