RhoB对胃癌细胞SGC7901的负性调控作用

目的研究RhoB对胃癌细胞SGC7901增殖调控作用。方法用PCR扩增出RhoB的全长cDNA，构建RhoB可诱导表达载体pGene／V5-His-RhoB；脂质体介导法将调控载体pSwitch及诱导表达载体pGene／V5-His-RhoB先后转入人胃癌细胞SGC7901中，筛选出稳定抗性克隆；Western blot检测米非斯酮诱导后转染细胞中RhoB蛋白的表达。用MTT assay检测RhoB转染细胞株的生长速度、双苯并咪唑染料(Hoechst 33258)活细胞吸收分析法、流式细胞仪(FCM)检测RhoB对胃癌细胞凋亡指数作用。结果成功构建RhoB可诱导真核表达载体pGene／V5-His-RhoB，并经酶切和测序鉴定；转染后经潮霉素B和Zeocin筛选出稳定抗性克隆SGC7901／RhoB；米非斯酮诱导出RhoB蛋白表达，在诱导24小时后蛋白表达最高；细胞增殖试验结果显示，RhoB表达上调后胃癌细胞增殖受到抑制；细胞凋亡检测提示高表达RhoB可明显诱导胃癌细胞凋亡。结论RhoB对胃癌细胞增殖具有负性调控作用，可诱导胃癌细胞出现凋亡。     

胃癌组织中COX-2和VEGF表达及其相关性研究

目的探讨环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)和血管内皮生长因子(vascularendothelial growthfactor,VEGF)在人胃癌组织中表达及其相关性。方法应用免疫组织化学SABC法检测53例人胃癌组织中COX-2、VEGF和CD34的表达,并以40例正常胃粘膜标本作为对照。对CD34阳性血管进行微血管密度(microvesseldensity,MVD)计数。对COX-2和VEGF的表达采用半定量计分法判定,并结合临床资料进行统计学分析。结果53例人胃癌组织中,COX-2表达阳性者44例,阳性率为83.0%;VEGF表达阳性者45例,阳性率为84.9%。COX-2表达与VEGF表达相关显著(P<0.05)。并且,COX-2和VEGF的表达与TNM分期(P<0.05,P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01,P<0.05)和远处转移(P<0.01,P<0.05)相关。COX-2/VEGF同高表达组中MVD值(79.5±25.8)高于COX-2/VEGF同低表达组中的MVD值(45.0±13.9),差异非常显著(P<0.01)。结论胃癌组织中COX-2与VEGF共表达,并相互协同促进肿瘤血管生成和转移。     

磁共振成像纹理特征对局部进展期直肠癌新辅助放化疗病理反应状态的预测价值

目的:探讨磁共振成像纹理特征对局部进展期直肠癌新辅助放化疗病理反应状态的预测价值。方法:回顾性分析58例局部进展期直肠癌患者的临床及影像学资料,利用MaZda软件于T2WI图像肿瘤最大层面手动勾画ROI,分别在新辅助放化疗前、后的图像上各提取9个一级、11个二级纹理特征参数,对参数进行统计学分析,比较pCR组与非pCR组在新辅助放化疗前、后纹理特征上的差别。结果:pCR组与非pCR组之间,治疗前7个二级纹理特征(pre-Correlat、InvDfMom、SumEntrp、DifEntrp、DifVarnc、Entropy、AngScMom)差异有统计学意义,治疗后3个一级纹理特征(post-Variance、Perc 90%、Perc 99%)、9个二级纹理特征(postContrast、SumOfsqs、InvDfMom、SumAverg、SumVarnc、SumEntrp、DifEntrp、DifVarnc、Entropy)差异有统计学意义。在预测pCR方面,单个纹理特征的ROC曲线结果显示,治疗前AUC值在0.632~0.835之间,治疗后AUC值在0.665~0.852之间,分别以DifVarnc、DifEntrp效能最高。采用多变量logistic回归分析预测pCR时,治疗前及治疗后的独立预测因子均是DifEntrp,治疗前(P=0.005)AUC值为0.833,治疗后(P=0.004)AUC值为0.852。结论:基于T2WI图像的纹理特征有助于预测局部进展期直肠癌新辅助放化疗的疗效,而二级纹理特征的预测效能高于一级纹理特征,nCRT治疗后为疗效预测的更佳时期。     

假性胰腺囊肿的内镜治疗

目的 观察经十二指肠乳头引流治疗胰腺假性囊肿的疗效以及并发症，探讨新的微创治疗方法。方法 选择胰腺假性囊肿患者8例，均有2次以上外科手术史，再次外科手术难度较大。经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)后，十二指肠乳头、主胰管括约肌切开，行内引流管置人或主胰管探条扩张治疗，囊肿消失后经内镜取出内引流管。结果 ERCP提示，3例囊肿与主胰管相通，l例囊肿压迫造成胆总管下段狭窄梗阻。置入内引流管5例；探条扩张治疗3例。术后l～4个月囊肿完全消失7例；l例囊肿缩小约l／3，临床症状消失，随访6个月囊肿未再缩小，转外科手术治疗。术后2例出现一过性血、尿淀粉酶升高，无严重并发症发生。结论：ERCP及其派生的治疗技术，治疗胰腺假性囊肿有效、安全，可作为胰腺假性囊肿的微创治疗方法。     

RhoE在胃肠道肿瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨RhoE在胃癌、结肠癌以及相应癌旁组织中的表达情况及临床意义. 方法:采用免疫组化的方法检测74例胃癌,32例结肠癌及相应癌旁组织中RhoE的表达水平.结果:RhoE在胃肠道正常组织中普遍表达,在腺体中尤为明显,但在肿瘤组织表达低下或缺失. RhoE在胃癌组织中的染色平均值为1.99±0.28,在相应癌旁组织中为8.64±0.39,明显高于相应肿瘤组织(P<0.005),并且随着肿瘤分化程度的降低染色强度有下降的趋势(P<0.005).RhoE在32例结肠癌组织中的染色平均值为2.45±0.35,在相应癌旁组织中为6.55±0.63,明显高于相应肿瘤组织(P<0.005),同样有染色强度随着肿瘤分化程度的降低而降低的趋势(P<0.005). 结论:RhoE在肿瘤组织中表达明显下降,表明它在肿瘤的发生发展中起着重要的负性调控作用,结合最新的研究成果我们推断RhoE很可能是一个重要的抑癌基因.     

单克隆抗体MGb2和LAK细胞的协同抗胃癌作用

本研究探讨了成纤维细胞介导的G-CSF基因疗法联合应用IL-2基因疗法及时对小鼠I期肾癌的治疗作用。经NIH3T3-IL-2基困疗法．NIH3T3-G-CSF基因疗法单独治疗后的荷瘤小鼠存话期明显延长，而经以上两者联合治疗后的荷癌小鼠存活期的延长更为明显，且有75％荷瘤小鼠长期存活。对经G-CSF基因疗法及IL-2基因疗法联合治疗后的荷瘤小鼠体内抗肿瘤免疫功能的检测表明，经治疗后第14天，荷瘤小鼠睥脏明显增大，睥脏淋巴细胞数量明显增多；肿瘤局部的常规病理检查可见数量较多的嗜酸性粒细胞浸润。荷瘤小鼠睥细胞NK活性、经诱导后的LAK话性及CTL，杀伤活性均明显升高，小鼠腹腔巨噬细胞杀伤活性在NIH3T3-IL-2基因疗法治疗组升高．而在NIH3T3-G-CSF基因疗法组未见明显升高。以上结果表明．联合应用成纤维细胞介导的G-CSF基因疗法与IL-2基因疗法可因对小鼠体内抗肿瘤免疫功能的联合增强作用而取得更佳的抗肿瘤效果。     

RhoA亚家族与胃癌细胞恶性表型的关系

目的:研究RhoA亚家族成员RhoA、RhoB和RhoC对胃癌细胞恶性表型的影响。方法:系用脂质体介导法分别将编码正显性RhoA突变体(V14RhoA)与野生型RhoB(wt-RhoB)和RhoC(wt-RhoC)的真核表达载体转染入胃癌SGC7901细胞中,筛选出稳定抗性克隆,并检测转染细胞的生物学行为的变化。结果:RhoA活性增强可促进胃癌细胞的增殖,而降低对化疗药物的敏感性;上调RhoB表达抑制胃癌细胞的增殖,增强对化疗药物的敏感性;上调表达RhoC则对胃癌细胞的增殖及对化疗药物的敏感性无明显的影响,但可明显促进胃癌细胞的迁移。结论:RhoA亚家族分子参与了胃癌生长、耐药及转移等多个方面,其家族中不同分子作用不同。     

胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法

目的建立逆转录一环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应（LAMP）扩增转移相关基因Serpinel，扩增条件为63℃保温30min，扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果RT—LAMP能特异性快速的扩增目的基因。结论RT—LAMP能因其特异，快速，高效的优点可以广泛运用于肿瘤转移相关基因的检测，对临床早期诊断提供标准。