2-脱氧葡萄糖增强顺铂对人黑色素瘤细胞杀伤作用及其机制

目的:探讨2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-glucose,2-DG)和顺铂(cisplatin)药物组合对人黑色素瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:用MTT法检测细胞活力,Annexin-V/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡.Western blotting检测相关蛋白表达.细胞内ATP含量用生物发光试剂盒检测.结果:不同浓度顺铂(5～ 25 μmol/L)单药处理虽然能以剂量和时间依赖方式抑制A375细胞活力,但与2-DG(10 mmol/L)联合使用,顺铂处理浓度除5μmol/L外都显示增强对细胞活力的抑制作用.2-DG(10 mmol/L)单独处理并不诱导A375细胞出现明显死亡(＜10％),顺铂(20 μmol/L)单独作用导致50％左右的细胞死亡,而两者联合则导致大于80％的细胞死亡,与单独用药组比较差异显著(P＜0.01).顺铂单药或与2-DG联合均诱导Caspase-3和PARP-1裂解,并抑制抗凋亡蛋白Mcl-1的表达.2-DG联合顺铂(20 μmol/L)能明显抑制Ⅱ型己糖激酶表达,并且使细胞内ATP含量降低于对照组(6.3 vs 33.0 μmol/mg),与单药组比较差异显著(P＜0.01).2-DG联合顺铂不诱导正常人黑色素细胞凋亡.此外该药物联合对另外三种人黑色素瘤细胞(SK-100,C8161和Mum-2C)也有增强杀伤的作用.结论:2-DG能特异地增强顺铂诱导人黑色素瘤细胞凋亡的敏感性,作用机制可能与下调抗凋亡蛋白Mcl-1表达,抑制肿瘤己糖激酶水平和ATP合成有关.     

The combined mechanism of fatty acid translocase FAT/CD36 and long chain fatty acid

正Objective To investigate the binding mechanism of fatty acid translocase FAT/CD36 and long chain fatty acid.Methods ELISA was used to analyze the intensity mechanism of the purity of FAT/CD36 binding with different fatty acid,molecular simulation docking was used to further verify the binding mechanism and analyze its     

脂肪酸移位酶FAT/CD36与长链脂肪酸的结合机制

目的探讨脂肪酸移位酶FAT/CD36与长链脂肪酸的结合机制。方法 ELISA分析重组蛋白FAT/CD36与不同种类长链脂肪酸结合强弱机制,分子模拟对接进一步验证其结合机制并分析其可能作用位点。结果ELISA证明重组蛋白FAT/CD36与不同种类长链脂肪酸均显示特异性结合,结合值大小为油酸棕榈酸棕榈油酸肉豆蔻酸硬脂酸。分子模拟对接进一步验证FAT/CD36受体蛋白主要与其中的油酸、棕榈酸及棕榈油酸结合,且结合位点位于FAT/CD36受体蛋白胞外结构的Arg183-Lys-Gly-Lys-Arg-Asn-Leu-Ser-Tyr238区域组成的活性口袋。结论 FAT/CD36作为细胞长链脂肪酸转运的主要受体,其可能主要转运油酸、棕榈酸和棕榈油酸这三种脂肪酸。