反式二羟环氧苯并芘对人支气管上皮细胞中HER2/neu基因表达的影响

目的探讨环境致癌物苯并(a)芘代谢物反式二羟环氧苯并芘(BPDE)对人支气管上皮细胞HER2/neu基因表达的影响。方法利用半定量RT-PCR、SYBR GreenI实时定量RT-PCR(QRT-PCR)、Western blot及免疫细胞化学方法分别检测经2.0μmol/L反式BPDE诱发人支气管上皮细胞恶性转化细胞(16HBE-T)与对照DMSO溶剂组未恶性转化细胞(16HBE-N)之间HER2/neu基因mRNA和蛋白表达水平的差异,及两组细胞内HER2/neu蛋白表达定位分析。结果经几种不同方法检测反式BPDE恶性转化人支气管上皮细胞中HER2/neu基因mRNA和蛋白水平都比对照溶剂组细胞(16HBE-N)表达显著升高(P<0.05)。HER2/neu蛋白定位在胞膜。结论反式BPDE诱发人支气管上皮细胞恶性转化存在HER2/neu表达增高,其可能与原癌基因HER2/neu被激活作用有关。     

安徽省居民和高危人群艾滋病知识知晓率分析

[目的]了解安徽省居民及高危人群艾滋病(AIDS)预防知识知晓情况,为今后艾滋病的预防和干预提供依据。[方法]采用等容量分层、整群、单纯和机械抽样相结合的抽样方法,分别抽取1201名居民和121名高危人群进行问卷调查。[结果]城镇、农村居民和高危人群艾滋病性病预防知识知晓率分别为77.8%、70.6%和81.8%,。居民知晓率(74.2%)低于高危人群,高危人群对艾滋病感染者和患者的接受度相近(分别为19.4%和16.1%)。娱乐场所性工作者和静脉注射吸毒人员安全套使用率较低,而后者共用注射器比例较高。[结论]应努力寻找适合不同人群的艾滋病教育方式,加强社区宣传和行为干预,消除人们对艾滋病过于恐惧歧视的心理。     

021 微小RNA与艾滋病

本文综述了病毒微小RNA,尤其是HIV-1微小RNA的发现、生物合成、生物学功能以及HIV-1与细胞微小RNA的相互调控作用.     

合肥市HIV-1感染者基因亚型和耐药性突变调查与研究

目的 了解合肥地区艾滋病病毒Ⅰ型(human immundeficiency virus 1,HIV -1)基因亚型及耐药性HIV-1的流行情况,为制定防治措施提供科学依据.方法 应用巢式RT-PCR扩增HIV-1 POL区聚合酶基因,经DNA测序后进行进化系统树分析和重组分析,以确定HIV-1基因亚型和重组体,并与国际耐药数据库比对,辨别耐药性突变位点,结合流行病学资料进行分析.结果 收集93例合肥地区HIV-1感染者,经RT-PCR扩增并获得有效基因亚型序列77例,基因分型以CRF01 _AE重组亚型为主,有46例(59.7％);其次是CRF07_BC亚型23例(29.9％)、B亚型6例(7.8％)和CRF08_BC亚型2例(2.6％).耐药分析结果表明,在65例未治疗人群中,发现1例(1.5％)蛋白酶抑制剂(PIs)主要耐药基因突变,2例(3.1％)反转录酶抑制剂( RTIs)耐药基因突变.抗病毒治疗组出现耐药突变位点6例(50.0％)高于非治疗组3例(4.6％)(x2=20.21,P＜0.001).结论 本研究分析了合肥地区HIV-1基因亚型和耐药突变的流行情况,初步了解合肥地区的HIV-1遗传变异多样性并建立耐药检测体系,对合肥地区的艾滋病预防和控制工作有一定指导意义.     

安徽省一线抗反转录病毒治疗失败的AIDS病人的耐药基因变异分析

目的了解安徽省一线抗反转录病毒治疗失败的艾滋病(AIDS)病人耐药基因变异情况。方法调查一线抗反转录病毒治疗失败的AIDS病人的人口学及流行病学特征,检测CD4及病毒载量,对病毒载量高于1 000拷贝/ml的病人进行基因型耐药检测。结果共调查61例AIDS病人,其中有41例病毒载量高于1 000拷贝/ml。40例成功扩增序列,基因型耐药检测的成功率为97.56%(40/41)。在40例AIDS病人中,核苷类反转录酶抑制剂(NRTI)相关耐药基因突变率居于前三位的,分别是M184V、T215Y和M41L,非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTI)相关基因耐药突变率居于前三位的,分别是K103N、Y181C和G190A,没有发现与蛋白酶抑制剂(PI)相关耐药基因突变。结论一线抗反转录病毒治疗失败的主要原因是出现NRTI和NNRTI耐药突变。在选择二线治疗方案时,要充分利用基因耐药检测评估抗反转录病毒药物的敏感性,尽量使用对HIV敏感的抗病毒药物,增加PI类药物,避免交叉耐药带来的治疗失败。     

合肥市HIV/AIDS未治疗人群的耐药基因及亚型分析

目的了解合肥地区HIV/AIDS未治疗人群基因亚型和原发性耐药情况。方法应用巢式RT-PCR扩增HIV-1 pol区聚合酶基因,经DNA测序后进行系统进化树分析和耐药性分析。结果收集79例合肥地区HIV/AIDS未治疗者,经RT-PCR扩增并获得有效基因亚型序列65例,基因分型以CRF01-AE重组亚型最多39例（60.0%）;其次依次是CRF07-BC 21例（32.3%）、B亚型4例（6.2%）和CRF08-BC1例（1.5%）。1例蛋白酶抑制剂（PIs）主要耐药基因突变,2例反转录酶抑制剂（RTIs）耐药基因突变。总耐药突变率为4.6%（3/65）。结论当前合肥市主要的HIV-1流行亚型是CRF01-AE和CRF07-BC,HIV原发性耐药的发生率在国内处于较低水平。     

安徽省10例新报告男性青年学生HIV/AIDS高危行为及知识获取调查

目的 了解新报告青年学生HIV感染者/艾滋病病人(HIV/AIDS)确诊前性行为和艾滋病知识获取情况,为制定青年学生艾滋病防治工作政策和措施提供参考依据。方法 根据2020年1—7月安徽省报告的青年学生HIV/AIDS病例,采用定性访谈对病例进行调查,调查内容包括艾滋病感染相关高危行为及防控知识获取情况。结果共访谈10例新报告男性青年学生HIV/AIDS,平均年龄(19.80±1.48)岁,均认为可能是同性性行为导致感染HIV。访谈对象首次同性性行为平均年龄为(17.80±1.14)岁,认识性伴的方式主要是Blued软件,在HIV确诊前均曾与性伴发生过无保护性行为,多数访谈对象自报性伴数量超过5个。互联网、公众号等多媒体形式和学校是访谈对象艾滋病知识获取的主要途径并且较易接受。结论 男性青年学生在确诊前均发生过男性同性性行为,互联网是学生了解艾滋病知识的重要途径。应充分利用互联网优势,推进学校健康教育工作,加强学生艾滋病防治知识宣传。     

小发夹RNA抑制人上皮生长因子受体-2基因表达细胞株的构建

目的 在经反式二羟环氧苯并芘(BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞基础上建立一种载体介导的小发夹RNA(shRNA)抑制人上皮生长因子受体-2(HER2/neu)表达的稳定细胞株.方法 构建靶向干扰HER2/neu shRNA逆转录病毒载体pSIREN-RetroQ-neu,经酶切及测序鉴定后,将重组表达载体经脂质体介导入反式BPDE恶性转化细胞中,同时以阴性片段重组载体转染细胞(阴性对照)和空白细胞(16HBE-T)做对照,经嘌呤霉素筛选阳性转染细胞株.半定量RT-PCR和Westernblotting技术分别检测分析各组细胞中HER2/neu基因mRNA和蛋白表达差异.结果 获得载体介导靶向抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu基因表达的细胞株.pSIREN-RelroQ-neu阳性转染细胞组分别比较阴性对照和空白细胞组HER2/neu mRNA表达量均下降(平均灰度值分别为0.114±0.003、0.186±0.001、0.182±0.015),其差异有统计学意义(t值分别为39.154、7.564,P值均<0.05),而阴性与空白对照组间相比差异无统计学意义(t=-0.409,P>0.05).pSIREN-RetroQ-neu转染细胞组相比阴性对照和空白细胞组HER2/neu蛋白表达明显下降,其抑制率分别达40%和39%.结论 成功构建pSIREN-RetroQ-neu重组质粒,并能有效抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu表达.     

微小RNA与艾滋病

本文综述了病毒微小RNA,尤其是HIV-1微小RNA的发现、生物合成、生物学功能以及HIV-1与细胞微小RNA的相互调控作用。