弗林蛋白酶在病毒感染中的生物学作用

大多数病毒感染宿主细胞需要其糖蛋白水解后才能实现,在某些情况下,糖蛋白的可切割性是病毒致病力的先决条件.这些病毒糖蛋白可被1种或几种宿主蛋白酶切割,弗林蛋白酶(Furin)就是常见的一种.Furin通过识别糖蛋白蛋白前体的特定氨基酸序列进行切割,从而进一步促进病毒感染.Furin对人类免疫缺陷病毒、黄病毒、丝状病毒和冠...     

呼吸道合胞病毒融合蛋白变异及其对抗体和药物效果的影响

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是造成婴幼儿与老年人下呼吸道感染和住院的主要原因之一.目前开发疫苗、抗体及药物成为防控RSV的热点,其主要靶点是融合蛋白(fusion glyco-protein,F).本文分析了现有RSV病毒株融合蛋白的变异情况,剖析了融合蛋白的结构特点...     

乙型肝炎病毒全基因克隆及序列分析发现一D/C基因型重组株

目的 构建含有adr、adw、ayw3个血清型的HBV全基因组质粒，并进行测序及序列分析。方法 从HBsAg携带者的血清中扩增出S区克隆，筛选出adr、adw、ayw血清型的血清，然后扩增HBV的全基因组，对扩增产物进行克隆测序。利用DNAStar的MegAlign，Phylogenetic tree对HBV全基因序列以及分段序列进行比较和进化树分析。结果 构建了含有adw、adr、ayw 3种血清型的HBV全基因组质粒，代码分别为：H1、H2、H3，对3株完成序列测定，按照S区核苷酸顺序划分基因型分别为B、C、D，全序列分型显示H1、H2为B、C基因型，与按S区的分型一致，但H3为C基因型，与按S区的分型不同，进一步的序列分析表明H3为一株异常的基因型，按照S区和preS2区分型为D基因型，但是全基因组／C／P／X区的进化树分析，H3株均位于C基因型，提示该异常的基因型可能是由于D／C基因型间基因重组引起，对重组位点进行了分析：3181nt-10nt、799-834nt为可能的重组位点所在区。结论 H3病毒株的发现进一步证明了HBV基因型间的基因重组，但澄清该问题需要在HBV感染的高流行区进一步的积累HBV异常基因型的全序列，以及发现新的基因型资料。     

乙型肝炎病毒核酸检测试剂临床应用的分析

目的 了解HBV/HCV/HIV联合核酸检测的临床应用.方法 使用Abbott Architecti2000化学发光检测盒对534份血浆样品进行血清学检测,Roche COBAS AmpliPrep/COBAS TaqManHBV Test试剂定量检测分别与2种联合核酸检测结果 进行比较分析.结果 81份HBsAg、HBeAg、抗-HBc 3项均阳性样品联合核酸检测均为HBV阳性,200份HBsAg阴性的样品中联合核酸检测试剂分别有11、19份检测为HBV阳性.HBV DNA定量检测>500 IU/ml的193份样品联合核酸检测试剂阳性符合率分别为96.9%、94.3%,117份样品<500 IU/ml阳性符合率分别为40.2%、45.3%,151份HBV DNA阴性样品联合试剂阴性符合率为99.3%、96.0%.结论 中国人群中存在一定比例低载量HBV携带者,联合核酸试剂作为献血员筛查的补充方法 在提高血液及其制品使用的安全性方面具有一定的临床使用意义.     

通用流感疫苗研发进展

流感病毒感染在世界范围内引起较高的发病率和死亡率。接种流感疫苗是预防和控制流感病毒感染及其严重并发症的有效手段,但由于流感病毒抗原的变异性,导致疫苗毒株与当年的流行毒株的抗原性并不完全匹配,造成流感疫苗的有效性降低,不能有效预防季节性和大流行流感,因此研发通用疫苗成为当前的主要趋势。本文综述了流感疫苗的发展及通用流感疫苗的研发平台,为未来新型流感疫苗的设计和开发提供参考。     

肠道病毒71型北京分离株全基因组序列分析

目的 了解2008年北京地区肠道病毒71型(EV71)分离株的全基因序列特点.方法 收集北京地区手足口病患儿的咽拭子样本12份,对其中1份样品08YM-3,经Vero细胞分离培养,提取病毒RNA.利用RT-PCR和5'、3'RACE扩增EV71全长基因.对PCR产物克隆和测序.利用DNAStar软件包的MegAlign进行核苷酸序列分析,构建系统进化树.结果 分离的EV71病毒株经过扩增后克隆得到3个涵盖EV71全基因组的阳性质粒,测序后拼接为EV71全基因组,命名为BJ08株.BJ08的5'非编码区(UTR)、P1、P2、P3、3'非编码区(UTR)和全基因组的核苷酸与C4亚型的参考序列同源性均最高,分别为95.6%～96.7%、88.3%～96.1%、78.1%～94.0%、90.8%～94.6%、85.9%～94.1%和90.9%～93.9%.BJ08株与其他亚型各区段的核酸同源性均低于90%.在全基因序列与VP1区构建的系统进化树中,BJ08株均与C4亚型在同一分支.BJ08株与C4亚型参考株VP1区的6个亚型相关氨基酸序列一致,VP1抗原性表位(92～107aa)无变异.结论 北京BJ08 EV71病毒分离株为C4业型.     

乙型肝炎病毒S和前S1基因的融合构建及其在P. pastoris酵母中的表达

目的构建含有乙型肝炎病毒(HBV)S和前S1(preS1,10～50AA)表位的ss1融合基因,并在P.pastoris酵母中表达SS1融合蛋白。方法以HBV全基因组质粒为模板,扩增出目的区段:S(1～222AA)、preS1(10～50AA),以酶切-PCR的方法将其连接为ss1融合基因,然后克隆入表达载体pPIC3.5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,筛选后进行诱导表达并对表达产物进行检测。结果表达产物的相对分子质量为30000左右,与抗HBs抗体和抗preS1抗体均有特异反应。结论ss1融合基因能够在P.pastoris酵母中高效表达,而且表达产物具有HBVS蛋白和preS1蛋白的抗原性,为进一步研究其免疫原性打下基础。     

16型人乳头瘤病毒（HPV16）中和表位及型内变异分析北大核心CSCD

世界范围内,宫颈癌是妇女第二位高发肿瘤.高危型人乳头瘤病毒（human papilloma-virus,HPV）持续感染是引发宫颈癌的主要原因,在所有高危型HPV中,HPV16流行最广泛.HPV主要衣壳蛋白（major capsid protein,L1）可以自组装成病毒样颗粒（virus-like particles,VLPs）,其形态及抗原性与天然病毒类似,可以刺激机体产生高效价保护性中和抗体.中和表位是HPV VLPs疫苗的结构基础,疫苗的效力主要取决于中和表位的完整性.目前基于中和单抗的HPV16表位研究取得了极大进展.随着免疫压力的增加,HPV16的型内变异株越来越多.1204条HPV16 L1氨基酸序列构建的进化树可以分为4个进化分支.同时,将其与114K参考序列相比,共挑选出8个＂高频突变位点＂,6个＂特有突变位点＂和20个＂表位相关位点＂.HPV诱导的中和抗体绝大多数都是型特异性的,但同一型别内的HPV所诱导的中和抗体对型别内的所有L1变异株是否都能保护尚无定论.剖析HPV16型的抗原表位及型内变异情况对设计高效价、高覆盖率的预防性疫苗至关重要.     

病毒疫苗的研究进展

病毒疫苗的接种是预防和控制病毒感染、传播、流行最为有效的手段。随着2019冠状病毒病（COVID-19）疫情的暴发,mRNA疫苗、基因工程疫苗、病毒载体疫苗等多个新平台和新技术被进一步开发和利用。总结目前病毒疫苗的主要类型以及与之相关的新技术和新方法,分析病毒疫苗的研发难点,提出加强对病原体多样性、机体免疫机制、疫苗类型、递送系统、新型佐剂机制等的基础研究,是加快对人类有重大影响的流行病毒疫苗和新突发传染病病毒疫苗等短缺疫苗研发的重要保障。