胃癌单克隆抗体-丝裂霉素C结合物的制备及其细胞毒特征

作者报道胃癌单克隆抗体MG11-丝裂霉素C(MMC)结合物的制备及其对肿瘤细胞的杀伤作用。首先用戊二酐处理MMC,于MMC上引入羧基,MMC衍生物与N羟基琥珀酰亚胺及2,2′-二环已基碳二亚胺反应,得到MMC活性酯,后者与抗体反应将MMC引入抗体中。经测定,每克分子抗体中引入约6～7克分子药物,结合物对人胃癌细胞KATⅢ具有较强的选择性杀伤作用,在0.56μg/ml水平(药物浓度)对肿瘤细胞杀伤牢达60％,优于游离药物(51％)及无关抗体结合物(9.3％),提示选用的胃癌单抗对MMC具有较好的导向作用。     

氨甲喋呤-牛血清白蛋白-抗胃癌单克隆抗体结合物的制备及其对肿瘤细胞的杀伤作用

在肿瘤治疗研宄中,免疫毒素己进入临床试用阶段,免疫药物亦有希望用于临床。但国内研究尚少,胃癌单克隆抗体导向药物的研究尚无报道。作者选择本室制备的鼠抗胃癌单克隆抗体MGb_2(IgG_1亚型)制备抗体-牛血清白蛋白(BSA)-氨甲喋呤结合物,探讨导向治疗的可行性。     

胃癌单克隆抗体-蓖麻毒素A链结合物的制备及其对肿瘤靶细胞的杀伤作用

作者报道胃癌McAb MGb_2(本室制备)与蓖麻毒素A链(RTA)交联物的制备。交联物对胃癌细胞具有强大的选择性杀伤怍用,胃癌McAbMGb_2对RAT具有导向能力。     

半乳糖结合位点封闭式免疫毒素的制备及其特性

本文报道B链半乳糖结合位点封闭的蓖麻毒素—胃癌单克隆抗体(McAb)结合物的制备及其细胞毒特征.首先将引入碘乙酰基团的毒素与引入巯基的抗体反应,得到的结合物通过琼脂糖亲和层析柱除去仍保留半乳糖结合能力的部分.ELISA结果表明,结合物稀释至2 nmol/L水平,仍保留抗体结合活性.结合物对靶细胞在体外有较强的选择性杀伤作用,在0.1 pmol/L水平,对人胃癌细胞KATOⅢ的杀伤率为46％,优于McAb—蓖麻毒素A链结合物.结果表明,免疫毒素中B链的存在有助于增强A链的细胞杀伤作用。     

异种VEGF融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的:利用原核表达系统,构建异源血管内皮生长因子融合蛋白疫苗,研究该融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌肿瘤模型的抗血管生成主动免疫治疗效果.方法:将鸡VEGF基因克隆入pGEX-4T-2原核表达载体,经IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-NTA纯化,透析复性,构建GST-cVEGF融合蛋白疫苗.将C57BL16J小鼠随机分为3组,GST-cVEGF疫苗组10只、cVEGF疫苗组10只、生理盐水组(NS) 10只.将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只分别0、2、3周免疫100 μg GST-cVEGF融合蛋白疫苗、单纯cVEGF蛋白疫苗、生理盐水.接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态.接种肿瘤18 d后,处死小鼠,剥离肿瘤称重.检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度.结果:GST-cVEGF疫苗组、cVEGF组、生理盐水组肿瘤均重分别为(1.55±0.534) g、(1.93±0.607) g、(2.87±0.642) g.GST-cVEGF疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P<0.01).疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1:2000.结论:异种血管内皮生长因子基因重组融合蛋白疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应.     

非离子表面活性剂逆转肿瘤细胞多药耐药性的机制

目的探讨非离子表面活性剂聚氧乙烯醚﹑聚乙二醇300﹑曲拉通X100对肺癌耐药细胞A549/DDP(耐顺铂)多药耐药性的逆转及其机制。方法用四氮唑盐(MTT)法进行体外耐药逆转实验,Westernblot检测P-gp(P-糖蛋白)蛋白的表达。结果①合用非离子型表活剂前后,A549/DDP对化疗药物阿霉素、顺铂、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、依托泊甙和长春新碱的敏感性显著增加(各组都为P<0.01);②三种非离子型表面活性剂能抑制P-gp蛋白的表达。结论三种非离子表面活性剂具有逆转A549/DDP耐药性的作用,逆转机制与其抑制P-gp蛋白的表达有关。     

表皮生长因子受体靶向重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗的免疫活性

目的探讨表皮因子受体为靶向,重组T7噬菌体疫苗在体诱导的免疫活性。方法用构建的重组T7噬菌体疫苗免疫动物,Dot-Blot和流式细胞仪检测产生的特异性抗体,MTT法检测产生的特异性杀伤肿瘤细胞活性。结果实验组动物均产生特异性抗体,与A431细胞结合的阳性细胞率分别为37.6%、47.6%和35.1%;T7415-1b-90和T7415-1b-132实验组均诱导产生对A431细胞的特异性杀伤作用,检测的ODE+T与对照组相比具有显著性差异(P<0.01);T710-3b-638实验组对肿瘤细胞无杀伤作用。结论异源EGFR分子构建的重组T7噬菌体疫苗可以诱导机体产生体液免疫反应和细胞免疫反应。     

软骨抗血管生成组份的分离纯化及性质研究

目的从鲨鱼软骨中分离纯化血管生成抑制剂（CDAI）并对其性质加以研究。方法2MNaCl抽提;CM－SephadexC－50离子交换层析;DEAE－SephadexA－50离子交换层析;SephadexG－50凝胶层析。SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度鉴定。MTT法测定CDAI对1H11内皮细胞的作用。鸡胚绒毛尿囊膜试验（CAM）观察CDAI对血管生成的作用。结果得到电泳纯的CDAI,分子量为36280,CDAI对内皮细胞产生强的抑制作用,0．65mg／L时对1H11内皮细胞的增殖抑制率为50％。鸡胚绒毛尿囊膜试验显示CDAI对血管形成有显著的抑制作用。结论鲨鱼软骨中含有血管生成抑制剂,能抑制血管生长,对具有病态血管形成的疾病具有潜在治疗价值。     

抗人小细胞肺癌单克隆抗体导向治疗的实验研究

越来越多的动物实验及临床应用证明,单抗介导的导向作用是确切的。在对抗人小细胞肺癌单抗2F7进行了特异性、亲和性及相关抗原表达研究的基础上,用移植人小细胞肺癌的裸鼠作为肿瘤模型,研究了碘标记