中药金安与顺铂诱导小鼠Lewis肺癌凋亡的研究

[目的]探讨中药金安是否能促进顺铂诱导C57BL/6J小鼠Lewis肺癌凋亡。[方法]荷Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠分为生理盐水组(NS)、金安组(JA)、顺铂组(DDP)和金安合用顺铂组(DJ),通过检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率,应用流式细胞仪和TUNEL法以及提取组织DNA并电泳等方法观察金安合用顺铂对Lewis肺癌的治疗作用。[结果]JA组体重明显增加,DDP组体重先升后降,而DJ组体重则先升后降再回升呈“～”型。各治疗组的抑瘤率分别为40.90%、52.04%和47.83%。流式细胞仪检测各组的凋亡率依次为14.95%、11.68%和14.25%。TUNEL法测定各组的凋亡指数依次是(0.79±1.60)%、(4.00±7.15)%、(5.93±5.96)%、(7.07±10.15)%;DNA提取并电泳在DJ组有DNALadder出现。[结论]金安能增强DDP诱导Lewis肺癌的凋亡作用,并能减轻其毒副作用。     

基于单水平集函数的细胞分割算法

目的：由于细胞图像十分复杂,传统的基于像素或者边界的图像分割方法难以精确的实现细胞分割。因此,需要设计一种可以实现细胞图像精确分割的方法。方法：结合大津分割算法和主动轮廓模型的优点,设计出一种基于单水平集函数的细胞分割算法,首先对细胞图像大津分割,其结果作为水平集函数的初始值,然后使用迭代法对水平集函数演化。采用MATLAB对显微镜下获取的细胞图像进行试验,将本文改进后的算法与常规的算法进行了对比。结果：与传统的水平集分割算法相比,本文方法对细胞图像分割结果更加准确,迭代次数减少一半左右,因此分割时间也减少了一半左右。结论：结合细胞图像的结构特点,利用大津分割结果作为主动轮廓模型的初始值,可有效解决主动轮廓模型因为初始值设置不当导致的分割缺陷问题,水平集函数能够跟踪拓扑结构变化,具有计算精度高、算法稳定、优化边界清晰光滑等优点,在本文中得到了充分的应用。因此本文所提出的算法能够高效地实现细胞图像的分割。     

中药肺瘤平膏合并化疗对非小细胞肺癌患者树突状细胞亚型的影响

[目的]观察中药肺瘤平膏合并化疗对非小细胞肺癌患者外周血树突状细胞亚型的影响。[方法]用流式细胞仪检测10例健康受试者和37例非小细胞肺癌患者治疗前、治疗后的DC亚群、T细胞亚群及NK细胞含量。所有患者分为中医治疗组（n=18）和化疗组（n=19），中医组即在化疗的同时接受中药肺瘤平膏治疗，化疗组为单纯接受化疗。[结果]非小细胞肺癌患者髓系树突状细胞（MDC）较正常人低表达（0．72±0．08VS0．56±0．18）（P〈0．01），机体免疫功能显著下降。中医组患者MDC含量（0．93±0．23VS0．33±0．24）、MDC／LDC比值（2．97±1．56VS1．39±0．57）较化疗组提高（P〈0．01），中医组CD3^＋（72．53±6．25VS65．26±10．66）、CD4^＋细胞数量（41．44±10．86VS31．56±7．58）、NK细胞含量（25．23±13．45VS16．5±11.30）及CD4^＋／CD8^＋比值（1．92±0．64VS1．07±0．49）均提高，CD8＋细胞含量（25．60±9．46VS32．19±8．67）则下降（P〈0．05）。[结论]中药肺瘤平膏结合化疗对非小细胞肺癌有调整体内免疫反应向Th1方向极化，从而调动细胞免疫的作用。     

人参皂甙Rg3对荷瘤及环磷酰胺化疗小鼠黏膜免疫力影响

[目的]观察人参皂甙Rg3对肿瘤化疗肠道黏膜损伤的治疗作用及其黏膜免疫机制。[方法]运用给小鼠原位接种C-26结肠癌并重复灌胃环磷酰胺建立肿瘤化疗肠道黏膜损伤的模型，观察人参皂甙Rg3对瘤重、抑瘤率及PP结面积影响，分离肠上皮内淋巴细胞，固有层淋巴细胞及PP结内的淋巴细胞，用免疫荧光染色及流式细胞仪分析黏膜免疫各部位T淋巴细胞亚群的变化。[结果]环磷酰胺组瘤重显著降低，抑瘤率约为37.6%,而环磷酰胺加Rg3组瘤重与环磷酰胺组比较差异无显著性。荷瘤及环磷酰胺都可显著降低PP结而积，而人参皂甙Rg3可明显减轻环磷酰胺对PP结面积的影响（P＜0.01）。人参皂甙Rg3可使荷瘤和环磷酰胺作用下显著减少的固有层淋巴细胞中的CD4^＋细胞百分比显著增加（P＜0.05），但对CD8^＋细胞百分比无明显影响。[结论]荷瘤及环磷酰胺可明显抑制肠道黏膜免疫功能，而人参皂甙Rg3能明显改善这种黏膜免疫抑制状态。人参皂甙Rg3对黏膜免疫的调节作用是扶正中药发挥作用的重要途径之一。     

胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白的检测

目的　探讨胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白变化在肿瘤转移中的意义。方法　采用KL型肿瘤免疫图像分析系统和流式细胞仪测定正常人和胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA的转录活性和凋亡相关蛋白 (Fas/FasL)的表达。结果　胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性明显降低 ,凋亡相关蛋白Fas表达升高 ,与健康人相比 ,差异显著 (P <0 .0 1) ,随着病情的进展 ,这种趋势更为明显。结论　外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白变化可以从淋巴细胞增殖和凋亡活性两方面评价肿瘤患者的免疫状态 ,在胃癌转移的临床监测中具有重要意义。     

风疹病毒基因序列,结构蛋白及ELISA检测法

风疹又称德国麻疹 ,是临床上常见的呼吸道感染性、出疹性疾病 ,普通人发病率高、症状较轻 ,合并症少 ,患病后常可获得持久免疫。孕妇、尤其是早孕妇女初次感染风疹病毒 (Ｒｕｂｅｌｌａｖｉｒｕｓ ,ＲＶ) ,ＲＶ除了在母体内繁殖造成损害外 ,尚可经胎盘进入胎体 ,引起胎儿先天性风疹综合征 (Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｒｕｂｅｌｌａｓｙｎ ｄｒｏｍｅｓ,ＣＲＳ) ,导致死产、流产或胎儿先生性畸形[1] 。疫苗免疫可降低风疹的发病率 ,但据报道[2 ] 在西欧和南美免疫后的人群约 10 %～ 2 0 %仍保持着对ＲＶ的敏感性。我国虽已有减毒活疫苗问世 ,但尚…     

养胃抗瘤冲剂及其拆方对人胃癌细胞系MGC-803及BGC-823侵袭重组基底膜的作用及作用途径

目的：观察人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜的侵袭作用，分析养胃抗瘤冲剂对其侵袭作用的影响及可能作用途径。方法：实验于2001-05／2001-10在中国中医研究院广安门医院肿瘤细胞生物学实验室完成。选取日本健康雌性大耳白兔21只，按随机数字表法分为7组，即养胃抗瘤冲剂组及拆方（益气方、活血方、解毒方、益气活血方、益气解毒方）组、空白血清组，制备含药血清。采用Transwell细胞培养小室建立人肿瘤细胞系体外侵袭模型，动态观察人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜的侵袭作用以及中药复方养胃抗瘤冲剂（由生黄芪、人参、白花蛇舌草、草河车、三七、苏木等组成，每克含生药3．22g，由中国中医研究院广安门医院制剂室提供）及拆方的含药血清、化疗药顺氯氨铂对胃癌细胞系侵袭作用的影响，侵袭抑制率（％）：（对照组侵袭细胞数-给药组侵袭细胞数）／对照组侵袭细胞数&;#215;100％，凡抑制率达30％以上，认为有抗侵袭作用。同时采用流式细胞仪通过单克隆抗体标记的方法检测侵袭转移相关黏附蛋白CD9，CD31，CD36，CD42a，CD44，CD49d，CD62p，CD41，凝血酶敏感蛋白及CD63的表达。结果：④各组人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜侵袭作用的抑制率比较：养胃抗瘤冲剂组、益气组、解毒组对人胃癌细胞MGC-803的抑制率均显著高于空白血清组（55．14％．32．43％，36．59％，0，P〈0．05）。益气解毒、益气活血组作用优于单纯解毒、益气、活血组，但两组比较差异无显著性意义（44．86％，41．23％，P〉0．05）。人胃癌细胞MGC-803与BGC-823比较，侵袭作用MGC-803强于BGC-823（空白血清组侵袭细胞数分别为60．75&;#177;4．57，56．35&;#177;3．25），养胃抗瘤冲剂及拆方对MGC-803的抑制作用强于BGC-823，但比较差异无显著性意义（P〉0．05）。（2）各组人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823侵袭转移相关黏附蛋白的表达水平比较：养胃抗瘤冲剂组肿瘤转移黏附蛋白CD63、凝血酶敏感蛋白的表达水平低于空白血清组（药物作用24h：3．30％，3．10％；24．97％，11．50％；48h：0．93％，3．56％；5．78％，10．41％），抑制肿瘤转移的黏附蛋白如CD9的表达水平高于空白血清组（药物作用24h：90．49％，86．23％；48h：94．81％，77．69％）。单纯的活血药在给药早期（24h）则可以促进CD63的表达（33．12％），随着给药时间的延长（48h）则降低CD9表达（30．22％）；益气活血组则可纠正活血药的这种作用（24hCD63：3．55％；48hCD9：82．92％）。结论：人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜均具有侵袭作用，MGC-803的侵袭作用强于BGC-823。养胃抗瘤冲剂及拆方对MGC-803的抗侵袭作用优于BGC-823。养胃抗瘤冲剂抗人胃癌细胞侵袭作用的可能作用途径在于可降低部分促进肿瘤转移的黏附蛋白如CD63、凝血酶敏感蛋白的表达，对抑制肿瘤转移的黏附蛋白如CD9表达有促进作用。     

风疹病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及应用

为了建立产生风疹病毒（ＲＶ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株及检测ＲＶ感染的捕获ＥＬＩＳＡ。用ＲＶ抗原免疫后的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合建立杂交瘤细胞株。用相应单抗建立检测血清中ＲＶ行异性ⅠｇＭ的捕获ＥＬＩＳＡ，并以该法与间接ＥＬＩＳＡ进行了比较实验。获得的杂交瘤细胞５Ｄ５、５Ｇ５、２Ｆ７相应单抗均属ⅠｇＧ１，与纯化ＲＶ抗原有强阳性反应。两法比较，阳性血清Ｘ＾２＝０．２５，Ｐ〈０．     

益精方对少、弱精子症患者精浆活性氧水平影响的研究

目的观察益精方对少、弱精子症患者精浆活性氧水平的影响;方法采用自身前后对照的临床试验设计方法,观察益精方对30例少、弱精子症患者治疗前后精浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、尿酸(UA)的改善情况;结果经服用益精方治疗3个月后,少、弱精子症患者精浆SOD较治疗前提高, MDA较前降低,差别明显,P<0.05;尿酸水平较前也有提高,但在P=0.05水平差别不明显.结论益精方可以降低精浆活性氧水平,提高精浆抗氧化酶含量,这可能是益精方改善精子活力的一个重要途径.     

益气活血软坚解毒含药血清诱导人肝癌细胞系Bel-7402细胞的凋亡

目的:研究益气活血软坚解毒(YHRJ)含药血清对人肝癌细胞系Bel-7402生长抑制及诱导凋亡作用.方法:将YHRJ含药血清作用于人肝癌细胞系Bel-7402细胞,应用MTT检测对肝癌细胞生长抑制作用,倒置显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜等影像学方法观察细胞形态学变化,以及PI染色单染、AnnexinV-PI双染后,流式细胞术检测对细胞周期影响及诱导细胞凋亡程度.结果:MTT法检测结果显示:YHRJ含药血清具有抑制Bel-7402肿瘤细胞生长作用(其中20%YHRJ等效剂量抑制率49.1%,与NS比,P<0.01);荧光显微镜及激光共聚焦显微镜可观察到典型的凋亡形态学变化.流式细胞术检测结果,细胞周期出现G0/G1期阻滞,并出现典型的凋亡峰,AnnexinV-PI双染法检测到早期及中晚期细胞凋亡.结论:YHRJ含药血清有抑制人肝癌细胞系Bel-7402细胞生长并有诱导细胞凋亡作用.