人肺腺癌细胞系SPC－A_8的建立及生物学特性

１９８９年８月４日，作者以一例肺腺癌手术标本（原发灶）为原代培养材料，建立了能长期稳定传代培养的肺腺癌细胞系ＳＰＣ－Ａ８。类多边形细胞贴壁生长，倍增时间３２．５小时，克隆形成率２３．９％，ＤＮＡ指数（ＤＩ）２．１６，染色体众数在７７～８２范围内，核型为８６．ＸＹ．＋３Ａ，－２Ｂ，＋１１Ｃ，－３Ｄ，＋８Ｅ，＋６Ｆ，＋１０Ｇ，另有５条染色体不能分组。ＳＰＣ－Ａ８细胞的Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同功酶谱与ＨｅＬａ细胞相同。ＳＰＣ－Ａ８细胞的裸鼠移植瘤呈腺癌结构。以上特征证明ＳＰＣ－Ａ８为人肺腺癌细胞系。     

应用差异凝胶电泳及质谱技术筛选肺癌患者血浆差异蛋白

目的 建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白.方法 应用差异凝胶电泳（DIGE）和基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对健康者、肺部炎症患者和I期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比较研究,寻找肺癌相关差异蛋白.结果 应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;Decyder 6.5软件分析获得差异大于2倍的蛋白质点共有72个;质谱鉴定去冗余后确定了12种蛋白质,其中7种与肿瘤相关,分别为酰基辅酶A合成酶家族成员3、抗血小板膜糖蛋白I b特异性抗体、γ-纤维蛋白原、4型血清淀粉样蛋白A、补体因子H、钙结合微丝蛋白、载脂蛋白I.结论 应用DIGE及MALDI-TOF-MS分离并初步鉴定了12种蛋白质,筛选出7种在肺癌患者血浆中高表达的肿瘤相关蛋白.     

紫杉醇耐药与敏感细胞的差异表达蛋白分析

目的 比较人肺腺癌细胞系A549与肺腺癌紫杉醇耐药细胞系A549-Taxol的差异表达蛋白.方法 提取A549和A549-Taxol总蛋白,应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离,ImageMaster 5.0软件分析并筛选出两者间差异表达的蛋白点,质谱分析加以鉴定.结果 获得分辨率高且重复性好的肺腺癌耐紫杉醇细胞系及亲代细胞系2-DE图谱.ImageMaster软件分析差异大于2倍的蛋白质点共有80个,其中33个在耐药细胞系中上调,47个下调.质谱分析鉴定出19种差异表达蛋白,其中A549-Taxol中上调蛋白11种,涉及细胞骨架蛋白、代谢酶类、分子伴侣和信号转导相关蛋白质.结论 应用2-DE技术整体展示了紫杉醇耐药细胞系及敏感细胞系的蛋白表达谱,质谱法鉴定的差异蛋白为进一步从多因素角度研究紫杉醇耐药机制提供了新线索.     

应用差异凝胶电泳及质谱技术筛选肺癌患者血浆差异蛋白

目的 建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白.方法 应用差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对健康者、肺部炎症患者和I期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比较研究,寻找肺癌相关差异蛋白.结果 应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;Decyder 6.5软件分析获得差异大于2倍的蛋白质点共有72个;质谱鉴定去冗余后确定了12种蛋白质,其中7种与肿瘤相关,分别为酰基辅酶A合成酶家族成员3、抗血小板膜糖蛋白I b特异性抗体、γ-纤维蛋白原、4型血清淀粉样蛋白A、补体因子H、钙结合微丝蛋白、载脂蛋白I.结论 应用DIGE及MALDI-TOF-MS分离并初步鉴定了12种蛋白质,筛选出7种在肺癌患者血浆中高表达的肿瘤相关蛋白.     

五个人体肺癌细胞系的建立及主要生物学特性

 本文报告新建的5个肺癌细胞系——SPC—A₂,SPC—A₄.SPC—A₅,SPC—L₁和SPC—U₁。SPC—U₁为未分化癌,未证实其组织来源。其余4例均为低分化腺癌。     

蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用

目的 分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型。方法 应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌。结果 筛选到23个差异蛋白峰（P<0.001）。盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%。结论 应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台。     

蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用

目的 分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型.方法 应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛 21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌.结果 筛选到23个差异蛋白峰(P<0.001).盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%.结论 应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台.     

CEA多肽致敏的树突状细胞(DC)治疗晚期非小细胞肺癌临床初步研究

背景与目的树突状细胞(DC)为基础的免疫治疗是肿瘤治疗的新领域,对部分恶性肿瘤有较好的疗效。本研究的目的是应用癌胚抗原(CEA)致敏的DC治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC),观察其临床应用方法、毒副反应和剂量效应。方法选择CEA高表达的肺癌患者,体外培养外周血单个核细胞来源的DC及CIK,CEA多肽于培养的第5天加入培养液以致敏未成熟DC。将DC和CIK细胞静脉回输患者,观察回输后的疗效和毒副反应。结果共22例晚期NSCLC患者接受了DC治疗,回输DC数量为2.5×106~9.6×107,平均5.03×106;回输CIK细胞数量为3.4×108~46×108。治疗后CD3、CD8、NK、IFN-γ明显升高(P<0.05)。全组1年生存率为68.2%(15/22)。主要毒副反应为发热和皮疹。结论DC生物免疫治疗具有较好的耐受性和安全性。     

不饱和脂肪酸对肺癌细胞的抑制作用

不饱和脂肪酸（ＬＡ）浓度为２５μｇ／ｍｌ，对人肺腺癌细胞系（ＳＰＣ－Ａ１）细胞和二倍体人胚肺细胞系（ＨＬＦ）细胞抑制率分别为：９８．４±２．２％，１８．０±２．１％（Ｐ＜０．００１）。表现为对恶性细胞的选择性抑制作用。ＳＰＣ－Ａ１对５μｇ／ｍｌ ＬＡ无反应，１μＭ丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）对ＳＰＣ－Ａ１细胞抑制率为４３．４±２．９％而当用１μｍ ＭＭＣ处理这种对５μｇ／ｍｌ ＬＡ无反应的ＳＰＣ－Ａ１时，     

树突状细胞抑制ⅠB期非小细胞肺癌术后复发和转移初探

背景与目的：ⅠB期非小细胞肺癌（NSCLC）术后生存率较差,有必要进行辅助治疗。树突状细胞（DC）是体内功能最强的专职抗原递呈细胞,可有效诱导静止T细胞增殖和应答,促进细胞毒性T淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞的生成,是机体免疫反应的启动者和参与者。本研究初步探讨DC联合化疗治疗根治性术后ⅠB期NSCLC患者的生存率。方法：选择根治性手术ⅠB期NSCLC患者66例,按照1∶2随机分为DC联合化疗组和单纯化疗对照组,研究组22例,采用体外培养外周血单个核细胞来源的DC及细胞因子激活的杀伤细胞（CIK）后回输患者体内,同时联合化疗。对照组44例,接受单纯化疗。结果：DC联合化疗组22例患者的3年生存率为87.50%,4年生存率为77.78%;对照组分别为85.10%和61.28%,两组差异有显著性（P=0.0419）,提示DC联合化疗有延长ⅠB期NSCLC术后患者生存时间的趋势。DC联合化疗组毒副反应轻微。结论：DC生物免疫治疗联合化疗可使术后ⅠB期非小细胞肺癌患者获益。