番茄红素诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用机制

目的探讨番茄红素诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的分子机制。方法体外培养SW480细胞,采用MTT比色实验、流式细胞术、RT-PCR和Westernblot方法,分析番茄红素对SW480细胞的生长增殖作用、对细胞凋亡率的影响及对细胞凋亡相关分子Bcl-2、Bax、Caspase-9和Caspase-3表达的影响。结果MTT法显示,番茄红素能显著抑制SW480细胞的生长增殖能力,且呈一定的量效与时效关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为1.0 μmol/L;流式细胞仪分析表明,番茄红素呈浓度依赖性诱导SW480细胞凋亡;RT-PCR或Western blot分析表明,SW480细胞经不同浓度番茄红素诱导后,与溶媒组相比,Bcl-2表达逐渐减弱,而Bax,Caspase-9和Caspase-3表达逐渐增强,Bcl-2/Bax比值降低。结论番茄红素对SW480细胞的抑制增殖作用,可能与降低Bcl-2/Bax比值、增加Caspase-9和Caspase-3蛋白表达、诱导细胞凋亡有关。     

组蛋白乙酰化在二烯丙基二硫抑制CNE2细胞生长增殖中的作用

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)在抑制CNE2细胞生长增殖中,组蛋白乙酰化状态的改变情况。方法采用MTT、细胞计数、细胞形态学和Western blot方法,分析DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用及与其调控细胞组蛋白乙酰化水平的关系。结果MTT法、细胞计数显示,DADS能明显抑制CNE2细胞增殖,细胞群体倍增时间延长,呈浓度和时间依赖性;HE染色显示,DADS处理CNE2细胞48h后,细胞异型性明显降低,核浆比明显减少;Western blot 分析表明,90μmol/L、140μmol/L、240μmol/L和400μmol/LDADS处理CNE2细胞48h后,组蛋白H3乙酰化的表达较对照组分别增加20%、32%、42%和30%,差异有统计学意义（P<0.05）;组蛋白H4乙酰化程度较对照组差异无统计学意义。结论DADS可抑制CNE2细胞生长增殖,其作用机制可能与组蛋白H3乙酰化水平提高有关。     

二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。     

番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用

目的:研究番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用及分子机制.方法 体外培养PC-3细胞,采用MTT、细胞计数法、流式细胞仪和Western blotting方法分析番茄红素对PC-3细胞增殖的抑制作用、对细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白的表达.结果 不同浓度番茄红素(1.5、3.0、6.0和12.0μmol/L)处理PC-3细胞48 h后,生长抑制率分别为11.34%、19.59%、30.92%、52.58%;常规培养PC-3细胞群体倍增时间为29.04 h,番茄红素浓度由1.5 μmol/L增加到12.0 μmoL/L时,其细胞群体倍增时间由36.58 h延长到88.32 h;流式细胞仪分析显示,番茄红素呈浓度依赖性将PC-3细胞阻滞在G0/G1期;在细胞周期阻滞的同时有P21 WAF1蛋白表达上调.结论 番茄红素对PC-3细胞的抑制增殖作用与G0/G1期阻滞有关,其分子机制可能与调节P21 WAF1表达有关.     

DADS抑制SW480细胞系生长增殖及CK19蛋白质分子鉴定

目的:观察不同浓度和作用时间二烯丙基二硫(DADS)对SW480细胞的生长抑制作用,应用前期蛋白质组学筛出的部分差异表达蛋白质分子,进行进一步分析与鉴定.方法:采用MTT、细胞计数法;施用流式细胞仪、RT-PCR和Western blotting方法,检测50 靏/mL DADS对SW480细胞的凋亡率、CK19 mRNA和蛋白的表达水平.结果:MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖,呈浓度和时间依赖性,细胞生长增殖速度明显减慢.细胞计数表明,当DADS浓度增加时,SW480细胞群体倍增时间延长,与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05.流式细胞仪分析显示,50 靏/mL DADS使SW480细胞凋亡率增加.RT-PCR和Western blotting结果证实,50 靏/mL DADS处理SW480细胞后,CK19 mRNA和蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义,P<0.05.结论:DADS抑制SW480细胞系生长增殖,可能与CK19表达下调,促进细胞凋亡有关.     

二烯丙基二硫对人鼻咽癌CNE2细胞周期的阻滞作用

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞周期的阻滞作用及分子机制.方法 体外培养CNE2细胞,采用MTT比色实验、细胞计数法、细胞形态学观察、流式细胞仪和Western blotting方法分析DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用、细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白p21WAF1的表达.结果 MTT法显示,不同浓度DADS(90、140、240、400 μmol/L)处理CNE2细胞48小时后,生长抑制率分别为3.3%、12.9%、28.3%、56.9%;细胞计数法表明,常规培养CNE2细胞群体倍增时间为24.5小时,DADS的浓度由90 μmol/L增加到400 μmol/L时,其细胞群体倍增时间由27.6小时延长到93.1小时;HE染色结果显示,不同浓度DADS处理CNE2细胞48小时后细胞异型性明显减少,核浆比例明显减少;流式细胞仪分析显示DADS呈浓度依赖性将CNE2细胞阻滞在G0/G1期;Western blotting分析表明,在细胞周期阻滞的同时有p21WAF1蛋白表达上调.结论 DADS对CNE2细胞的抑制增殖作用与G0/G1期阻滞有关,其分子机制可能与调节p21WAF1表达有关.     

二烯丙基二硫抑制SW480细胞系生长增殖的相关蛋白质分子鉴定

目的应用前期比较蛋白质组学筛出的部分差异表达蛋白质分子,进行进一步分析与鉴定。方法采用MTT法,观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用;使用流式细胞仪,分析50 mg.L-1DADS对SW480细胞的周期分布的影响;运用Western blot方法,分析50 mg.L-1DADS处理SW480细胞系后泛肽和FKBP的表达水平。结果MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞系生长增殖,呈浓度和时间依赖性,SW480细胞系经不同浓度DADS处理后,生长增殖速度明显减慢。流式细胞仪分析结果显示,50 mg.L-1DADS将SW480细胞阻滞在G2/M期。应用Western blot分析结果显示,50 mg.L-1DADS处理SW480细胞48 h,泛肽表达较对照组增强,而FKBP的表达明显降低,差异均为2倍以上。结论DADS抑制SW480细胞系生长增殖,可能与泛肽表达上调,FKBP表达下调,将细胞阻滞在G2/M期有关。     

DADS对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。方法：采用MTT、细胞计数法，观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用；施用流式细胞术检测不同浓度DADS对SW480细胞的凋亡率。结果：MTT法显示，DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖，呈浓度和时间依赖性，细胞生长增殖速度明显减慢。细胞计数表明，当DADS浓度增加时，SW480细胞群体倍增时间延长，与对照组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。流式细胞仪分析显示，随着DADS处理浓度增加，使SW480细胞凋亡率逐渐增高，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：DADS具有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。     

p33ING1b基因对人结肠癌细胞SW480生物学行为的影响

目的:构建pcDNA3.1( )/p33ING1b真核表达载体及观察其对人结肠癌细胞SW480生长的影响。方法:构建人p33ING1b真核表达载体,采用脂质体转染方法,将pcDNA3.1( )/p33ING1b转染人结肠癌细胞系SW480,G418筛选,挑选阳性克隆,阳性克隆经RTPCR及Westernblot鉴定后,通过生长曲线和软琼脂克隆形成实验检测高表达p33ING1b基因的SW480细胞体外增殖情况,并用流式细胞仪分析细胞凋亡率的改变。结果:成功构建重组pcDNA3.1( )/p33ING1b基因的真核表达载体,建立高表达p33ING1b基因的SW480细胞系,p33ING1b基因在SW480细胞中高表达后,其生长速度减慢,细胞凋亡率(15.4±1.7)%较空载体组(2.0±0.6)%及未转染组(1.6±0.8)%明显升高。结论:p33ING1b基因高表达对SW480细胞系具有生长抑制和促进凋亡的作用。