利用米曲霉自身溶壁酶制备原生质体的研究

真菌原生质体融合作为生物工程的一种新技术,日益受到了人们广泛的重视,而制备原生质体则是原生质体融合的前提。各种真菌细胞壁的结构与化学组成不尽相同,因此制备不同种真菌的原生质体所要求的溶壁酶也有差异。曲霉制备原生质体一般可采用蜗牛酶,但米曲霉     

人类口腔菌的一个新属

牙周病是人类的一种常见病、多发病,其致病菌具有多样性和复杂性,有关该病的致病菌和病因学的研究,对防治工作具有重要意义。作者从牙周病患者的病灶处分离到了一株细菌（90-1）,并对其进行了鉴定,现将结果报告如下。     

蛹虫草原生质体紫外诱变选育胞外多糖高产菌株

蛹虫草是重要的药食兼用两用真菌,具有较高的医用及经济价值。本文通过单因素和正交试验的方法研究了不同酶系统、酶解温度、酶解时间、渗透压稳定剂、菌龄对蛹虫草原生质体形成的影响,并对蛹虫草原生质体进行紫外诱变,以生物量和胞外多糖产量为指标选育胞外多糖高产菌株。结果表明：在30℃、1％溶壁酶＋0．5％蜗牛酶＋0．5％纤维素酶条件下,以甘露醇为渗透压稳定剂对4日龄蛹虫草菌丝酶解2h,原生质体产量可达到9．2×10^6个/mL。从150株诱变株中筛选出1株最佳正诱变株,编号为44#,经深层培养其生物量比出发菌株提高10％,胞外多糖产量提高84．3％,继代培养10代后,遗传稳定性良好。     

四逆散对疲劳大鼠学习记忆及脑内GABA_B1表达的影响

目的：探讨四逆散对疲劳大鼠学习记忆及脑内GABA_B1受体的影响。方法：应用游泳训练和睡眠剥夺方法复制疲劳动物模型,运用Y-迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力,采用免疫组化方法检测大鼠脑内GABA_B1受体阳性反应物的变化。结果：模型组与正常组相比,大鼠Y-迷宫正确反应率明显下降,错误反应率明显升高,大鼠脑内GABA_B1的阳性反应物数目明显增多;中药治疗组与模型组相比,正确反应率明显升高,错误反应次数明显下降,脑内GABA_B1受体的阳性反应物数目明显减少。结论：四逆散对疲劳大鼠学习记忆能力的下降具有改善作用。     

基于NR2B基因探讨疏肝与补肾法对吗啡精神依赖的调节作用及机制

目的：探讨补肾法与舒肝法对大鼠吗啡精神依赖的调节作用及机制。方法：使用盐酸吗啡建立大鼠精神依赖模型（conditioned place preference,CPP）,采用Obersiver5．0行为学软件分析大鼠的CPP效应,并利用RealtimePCR方法测定伏核和前额叶皮质内NR2B亚基的mRNA含量。结果：与对照组相比,模型组大鼠在白侧累积停留时间极显著长于对照组（P〈0．01）,同时伏核与前额叶皮质中NR2B的mRNA水平也显著升高（P〈0．01和P〈0．05）;与模型组相比,补肾组和舒肝组大鼠在白侧的累积停留时间显著下调（P〈0．05）,疏肝组NR2B的mRNA也显著下降（P〈0．05）,而补肾组变化不显著。结论：①补肾法与舒肝法对吗啡引起的精神依赖均有调节作用。②舒肝法的作用机制可能在于通过影响伏核和前额叶皮质中NR2B亚基的mRNA表达进一步调节精神依赖的相关神经通路。③补肾法的作用机制与NR2B亚基的mRNA表达关系不密切,其调节的具体机制尚有待研究。     

疏肝补肾法对疲劳大鼠的学习和记忆力之影响

目的：探讨疏肝补肾法对疲劳大鼠学习和记忆力及对海马CA1区神经颗粒素（Neurogranin,Ng）的mRNA表达变化的影响。方法：成年雄性Spargue-Dawley大鼠36只,随机分为模型组（MG）、对照组（CG）、和疏肝补肾组（LK）。采用复合模型：运动疲劳模型与睡眠剥夺法造疲劳大鼠模型。运用Y迷宫进行学习和记忆力的测试。以Real-timePCR技术分析海马CA1区神经颗粒素的mRNA表达。结果：Y迷宫实验显示用药后大鼠的学习和记忆能力优于模型组,而疏肝补肾组大鼠在正确反应率、错误反应次数、达标所需训练次数和总反应时间皆与模型组有差异（分别为P〈0.01、P〈0.01、P〈0.05和P〈0.05）,其NgmRNA在海马CA1区的表达也显着高于模型组（P〈0.01）。结论：复合模型会造成大鼠学习和记忆能力受损。疏肝补肾法能显着影响疲劳大鼠的学习记忆能力及海马CA1区Ng的mRNA表达。     

四逆散对疲劳大鼠学习记忆及脑内GABA_B1 表达的影响

目的:探讨四逆散对疲劳大鼠学习记忆及脑内GABA_B1受体的影响。方法:应用游泳训练和睡眠剥夺方法复制疲劳动物模型,运用Y-迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力,采用免疫组化方法检测大鼠脑内GABA_B1受体阳性反应物的变化。结果:模型组与正常组相比,大鼠Y-迷宫正确反应率明显下降,错误反应率明显升高,大鼠脑内GABA_B1的阳性反应物数目明显增多;中药治疗组与模型组相比,正确反应率明显升高,错误反应次数明显下降,脑内GABA_B1受体的阳性反应物数目明显减少。结论:四逆散对疲劳大鼠学习记忆能力的下降具有改善作用。     

基于“肝肾失调”探讨阿片类物质心瘾形成的中医病理基础

阿片类物质滥用是目前社会及医学领域的一大难题,其戒断复杂而艰难,关键问题在于阿片类物质心瘾难以戒除。阿片类物质心瘾是指物质滥用者对阿片类物质强烈持久的渴求和难以抑制的用药欲望,其形成的核心机制在于成瘾者对于阿片类物质的异常动机。异常动机的形成在于两个方面,即"产生动机不良"以及"控制不良动机能力下降",本研究即从异常动机形成的两个方面切入,通过类比法、引证法及演绎法进行理论研究,分析认为阿片类物质心瘾的形成与肝肾功能的失调相关相关性,研究认为不良动机形成的关键在于阿片类物质引起的肝失疏泄功能的异常,而控制不良动机能力下降则与肝胆主谋略司决断以及肾所藏之志功能的异常相关。     

紫杉醇产生菌及其工程菌株之间的AFLP遗传差异分析

采用AFLP技术对三株紫杉醇产生菌(HQD33、HQD43、HQD54)及HQD33菌株经复合诱变后再经原生质体诱变得到的两株诱变株UL50-6和UV40-19及其融合菌株J1-3进行了分析,结果表明三株紫杉醇产生菌分属不同的种属,同时首次从分子水平上证实Z35-8,J1-3为两株不同的融合子,为下一步的基因工程育种工作中的基因定位和分子克隆提供丰富可靠的分子标记。     

根霉12#发酵产生纤溶酶的酶学性质

溶栓疗法是血栓性疾病安全有效的治疗手段,开发新型纤溶酶具有实际应用意义.分离自南方小酒药的根霉12豆粕和麸皮为原料可产生纤溶酶.已采用盐析,疏水层析、离子交换层析和凝胶层析方法对纤溶酶分离提纯.提纯的纤溶酶比活力2143u/mg(尿激酶单位),有直接溶解血栓和激活纤溶酶原的双重溶栓作用,降解纤维蛋白α、β和γ肽链速度快;最适作用温度45℃,适宜作用pH范围6.8～8.8;等电聚焦方法测定该酶等电点8.5±0.1;只分解生色底物N-Succinvl-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA,其米氏常数Km为O.23mmol/L,酶转换数Kcat为16.36 s-1;Molish实验和甲苯胺蓝实验均证明该酶为糖蛋白,地衣酚-硫酸法测得该酶含糖量4.70%;EDTA、PMSF、PCMB对该纤溶酶有抑制作用,说明活性中心含有巯基、金属和丝氨酸;N端12个氨基酸序列为NH2-Ser-Val-Ser-Glu-Ile-Gln-Leu-Met-His-Asn-Leu-Gly,与其它生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.根霉12#产生的纤溶酶为新型纤溶酶,有希望开发成溶栓药物.