RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α逆转肺癌细胞耐药性

目的：观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对肺癌细胞耐药性的影响。方法：构建靶向HIF-1α小干扰RNA基因,并转染到人肺腺癌耐顺铂细胞株A549／DDP细胞中。逆转录聚合酶链反应RT—PCR）检测细胞的HIF-1α、多药耐药基因-（MDR-1）以多药耐药相关蛋白基因（MRP）mRNA变化,免疫细胞化学法观察干扰后HIF-1α、P-糖蛋白以及MRP蛋白的变化。MTT法检测不同浓度的顺铂作用下细胞死亡率。结果：HIF-1αsiRNA组中H1F-1α、MDR—1、MRPmRNA水平显著降低（P〈0．05）。且蛋白水平也显著下降（P〈0．05）。HIF-1αsiRNA组细胞死亡率较未转染组均明显增高（P〈0．05）,转染siRNA阴性组不影响肿瘤细胞的耐药性。结论：HIF-1αsiRNA可显著降低A549／DDP细胞中H1F-1α、MDR-1、MRP表达,从而起到逆转肺腺癌A549／DDP细胞的耐药作用。     

RNA 干扰沉默缺氧诱导因子1α逆转肺癌细胞耐药性

目的:观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对肺癌细胞耐药性的影响。方法:构建靶向HIF-1α小干扰RNA基因,并转染到人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞中。逆转录聚合酶链反应RT-PCR)检测细胞的HIF-1α、多药耐药基因1(MDR-1)以多药耐药相关蛋白基因(MRP)mRNA变化,免疫细胞化学法观察干扰后HIF-1α、P-糖蛋白以及MRP蛋白的变化。MTT法检测不同浓度的顺铂作用下细胞死亡率。结果:HIF-1αsiRNA组中HIF-1α、MDR-1、MRP mRNA水平显著降低(P<0.05),且蛋白水平也显著下降(P<0.05)。HIF-1αsiRNA组细胞死亡率较未转染组均明显增高(P<0.05),转染siRNA阴性组不影响肿瘤细胞的耐药性。结论:HIF-1αsiRNA可显著降低A549/DDP细胞中HIF-1α、MDR-1、MRP表达,从而起到逆转肺腺癌A549/DDP细胞的耐药作用。     

毒胡萝卜素诱导A549细胞凋亡的实验研究

目的:探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin TG)对体外培养人肺泡II型细胞来源的A549细胞生长及凋亡的影响。方法:体外培养A549细胞,经不同浓度TG(1μM、5μM、10μM)干预24小时,MTT检测细胞存活率、Hochest/PI染色观察细胞凋亡形态学、Wersten-blot检测活化caspase-3水平。结果:与对照组比较,经TG作用24小时后,活化caspase-3表达显著增加,细胞存活率下降,凋亡率增加,均呈浓度依赖性,P0.005。结论:毒胡萝卜素能抑制A549细胞生长,诱导细胞凋亡。     

肺曲霉病40例的临床分析

目的：探讨肺曲霉病的临床表现、影像学特点、诊断和治疗,以提高对本病的认识。方法：回顾性分析本院2002年1月-2009年4月经病理确诊为肺曲霉病住院患者40例,总结其临床表现、影像学特点、诊断及治疗情况。结果：40例肺曲霉病患者中,曲菌球23例、侵袭性肺曲霉病17例。合并有基础疾病者36例（90．0％）：其中,肺结核15例（37．5％）,支气管扩张6例（15．0％）。肺曲霉病的主要症状为咳嗽32例（80．0％）,咳痰25例（62．5％）,咯血24例（60．0％0。影像学表现多样,肿块结节型23例（57．5％）,渗出型12例（30．0％）空洞样病灶12例（30．0％）,“洞中球征”和“晕征”各8例（20．0％）。所有病例均经过病理检出,手术切除后病理检出26例（65．0％）,纤维支气管镜下活检栓出12例（30．0％）,CT引导下经皮肺穿刺活检检出2例。本组病例中,26倒在病理诊断前被初诊误诊,误诊率高达65．0％,初诊为肺结核13例（32．5％）,肺癌8例（20．0％）,细菌感染3例,支气管扩张并感染2例。26例（65．0％）经外科手术切除,随访均无复发;10例（25．O％）经抗真菌药物治疗,9例痊愈或显效。结论：肺曲霉病多继发于肺部基础疾病,临床表现以咳嗽、咳痰、反复间断咯血为主,缺乏特异性;影像学表现复杂多样。曲菌球和侵袭性肺曲霉病的发病危险因素、临床表现、影像学以及治疗方法均有不同。肺曲霉病误诊率高,确诊有赖于组织病理学;外科治疗和抗真菌药物治疗有较好的疗效。     

不典型干酪性肺炎和大叶性肺炎各28例的临床对比分析

目的:通过比较干酪性肺炎和大叶性肺炎的临床资料,为两种病的鉴别诊断提供依据.方法:收集了2005年到2008年的病例各28例,从临床表现、影像学资料、病原学资料及治疗情况等方面进行回顾性研究比较.结果:①干酪性肺炎的痛程较长,在发生明显的症状之前,有一个比较隐匿的长程低热和咳嗽;而大叶性肺炎的病程在一周左右.②大叶性肺炎的咯血(其中包括咯铁锈色痰)和血象的发生率明显高于干酪性肺炎(P＜0.05);而干酪性肺炎的PPD结果阳性强度高于大叶性肺炎(P＜0.05).③大叶性肺炎多发于双下肺,以渗出为主,抗生素治疗有效;干酪性肺炎多发于双上肺,以渗出和干酪性病变为主,干酪性肺炎在肺影像学的高密度影可以不均匀,而且可有卫星灶和空洞,且抗感染治疗无效.结论:大叶性肺炎和干酪性肺炎在临床上鉴别诊断较难,干酪性肺炎的误诊率高,详细询问病史和影像学检查可能更利于鉴别诊断.     

DDAH/ADMA通路在HDL促进内皮细胞NO生成中的作用

目的:观察高密度脂蛋白(HDL)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抑制内皮细胞一氧化氮(NO)生成的保护作用,并探讨其与二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)/非对称性二甲基精氨酸(ADMA)通路的关系.方法:Ox-LDL(1000 g/ml)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24小时或不同浓度的HDL(10、50、100μ g/ml)预处理HUVECs细胞1小时,再与ox-LDL(100μ g/ml)共孵育细胞24小时,收集细胞培养上清液检测NO、ADMA的浓度,收集内皮细胞检测DDAH-Ⅱ的mRNA和蛋白表达以及DDAH的活性.结果:Ox-LDL(100μ g/ml)孵育HUVECs24小时后,细胞培养上清液中NO的浓度显著降低,ADMA水平显著增高,细胞内DDAH-Ⅱ的mRNA和蛋白表达以及DDAH的活性均显著降低.HDL(10、50、100μ g/ml)可以拮抗ox-LDL(100μ g/ml)的上述作用.结论:HDL能显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞NO产生减少,其保护作用与其调节DDAH/ADMA通路有关.     

吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制

目的:探讨吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制.方法:14只C57BL/6小鼠随机分为对照组和吸烟组.吸烟组小鼠被动吸烟8周后,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)浓度.采用液体闪烁计数法分别检测对照组小鼠血清、吸烟组小鼠血清、吸烟组小鼠血清+N-乙酰半胱氨酸(NAC,2mM)介导的细胞胆固醇流出效率.结果:与对照组相比,吸烟组小鼠血清中HDL-C显著降低,TG显著升高,TC和LDL-C无显著差别,并且吸烟组小鼠血清中MDA水平也显著升高.吸烟组小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出效率明显降低,给予抗氧化剂NAC共同孵育可以显著增加吸烟组小鼠血清胆固醇流出效率.结论:吸烟显著降低小鼠血清介导的巨噬细胞胆固醇流出效率,其机制可能与吸烟降低HDL-C水平以及促进HDL脂质过氧化有关.