转化医学在肿瘤学教学中的应用

转化医学被认为是连接基础学科与临床学科的桥梁,是一个循环式的研究体系。将转化医学理念引入肿瘤学教学中,优化整合基础与临床课程,突出重点和实用,有利于学生对肿瘤学知识的掌握,提高学习效率。因此将转化医学理念引入肿瘤学教学培养转化医学人才,更好地为人民健康服务。     

肺癌P53基因治疗的实验研究和预后判断基因标记

肺癌死亡率在发达国家居癌死亡的首位。我国1992年流行病学调查资料显示肺癌死亡呈上升趋势,死亡率在大城市占癌死亡第一位。流行病学预测表明,今后30年肺癌死亡将继续增长,成为中国居民的主要死因。尽管近年来肺癌诊断、治疗方法不断改进,但肺癌死亡率仍未明显改观,近30年来,肺癌病人5年存活率仅从5％上升到13％。2/3术后病人5年内相继死亡。因此寻找新的诊断和治疗方法已是迫在眉睫的任务。随着对肺癌分子病因的深入了解和分子生物学方法的发展,研究基因诊断和治疗已成为可能,     

制备两种P53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达

目的P53作为转录因子在细胞应激时呈活化型,调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长,通常,通过各种机制P53呈非活化状态,其中包括P53C-末端负调控序列的作用。该研究目的是制备携带垒长和缺失这些负调控序列P53两种重组腺病毒和用流式细胞仪散点图（Flow cytometry scatter plot,FCM）检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白（Green fluorescence protein,GFP）表达。材料和方法利用pAdEasy-Track载体系统,构建两种P53重组质粒并在细菌中产生重组体,转染L293细胞产生三种重组腺病毒。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞,FCM分析GFP表达。结果测序证明重组腺病毒：Ad—P53（del）缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区,Ad—P53（wtp）没有P53碱基缺失。Ad（empty carrier）无P53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端P53和全长p53两种重组腺病毒,Ad—p53（del）,Ad-p53（wtp）及空载体Ad-（empty）。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠,可定量外源GFP表达,为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。     

干扰COX-2基因表达对人肺腺癌A2细胞体外恶性增殖的影响

背景与目的 COX-2在多种肿瘤组织中高表达,参与了肿瘤的发生发展,RNA干扰(RNAi)技术是一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段.本研究应用RNAi技术研究干扰COX-2基因表达的抑制效果及抑制COX-2基因表达对A2细胞体外恶性增殖的影响.方法 以COX-2为靶点,构建3个带有人U6启动子的COX-2小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)表达载体.用脂质体lipofectamine介导,分别将3个siRNA表达载体及空载体转染到COX-2表达阳性的A2细胞,建立转染细胞株.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测COX-2表达水平的变化.通过细胞生长曲线、集落形成试验研究干扰COX-2基因表达对A2细胞体外增殖的影响.结果 经过PCR扩增、内切酶鉴定、DNA测序和BLAST比对证实3个siRNA和U6启动子序列正确并准确克隆到pEGFP载体.转染细胞株分别命名为A2-3、A2-7、A2-10和A2-P.转染后24 h、48 h、72 h,A2-P细胞均有绿色荧光表达,而A2-3、A2-7、A2-10细胞均未观察到绿色荧光.RT-PCR和Western blot结果显示,3个siRNA表达载体均发挥作用,COX-2表达受到抑制.与A2细胞比较,A2-3、A2-7、A2-10细胞的COX-2 mRNA表达量分别降低15.6%、20.4%和64.2%,COX-2蛋白表达量分别降低23.7%、36.7%和60.2%.细胞生长曲线、集落形成试验的结果显示,A2-10细胞生长减慢,集落形成率减少,而A2-3和A2-7细胞生长没有明显的改变.结论 应用RNAi技术熄灭COX-2基因表达对A2细胞的体外恶性增殖有明显的抑制作用.     

从小儿体质谈小儿慎用寒凉药

从小儿体质角度，谈儿科临床上用药弊端，主张慎用寒凉之品，维护小儿“稚阴稚阳”。     

人肺癌标本中c—myc癌基因扩增的研究

分子生物学在医学领域中的应用日渐扩展,从基因水平来研究肿瘤的发生、发展成为可能,并已取得一定的进展,现已明了,myc基因的扩增是人肺癌细胞的重要的分子改变之一。木文用分子杂交的方法发现15例非癌的正常肺组织的c-myc基因     

当归拈痛汤的临床应用

当归拈痛汤为金元时期的医学家李东垣所创制,载于《兰室秘藏》一书。“拈”是用指取物的意思,极言本方止痛效果之佳,如同信手拈来。全方的药物组成:羌活、茵陈、炙甘草各15 g,猪苓、泽泻、防风、当归各9 g,,升麻、葛根、苍术、白术、苦参、人参、黄芩、知母各6 g。原方本是煮散     

2型糖尿病患者血糖控制对炎性因子的影响

目的研究2型糖尿病患者炎性因子与血糖控制质量的关系。方法选择临床确诊的2型糖尿病患者160例．其中男性84例,女性76例;年龄42～73岁．平均年龄63．50岁。根据血糖控制程度分为2组：血糖控制良好组（92例）和血糖控制不良组（68例）。同时选择100例健康人为对照组,其中男性55例,女性45例;年龄45～75岁,平均年龄62．80岁。所有参与者的细胞因子——白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素8（IL-8）浓度应用液体芯片方法检测。结果糖尿病组IL-6、TNF-α、IL-8均显著高于对照组（P〈0．01）,且血糖控制不良组IL-6、TNF-α、IL-8亦显著高于血糖控制良好组（P〈0．01）。但IL-1β浓度在对照组与糖尿病组间差异无统计学意义．且与血糖控制程度无关。结论糖尿病患者的细胞因子处于低级别炎症状态．且血糖控制影响炎症水平。     

非小细胞肺癌患者中Survivin抗体的临床意义及诊断价值

背景与目的 在世界范围内,恶性肿瘤已经成为威胁人类健康的主要原因,且其发病率和死亡率居高不下.随着人们对肿瘤标志物研究的不断深入,肿瘤相关的自身抗体成为了研究热点.肺癌患者血清中Survivin 自身抗体的临床意义目前还存在争议.本研究旨在探讨Survivin自身抗体在非小细胞肺癌患者血清中可能的临床应用价值.方法 采用RT-PCR方法获得Survivin cDNA,构建原核表达载体pET30a(+)/Survivin,亲和层析方法纯化蛋白,SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定,建立基于Survivin融合蛋白的间接ELISA方法,对89例健康志愿者、215例非小细胞肺癌患者以及20例肺部良性疾病患者的血清样本进行检测.结果 重组Survivin融合蛋白在BL21(DE3)中以包涵体形式高效表达,间接ELISA方法检测Survivin自身抗体在非小细胞肺癌患者血清中的阳性率为19.5%,特异性为88.9%.Survivin自身抗体与非小细胞肺癌患者的肿瘤大小、远处转移间存在相关性(P<0.05),Survivin自身抗体与CEA在非小细胞肺癌患者中联合检测的阳性率明显高于CEA与NSE、SCC、CYFRA、ProGRP联合检测的阳性率,这大大提高了非小细胞肺癌检测的敏感性.结论 本研究成功构建原核表达载体pET30a(+)/Survivin,并建立检测Survivin自身抗体的间接ELISA方法,Survivin身抗体与肺癌肿瘤大小、远处转移间的相关性及在非小细胞肺癌患者联合检测中的重要作用,为Survivin自身抗体在肺癌中的临床应用提供了线索和依据.