人血管生成素的基因克隆及真核表达

血管生成素 (angiogenin ,ANG)是存在于正常血浆及实体肿瘤组织中的一种属于核糖核酸酶超家族[1] ,分子量为 14 1kD、pI9 5的蛋白质 ,基因定位于染色体 14q11。ANG是一种能有效促进新生血管形成的刺激因子 ,具有很强的促血管生成作用。因此开展ANG的相关研究在损伤修复及组织工程学中极有意义。本文旨在构建ANG真核表达载体 ,转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,研究其在HUVEC中的表达情况 ,为进一步研究ANG对HUVEC生长状况的影响以及ANG在组织工程学中的应用奠定基础。1　材料与方法1 1　材料　EcoRⅠ、BamHⅠ为Promega产品 ,…     

抗SARS-CoV抗原的人源Fab段噬菌体抗体库的构建

目的 :利用抗SARS冠状病毒IgG抗体阳性的SARS康复患者外周血淋巴细胞 ,构建人源Fab段抗体文库。方法 :制备外周血淋巴细胞总RNA ,逆转录成cDNA。以其为模板 ,利用针对家族特异性Ig基因的引物扩增重链Fd段和轻链基因 ,并重组到噬菌粒载体pComb3中 ,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL 1Blue,酶切鉴定抗体库的重组率 ,并测定噬菌体抗体库的库容量。结果 :构建了源于SARS康复患者血清中抗Fab段的抗体文库 ,轻链、重链Fd段基因的重组率分别为91%和 75 % ,库容量为 7.2 3× 10 7。结论 :成功地构建了抗SARS CoV抗原的人源Fab段噬菌体抗体库     

Stealth siRNA对HBV复制和表达的抑制

目的设计siRNA并检测其对HBV的抑制作用。方法针对HBV基因组设计siRNA基因序列，化学修饰合成3种Stealth siRNA，转染带有HBV的2．2．15细胞，ELISA法检测其对HBV复制和表达的影响。结果3种Stealth siRNA对HBV的复制和表达在不同时间有不同程度的抑制作用。72h后就可检测出抑制，其中siRNA508效果最显著。结论合成的Stealth siRNA可以抑制HBV的复制和表达，有望成为控制HBV感染的一种手段。     

右美托咪定联合缺血预处理对心脏疾病患者非心脏手术心肌和肾损伤的保护作用

目的探讨右美托咪定联合缺血预处理对心脏疾病患者非心脏手术心肌和肾损伤的保护作用。方法选取2017年5月至2019年1月在我院拟行手术治疗的86例伴有心脏疾病的患者,采用随机数表法分为观察组(43例)及对照组(43例),所有患者均使用静吸复合全麻,观察组采用右美托咪定联合缺血预处理,对照组使用生理盐水。比较两组术中不良心血管事件的发生率,围手术期肌钙蛋白(cTnI)和肌酐(CR)水平,术后心肾不良反应发生率。结果两组术中低血压、高血压、心动过缓的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组心动过速(2.33%vs.18.60%,χ^2=6.08,P=0.02)及心肌缺血(11.63%vs.53.49%,χ^2=17.16,P<0.01)的发生率低于对照组。入室时两组cTnI及Cr水平比较差异无统计学意义(P>0.05),术后两组cTnI及Cr水平均较入室时显著提高(P<0.05);观察组在术后1 h、8 h、24 h的cTnI水平显著低于对照组(P<0.05或P<0.01),在术后8 h、24 h的Cr水平低于对照组(P<0.01)。观察组术后急性肾损伤(AKI)(20.93%vs.44.19%)及室性心律失常(39.53%vs.83.72%)的发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论右美托咪定联合缺血预处理可有效保护心脏患者非心脏手术中的心肾功能。     

泪道冲洗探通治疗新生儿泪囊炎的护理体会

新生儿泪囊炎是一种常见的小儿先天性眼科疾病，其发病率较高，约占新生儿的6％。临床主要表现为新生儿出生不久即出现溢泪、伴脓性分泌物。对于保守治疗无效的病例，泪道探通是治疗本病最有效的方法。我院自2009年6月-12月，     

重组人BMP-2生物活性的鉴定

目的鉴定在大肠杆菌中表达的重组人骨形态发生蛋白2（recombinant human bone morphogeneticprotein-2,rhBMP-2）的生物学活性。方法构建重组人BMP-2的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白,纯化复性后,采用细胞及动物实验对其生物活性进行鉴定。结果细胞实验表明,重组人BMP-2具有诱导MC3T3-E1前成骨细胞向成骨细胞分化的特性。动物实验显示,重组人BMP-2在大鼠肌肉内具有诱导异位成骨功能。结论制备的重组人BMP-2具有较好的生物学活性。     

血清转铁蛋白受体检测在诊断妊娠缺铁性贫血中的应用

可溶性血清转铁蛋白受体 (serumtransferrinrecep tor,sTfR)是参与机体铁代谢的重要蛋白 ,能够反映细胞对铁的需要量 ,是检测人体缺铁性贫血的一个较新的指标。本实验室采用sTfR指标诊断妊娠妇女合并缺铁性贫血 ,以验证sTfR检测诊断妊娠合并缺铁性贫血的可行性 ,并对临床补铁作合理指导。1　资料与方法1.1　一般资料　在 2 0 0 1年 1～ 6月来我院产科正规产前检查的妊娠妇女中 ,随机选择妊娠合并贫血妇女30例 (贫血组 )和正常妊娠妇女 30例 (正常组 ) ,年龄2 4～ 30岁 ,平均 2 7岁 ,孕龄 32～ 36周 ,平均 34周 ,均未合并其它疾病。其标准…     

ET和NO在脑出血中的变化以及硫酸镁的干预作用

目的阐明脑出血(ICH)患者血浆内皮素(ET)和血清一氧化氮(NO)的动态变化规律,并用硫酸镁干预治疗,探讨镁离子在脑出血中的神经保护作用.方法将45例ICH患者分为两组,出血组25例,给予临床常规治疗;出血干预组20例,加用25%的硫酸镁20ml静脉滴注.两组患者分别检测起病第1、3、7、14d的血浆ET和血清NO水平,并且分析血浆ET、NO变化水平与出血部位、出血量的大小、以及神经功能缺损评分的相关性.结果出血组患者血浆ET水平在起病第1、3、7d明显高于对照组(P<0.05),尤以第3d为高峰,以后逐渐降低,第14d接近对照组水平(P>0.05),且ET水平在起病第3d随出血量的增大而升高,而与病情轻重及出血部位无明显相关性.出血干预组第3、7d血浆ET水平均低于出血组(P<0.05),且ET水平下降快,至第7d已接近对照组水平(P>0.05).出血组患者血清NO水平在起病第1d即达高峰,起病第1、3d NO水平与对照组相比显著升高(P<0.05),以后逐渐降低,至第7d恢复至对照组水平.NO水平与病情轻重、出血部位以及出血量的大小无明显相关性.出血干预组与出血组相比亦无显著性差异(P>0.05).ET与NO之间无明显相关性.结论 ICH患者急性起病后,外周血中ET和NO均有显著变化,说明二者参与了ICH的病理生理过程,其中血浆ET水平的升高程度与脑出血量有一定关系.用硫酸镁干预后,ET水平较非干预组显著降低,表明镁离子在ICH的急性期有一定的神经保护作用.     

广东省2017－2018年冬季流感流行特征研究

目的 分析广东省2017-2018年冬季流感流行特征,为流感季节性多样化的防控应对提供进一步的科学依据。方法 收集广东省2016年1月至2018年4月每周流感监测数据,分析2017-2018年冬季28家哨点医院门诊流感样病例（ILI）就诊比例、流感病毒阳性率、病原型别构成和暴发疫情特点,并使用χ²检验和Fisher确切概率法与2016年春季、2017年夏季流行期比较。结果 2017-2018年冬季ILI就诊比例平均水平为4.99%（157 235/3 149 656）,超过既往5年同期水平。门诊ILI和住院严重急性呼吸道感染病例（SARI）中,流感病毒阳性率分别为28.33%（2 137/7 543）和14.93%（256/1 715）,乙型Yamagata亚型分别占70.43%（1 505/2 137）和73.05%（187/256）。2017-2018年冬季流感暴发疫情257起,小学占82.49%（212/257）。冬、春季流感6~14岁儿童病例阳性率高于夏季（P<0.05）。夏季≥ 60岁老年人病例阳性率高于冬、春两季（P<0.05）。结论 广东省2017-2018年冬季流感流行主要由流感病毒乙型Yamagata亚型导致。针对流行季节多样性特点,广东省需要完善监测和提高流感疫苗接种率,以利于在不同季节流行有效防控。     

三种诊断缺铁性贫血检测指标的诊断价值比较

目的 :比较可溶性转铁蛋白受体 (sTfR)、血清铁蛋白 (SF)和血清铁 (SI)三种诊断指标在诊断缺铁性贫血中的诊断价值。方法 :分别采用ELISA法、微粒子免疫捕捉发光法和比色法 ,测定正常组 4 6人和贫血组 30例 (排除合并其他疾病 )的sTfR、SF和SI。结果 :正常组sTfR、SF和SI平均值分别为 2 4 83±6 18nmol/L、2 2 71± 19 35ng/L和 12 73± 4 6 1mmol/L ,贫血病组sTfR、SF和SI的平均值分别为31 37± 6 8nmol/L、14 2 4± 17 99ng/L和 9 5 3± 4 2 6mmol/L。经统计学处理 ,正常组与贫血组比较 ,除SF外 ,sTfR、SI差异均显著 (P <0 0 5 )。ROC曲线显示 :sTfR、SF和SI曲线下面积分别为 0 778、0 2 4 3、0 30 4。结论 :sTfR在缺铁性贫血诊断中的敏感性和特异性最高 ,具有更好的诊断价值