丝状真菌原生质体技术的研究(Ⅷ)——渗透压稳定剂对原生质体的影响

报道用五种无机盐和有机糖醇作渗透压稳定剂,对草菇、银丝菇、台湾根霉和黑曲霉原生质体分离和再生的影响．分离原生质体以ＫＣｌ、ＮａＣｌ和ＭｇＳＯ４等无机盐渗稳剂较有机糖醇效果好．ＫＣｌ和蔗糖对四种真菌原生质体再生都有较好的效果．就浓度而言,分离原生质体０．６ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、ＭｇＳＯ４、蔗糖和甘露醇对黑曲霉和台湾根霉都是最佳的浓度．草菇和银丝菇以０．４ｍｏｌ／Ｌ蔗糖或０．５ｍｏｌ／ＬＫＣｌ和ＭｇＳＯ４效果较好．渗透压稳定剂的种类和浓度不仅影响原生质体的数量而且影响原生质体的质量．０．６ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ对台湾根霉和黑曲霉原生质体分离有好的效果,而对草菇和银丝菇效果就比较差．０．６ｍｏｌ／ＬＫＣｌ对草菇、银丝菇和台湾根霉原生质体再生有很好的效果,而对黑曲霉效果则相当差．     

生殖域中特异表达的新基因Rcet2的克隆

利用NCBI中的数字差异显示数据库首先电子克隆了Rcet2基因,然后从成年小鼠睾丸组织中克隆出Rcet2全长基因,序列分析显示：Rcet2基因全长cDNA为454 bp,含3个外显子,编码88个氨基酸残基,该蛋白含1个不完整的半胱氨酸蛋白酶抑制剂结构域,但缺少半胱氨酸蛋白酶抑制剂关键的作用位点,而这些位点对半胱氨酸蛋白水解酶的抑制作用是重要的.小鼠多组织RT-PCR结果显示,Rcet2在成年老鼠大脑、睾丸和附睾生殖域中特异表达,睾丸中的表达高于附睾和大脑,Rcet2与半胱氨酸蛋白酶抑制家族2的Cres亚家族具有相似的特征,结果显示Rcet2可能是Cres亚家族中的一个新成员.