淫羊藿苷对大鼠骨折模型愈合及转化生长因子β1、血管内皮生长因子和骨形态发生蛋白-7表达的影响

目的:探讨淫羊藿苷对大鼠骨折模型的愈合作用及转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响。方法:将45只成年SPF级雄性SD大鼠均分为模型组(model组)、淫羊藿苷低剂量组(ICA-L组)和淫羊藿苷高剂量组(ICA-H组),每组都建立骨折模型;X线片观察各组大鼠骨折线的变化及达到愈合的时间;micro-CT检测各组大鼠的骨密度(BMD)和骨体积分数(BV/TV);ELISA检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、TGF-β1、VEGF和BMP-7的表达;Western blotting检测各组大鼠骨组织中TGF-β1、VEGF和BMP-7蛋白的表达。结果:淫羊藿苷使骨折大鼠在第7周时基本完全愈合,BMD和BV/TV均升高(P0.05);与model组相比,ICA-L和ICA-H组大鼠血清中IL-6、TNF-α的表达水平均下降,IL-10的表达水平升高,ALP活性升高,骨钙素含量升高,差异有统计学意义(P0.05);淫羊藿苷使大鼠血清中TGF-β1、VEGF和BMP-7表达水平上升,骨组织中TGF-β1、VEGF和BMP-7蛋白表达水平上调,差异有统计学意义(P0.05)。结论:淫羊藿苷使大鼠骨折愈合程度加快,可能与TGF-β1、VEGF和BMP-7的表达有关。     

虫草素通过抑制氧化应激和炎症反应对骨折愈合的影响研究

[目的]探讨虫草素治疗骨折愈合的作用及机制.[方法]50只SPF级SD大鼠(240～270 g),采用标准的大鼠闭合性股骨横行骨折内固定模型,并腹腔注射给予虫草素治疗;采用微型CT扫描仪(Micro-CT)对骨折大鼠股骨进行放射学检测,并用骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb.Th),骨小梁数(Tb.N)和骨密度...     

PDGF-BB通过外泌体促进人骨肉瘤的血管新生

目的： 探索PDGF-BB是否可以通过外泌体传递,并且验证其在人骨肉瘤中的促血管新生的功能。方法： 分离多种人骨肉瘤细胞中的外泌体,WB法检测PDGF-BB在人骨肉瘤细胞及其外泌体中的表达,将骨肉瘤SJSA-1细胞来源的外泌体与HUVEC共孵育,免疫荧光和激光共聚焦扫描显微镜观察外泌体PDGF-BB进入细胞的方式;慢病毒感染法分别构建PDGF-BB过表达或敲低的SJSA-1细胞系,将其分离出的外泌体与HUVEC共孵育,微管形成实验检测其对血管新生的影响;构建SJSA-1细胞裸鼠移植瘤模型,回输过表达或敲低PDGF-BB的SJSA-1细胞来源的外泌体,观察其对肿瘤生长的影响。结果： 成功分离出骨肉瘤细胞外泌体,并证实其携带大量的PDGF-BB,可通过细胞内吞进入HUVEC。成功构建PDGF-BB过表达或敲低的SJSA-1细胞系,并分离出携带相应水平PDGF-BB的外泌体,与对照组相比,PDGF-BB含量高的外泌体可以显著促进HUVEC的血管生成（P<0.01,t=13.51）和移植瘤生长（P<0.01）,而PDGF-BB含量低的外泌体促血管生成能力减弱（P<0.01,t=8.226）并抑制移植瘤的生长（P<0.01）。结论： 骨肉瘤细胞分泌的外泌体PDGF-BB可以直接被HUVEC摄取,诱导肿瘤血管生成,从而促进骨肉瘤生长。     

PI3K抑制剂ZSTK474增强水泡性口炎病毒Δ51在骨肉瘤中的抗肿瘤作用

目的 探讨PI3K抑制剂联合溶瘤病毒是否对骨肉瘤具有溶瘤作用。 方法 通过MTT法检测细胞活性,寻找可以增强水泡性口炎病毒Δ51（VSVΔ51）抗肿瘤活性的抑制剂;通过电子显微镜观察内质网肿胀以及Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达情况,探讨其增强溶瘤活性的机制;通过裸鼠移植瘤模型抑瘤实验验证PI3K抑制剂ZSTK474联合溶瘤病毒VSVΔ51疗法的肿瘤清除能力,并通过免疫组织化学实验验证肿瘤细胞凋亡情况。 结果 PI3K抑制剂可以作为溶瘤病毒VSVΔ51的增效剂,其通过加强肿瘤细胞内质网应激促进骨肉瘤细胞凋亡（P＜0.01）。体内实验也表明,PI3K抑制剂联合溶瘤病毒VSVΔ51可以显著增加对骨肉瘤的溶瘤效果（P＜0.001）,而且这种联合疗法增强了肿瘤中免疫细胞的浸润（P＜0.001）。 结论 PI3K抑制剂联合溶瘤病毒是一种潜在的骨肉瘤治疗方法。