EXPRESSION OF c－myc GENE AND BIOSYNTHESIS OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES IN ANTISENSE TRANSFECTANT HL_（60）~R－9

ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦｃ－ｍｙｃＧＥＮＥＡＮＤＢＩＯＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＭＡＣＲＯＭＯＬＥＣＵＬＥＳＩＮＡＮＴＩＳＥＮＳＥＴＲＡＮＳＦＥＣＴＡＮＴＨＬ_（６０）~Ｒ－９ＬｉＹｉｎｘｉｏｎｇ李尹雄，ＦａｎＭｕｚｈｅｎ范慕贞，Ｚｈａ...     

c—myc反义RNA转录体的构建及其对HL60细胞恶性表型的影响

Fujiwara T等的利用逆转录病毒载体介导的野生型p53基因疗法对肺癌的治疗作用的工作(见38页)引起了同道们的关注,Carbone DP及Minna JD对此专门作了精采评论,现摘译其重点内容以飨读者.     

c-myc反义RNA对NIH/3T3、人胃癌细胞生长及生物大分子合成的影响

采用c-myc反义RNA表达质粒与pSV_2neo质粒经电击穿孔技术共转染了NIH/3T3细胞和人胃癌823细胞,经适当浓度G418筛选后,获得其相应的转染细胞株。实验表明,该转染细胞在一定浓度Cd~(2 )诱导c-myc反义RNA表达后,细胞形态有所改变,生长速度受到抑制,DNA、RNA及蛋白质生物合成均有不同程度的变化。     

反义转染细胞HL_（60）~R－9的c-myc基因表达及其生物大分子的生物合成

作者构建了体外能双向转录ｃ－ｍｙｃ基因的重组质粒ＰＧＣ，以制备ＲＮＡ探针用于检测ｃ－ｍｙｃ反义ＲＮＡ转染细胞ＨＬＲ６０－９的ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ及反义ＲＮＡ表达。结果显示，Ｃｄ２＋诱导的ＨＬＲ６０－９细胞的ｃ－ｍｙｃ反义ＲＮＡ表达随Ｃｄ２＋浓度及作用时间的增加而增强，但ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达在诱导过程中逐渐减少，两者变化呈镜相关系。免疫组化法未能检出ｃ－ｍｙｃＰ６２蛋白的表达。３Ｈ－ＴｄＲ、３Ｈ－ＵＲ及３Ｈ－Ｌｅｕ掺入试验表明其ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质生物合成明显抑制。以上结果表明，ＨＬＲ６０－９细胞的恶性表型逆转及现所示的大分子生物合成抑制，与ｃ－ｍｙｃ反义ＲＮＡ阻断了ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达有关。     

反义转染细胞HL^R60—9的c—myc基因表达及其生物大分子的…

作者构建了体外能双向转录ｃ－ｍｙｃ基因的重组质粒ＰＧＣ，以制备ＲＮＡ探针用于检测ｃ－ｍｙｃ反义ＲＮＡ转染细胞ＨＬ＾Ｒ６０－９的ｃ－ｍｙｃ及反义ＲＮＡ表达，结果显示，Ｃｄ＾２＋诱导的ＨＬ＾Ｒ６０－９细胞的ｃ－ｍｙｃ反义ＲＮＡ表达随Ｃｄ＾２＋浓度及作用时间的增加而增强，但ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达在诱导过程中逐渐减少，两者变化呈镜相关系。免疫组化法未能检出ｃ－ｍｙｃＰ６２蛋白的表达，＾３Ｈ－ＴｄＲ，＾３Ｈ     

c—myc反义RNA转录体的构建及其对HL60细胞恶性表型的影响

本研究构建了c—myc反义RNA真核细胞可诱导表达质粒PGXC．用PGXC及PSV2neo质粒共转染入早幼粒细胞白HL60，经G418抗性筛选得到转染细胞HL60^R，与亲本细胞相比其生长速率明显减低：细胞周期中G1期细胞增多，而S期细胞相应减少；细胞形态及功能呈现分化诱导；在软琼脂上不能形成集落，该细胞在裸鼠体内的致瘤性亦显著减弱以至消失。