超氧阴离子自由基诱导皮层神经细胞Cu/Zn SOD基因表达的研究

目的:探讨超氧阴离子自由基对神经细胞Cu/ZnSOD基因表达的影响.方法:以产超氧阴离子自由基系统(XO/X)作用于原代培养的新生大鼠大脑皮层神经元,分析SOD含量、SOD活性和SODmRNA丰度.结果:SOD含量随超氧阴离子自由基作用时间的延长显著增加,第5天后增加的变化趋于稳定,第7天达每毫克蛋白质(1.24±0.23)μg;SOD活性在开始的1～5 d呈上升状态,第5天为每毫克蛋白质(5.30±0.44)U,第6天开始显著下降为每毫克蛋白质(2.15±0.32)U,且稳定至第7天的每毫克蛋白质(2.08±0.73)U;SODmRNA的相对丰度显著高于对照组.结论:超氧阴离子自由基可诱导培养的神经细胞Cu/ZnSOD基因表达;SOD活性变化和SOD含量变化并不平行,可能是在超氧阴离子自由基作用一定时间后,细胞内出现了无活性或/和低活性的SOD.     

应用单克隆抗体对甲胎蛋白及其酶解片断抗原决定簇的研究

甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)是胎儿肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。AFP在正常人血清中含量甚低,而在胎儿神经管缺陷的孕妇及多数原发性肝癌患者血清中明显升高。目前放射免疫等检测AFP的方法已广为临床应用。近年研究指出,AFP的分子结构和免     

Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物的制备及其神经毒性的初步研究

目的：探索Aβ神经毒性的来源和作用机制。方法：体外制备了Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物，并对该复合物体内外的生物学活性进行了分析。结果：Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物ESR波谱呈现蛋白束缚Cu(Ⅱ)的谱线特征，提示：Cu(Ⅱ)已以某种方式与邵结合。Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物可利用水溶液中分子氧以及XO/X系统产生的超氧阴离子自由基形成过氧化氢；而单纯的Aβ1-40却无此作用。CD谱显示：与单纯的Aβ1-40比较，Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物的α-螺旋百分含量有所降低。Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物对原代培养海马神经元的生长抑制作用要比单纯Aβ1-40作用出现的早。大鼠脑海马微量注射Cu(Ⅱ)Aβ1-40复合物后行为学改变要比单纯Aβ1-40作用更为明显。结论：Aβ与Cu(Ⅱ)结合后启动活性氧系统进而造成神经细胞损伤，这可能是Aβ在AD脑内神经毒性的作用机制之一。     

氧自由基对CAT、SOD和GPX的氧化修饰研究

以氧自由基产生系统作用于CAT、SOD和GPX，探索氧自由基的氧化修饰对CAT、SOD和GPX结构与功能的影响。结果：CAT被氧自由基氧化修饰后，改变了酶蛋白二级结构(α—螺旋百分含量减少)、空间构象(△Cp减少，分子粒晶直径增大)、辅基Fe(Ⅲ)微环境及酶、底物的亲和力和催化活性。过氧化氢，羟自由基系统可以使SOD酶蛋白氨基酸残基氧化产生羰基，并使SOD活性降低。过氧化氢／羟自由基可在His对SOD作用背景上更为严重地损伤SOD(活性降低幅度更大)。氧自由基对GPX有损伤作用：氧自由基可使GPX酶蛋白氨基酸残基氧化产生羰基，并可使GPX酶蛋白二级结构发生变化(α—螺旋百分含量减少)，这些可能是使GPX活性下降的原因。结果提示：氧自由基的氧化修饰，可对抗氧化酶CAT、SOD和GPX造成损伤。氧自由基使酶蛋白结构和辅基的微环境与价态发生变化，可能是酶活性降低的原因。