3,3'-二吲哚甲烷对过氧化氢诱导人角质形成细胞氧化应激的预防作用及其机制

目的:探究3,3'-二吲哚甲烷(DIM)对过氧化氢(H₂O₂)诱导人角质形成细胞(HaCaT)氧化应激作用的预防效应及可能机制。方法:体外培养HaCaT细胞,用H₂O₂建立氧化应激模型。采用CCK-8法检测不同浓度(1~20 μmol/L)DIM对HaCaT细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测DIM作用前后细胞内活性氧自由基(ROS)含量的变化;Western blot检测不同浓度DIM(0、5、10 μmol/L)对HaCaT氧化应激相关蛋白核因子(NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)磷酸化表达水平的影响。结果:成功建立了HaCaT氧化应激模型。CCK-8法研究结果显示1~10 μmol/L DIM对HaCaT细胞无明显毒性作用(P>0.05);流式细胞术检测结果表明10 μmol/L DIM预处理可有效预防由H₂O₂诱导的HaCaT内ROS产生(P<0.05);Western blot检测结果显示,随着DIM浓度的增加,HaCaT中p38-MAPK、JNK和NF-κB磷酸化蛋白表达水平均逐渐降低(P均<0.05)。结论:DIM预处理可减弱HaCaT中由H₂O₂引起的氧化应激,其机制可能是通过抑制ROS的产生及对NF-κB、MAPK家族等氧化应激相关蛋白表达的调控作用来实现的,提示DIM可作为预防或改善氧化应激型皮肤细胞损伤的一种有效药物。     

大鼠2型糖尿病脑海马组织损伤模型的构建

目的 探索大鼠2型糖尿病脑海马组织损伤模型的制备方法。方法 雄性4周龄SD大鼠检疫合格后给予高糖喂养2周,各组分别经尾静脉注射链脲佐霉素（STZ）枸橼酸盐溶液0、10、20、40 mg·kg·bw,每周注射1次,注射4次后继续观察12周结束实验,取海马组织进行苏森木精-伊红（HE）染色及bcl-2、bax抗体免疫组织化学染色。结果 与对照组相比,各剂量组大鼠空腹血糖值均升高,且中、高剂量组动物血糖水平大于动物糖尿病判定值（16.67 mmol/L）。海马HE染色结果显示,各剂量组海马神经元结构呈现排列紊乱、细胞变形等变化,且随着染毒剂量增加海马组织结构病变更加严重;免疫组织化学染色结果显示,与对照组相比各剂量组大鼠海马组织bcl-2阳性细胞数目减少,胞质染色较淡,bax阳性反应神经元细胞数目增多,胞质深染。结论 2型糖尿病脑病大鼠模型构建成功,且糖尿病大鼠海马组织出现显著损伤。